【多选题】IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷（SCID）患儿的IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C．为研究该患儿发病机制，研究人员应用大引物PCR定点诱变技术获得突变基因，如图所示。下列说法正确的是

A．PCR1中使用的引物有引物A、引物C
B．PCR2中使用的引物有引物B、大引物a
C．PCR1过程需要扩增3轮才能获得目标产物
D．PCR2过程中，为减少错误DNA片段的产生可适当升高复性温度

 

 

【答案】：A, D

【解析】：A、在PCR,中，需要两种引物，将来在切取IKKβ基因时，需要在基因的左侧用限制酶Hind亚来切割，在基因的右侧用限制酶Sacl来切割，因此在该基因的左端应有限制酶Hind亚识别的序列，在基因的右端应有限制酶SacI识别的序列，因此在PCR,中结合到基因右端的引物序列从5到3"端的开始部位应含有限制酶SacI识别的序列，所以要用到引物C，从题图中看，另一个引物从5'到3”端的序列中开始部位应含有突变碱基C，所以要用到引物A，A正确;B、在PCR,中，有一个引物结合到了基因的左端，在它从5到3"的序列的开始部位应含有限制酶Hind亚识别的序列，所以要用到引物B，而另外的一个引物就是大引物中的一条链，它应该结合到基因的右端，且从5到3"端的序列中开始部位应含有Saci识别的序列，从图中看，它是大引物的b链，B错误;
C、PCRI过程主要是为了获得大引物a、b，则扩增2轮即可获得目标产物，C错误;D、由于大引物较长，含C与G的碱基较多，为减少非目标基因的获得，在PCR,复性过程中应适当提高退火温度，便于引物与模板链的结合，D正确。
故选AD。