【简答题】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)

(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用____、____方法从油料作物中提取。
(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。
(3)测定培养液中微生物数量，可选用____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测____，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用____技术使脂肪酶能够重复使用。
(4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的____技术。

 

 

【答案】：(1)压榨　萃取(注：两空顺序无先后)
(2)碳源　高压蒸汽灭菌
(3)显微镜直接计数　酶活性(或酶活力)　固定化酶(或固定化细胞)
(4)PCR(或：多聚酶链式反应，聚合酶链式反应)

【解析】：

(1)因为植物油不易挥发，不能选用蒸馏法，可以用压榨法、萃取法从油料作物中提取。

(2)微生物的生长需要水、碳源、氮源和无机盐等，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源。分析灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等实验室常用灭菌方法的特点可知，培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。

(3)测定培养液中微生物的数量，可选用显微镜直接计数法直接计数。提取的脂肪酶在应用于实验或生产之前，要先检测其活性，以确定其应用价值。固定化酶技术可以实现酶的反复利用，降低了生产成本。

(4)在应用PCR技术扩增DNA片段时,DNA合成(延伸)时温度要控制在72℃,需要具有较强耐热性的DNA聚合酶催化。