第2节 基因工程的基本操作程序
返回【多选题】IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷(SCID)患儿的IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C.为研究该患儿发病机制,研究人员应用大引物PCR定点诱变技术获得突变基因,如图所示。下列说法正确的是
A.PCR1中使用的引物有引物A、引物C
B.PCR2中使用的引物有引物B、大引物a
C.PCR1过程需要扩增3轮才能获得目标产物
D.PCR2过程中,为减少错误DNA片段的产生可适当升高复性温度
B.PCR2中使用的引物有引物B、大引物a
C.PCR1过程需要扩增3轮才能获得目标产物
D.PCR2过程中,为减少错误DNA片段的产生可适当升高复性温度
【多选题】重叠延伸PCR技术是设计含突变点的互补核苷酸片段作为引物,在PCR过程中,互补的核苷酸片段形成重叠,重叠的部分互为模板,通过多次PCR扩增,从而获得突变基因的方法。科研人员将枯草芽孢杆菌的甘油激酶的第270位氨基酸M突变为1,构建出了对甘油高效利用的枯草芽孢杆菌。下列说法正确的是
A.通过PCR1获得产物AB需要进行2轮PCR扩增
B.无法通过AB下链和CD上链获得突变产物AD
C.在同一反应体系中加入四种引物可以同时获得大量产物AB和CD
D.获取目的基因后,构建质粒载体,形成基因表达载体。基因表达载体上保证其能在宿主细胞中扩增的结构是复制原点,保证目的基因能正常转录的结构是启动子和终止子
B.无法通过AB下链和CD上链获得突变产物AD
C.在同一反应体系中加入四种引物可以同时获得大量产物AB和CD
D.获取目的基因后,构建质粒载体,形成基因表达载体。基因表达载体上保证其能在宿主细胞中扩增的结构是复制原点,保证目的基因能正常转录的结构是启动子和终止子
【多选题】红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器,使其能合成EPO。下列有关叙述正确的是
A.构建表达载体时需将EPO基因插入乳腺蛋白基因启动子的下游
B.一般情况下,该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达
C.用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中可合成并提取EPO
D.用PCR扩增人EPO基因时,需要一段已知的EPO基因核苷酸序列
A.构建表达载体时需将EPO基因插入乳腺蛋白基因启动子的下游
B.一般情况下,该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达
C.用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中可合成并提取EPO
D.用PCR扩增人EPO基因时,需要一段已知的EPO基因核苷酸序列
【单选题】白细胞介素2(IL2)参与移植排斥反应,是免疫调节因子,对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。科研人员将含IL2基因的DNA片段和质粒pPIC9K(部分结构如图所示)构建成重组质粒,并导入酵母菌GS115(组氨酸缺陷菌株)中,筛选到了能分泌IL2的工程菌株。下列叙述错误的是
A.组氨酸合成基因可作为标记基因筛选导入重组质粒的酵母菌细胞
B.构建重组质粒时可选用AvrⅡ和NotⅠ切割目的基因和pPIC9K质粒
C.重组质粒导入酵母菌GS115前,需要先用Ca2+处理酵母菌GS115细胞
D.抑制IL2基因的表达可在一定程度上减轻机体器官移植后的免疫排斥反应
A.组氨酸合成基因可作为标记基因筛选导入重组质粒的酵母菌细胞
B.构建重组质粒时可选用AvrⅡ和NotⅠ切割目的基因和pPIC9K质粒
C.重组质粒导入酵母菌GS115前,需要先用Ca2+处理酵母菌GS115细胞
D.抑制IL2基因的表达可在一定程度上减轻机体器官移植后的免疫排斥反应
【单选题】乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物质,由乳酸脱氢酶催化产生,影响白酒品质和风格。科研人员将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶基因(PD)替换为植物乳杆菌中的乳酸脱氢酶基因(LPG),可获得乳酸乙酯高产菌株,该过程如图所示。下列说法不正确的是
B.可以利用PCR技术筛选导入了LPG基因的受体细胞
C.酵母菌PD基因被替换为LPG基因的过程中发生了基因重组
D.电泳鉴定LPG基因时,当观察到核酸染料迁移至凝胶边缘时,停止电泳
A.可借助序列数据库等查询LPG基因的序列和功能
B.可以利用PCR技术筛选导入了LPG基因的受体细胞
C.酵母菌PD基因被替换为LPG基因的过程中发生了基因重组
D.电泳鉴定LPG基因时,当观察到核酸染料迁移至凝胶边缘时,停止电泳