第2节 微生物的培养技术与应用
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(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_____。
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的
_____________________________________________。
(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是__________________________________________。
完成下列关于微生物培养的相关问题:
(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑_______、_____和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_____、_____等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。
(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行_______(消毒、灭菌);操作者的双手需进行清洗和_____;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________________________。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_____。
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的
_____________________________________________。
(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是__________________________________________。
【简答题】炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。
(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。
(2)细菌鉴定:实验流程如图所示
①对配制的液体培养基等需采取_____方法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为_____(填“无机碳”或“有机碳”)。
②挑选可疑菌落制片后,用_____观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。
③接种可疑菌后,35℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是_____________________________________________。
对照组试管中应加入_____,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_____(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体,与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有_____。
(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。
(2)细菌鉴定:实验流程如图所示
②挑选可疑菌落制片后,用_____观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。
③接种可疑菌后,35℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是_____________________________________________。
对照组试管中应加入_____,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_____(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体,与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有_____。
【简答题】生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃料的消耗。科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)
(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_____,培养基灭菌采用的最适方法是_____法。
(3)测定培养液中微生物数量,可选用_____法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测_____,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用_____技术使脂肪酶能够重复使用。
(4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_____,培养基灭菌采用的最适方法是_____法。
(3)测定培养液中微生物数量,可选用_____法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测_____,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用_____技术使脂肪酶能够重复使用。
(4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
【单选题】下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养24~48小时
D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养24~48小时
D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
【简答题】高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。请据图回答:
(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看,属于固体培养基,配制时要加入_____作为凝固剂,从用途来看属于选择培养基,应以_____作为唯一碳源。
(2)配置固体培养基的基本步骤是( )
A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板
(3)溶化时,烧杯中加入琼脂后要不停地_____,防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为______________。
(4)①过程是_______,②过程所使用的接种方法是__________法。
(5)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放_____分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈,挑选相应的菌落,接种到Ⅱ号培养基进一步分离纯化后,再对菌种进行_____培养。
(2)配置固体培养基的基本步骤是( )
A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板
(3)溶化时,烧杯中加入琼脂后要不停地_____,防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为______________。
(4)①过程是_______,②过程所使用的接种方法是__________法。
(5)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放_____分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈,挑选相应的菌落,接种到Ⅱ号培养基进一步分离纯化后,再对菌种进行_____培养。