【第 12327 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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下图为A、B、C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图。图中Amp^R为氨苄青霉素抗性基因，Tet^R为四环素抗性基因，LacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使大肠杆菌的菌落呈蓝色，否则菌落为白色。EcoRⅠ、PvuⅠ为两种限制酶，质粒上限制酶后的括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。请回答：
  
（1） 利用PCR技术对一个目的基因扩增n次，需要___________对引物，耐高温的DNA聚合酶能从引物的______ 端开始连接脱氧核苷酸，从而获得大量目的基因D。
（2） 据图分析，质粒A、C不能作为目的基因D的载体，理由分别是______________________。
将目的基因D与质粒B进行重组，应该选用限制酶___________和DNA连接酶。
（3） 在基因工程的操作过程中，需要检查目的基因D是否重组到质粒中，使用EcoRⅠ处理重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测。若电泳图谱中出现长度为1.6kb和3.1kb，或者___________kb和___________kb的片段，则可判断质粒B已与目的基因D重组成功。
（4） 利用自身不含LacZ基因且对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，要在已转化的含重组质粒、已转化的含空质粒的受体细胞和未转化成功的细胞中，筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞，方法是在含有______________________的培养基上培养，形成白色菌落的为导入重组质粒的受体细胞。

 【第 12326 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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用农杆菌侵染水稻（二倍体）细胞，获得1条染色体上R基因被插入T-DNA的个体T0。T-DNA插入基因的位置如图1所示。T0自交得T1，用P1、P2、P3为引物检测不同T1个体的基因组成情况，如图2所示。图1箭头方向为引物所在子链的延伸方向；R基因被T-DNA插入后，用P1、P2为引物无法完成PCR。下列叙述错误的是
 
A. 该实验中所用的引物P1、P2、P3为短双链核酸
B. R基因被T-DNA插入后导致基因被破坏，可能无法表达相应蛋白
C. 用P1、P2引物进行PCR得到产物的个体均为R基因纯合子
D. 若调查样本量足够大，W、H、M个体的比例约为1:2:1

 【第 12325 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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胆汁盐水解酶(BSH)对治疗小鼠糖尿病有明显的效果。天然大肠杆菌对外来DNA的入侵具有一定的抵抗力。科研人员从实验小鼠的粪便样本中提取出一种遗传上易驯化（对DNA入侵抵抗力弱）的大肠杆菌菌株M，构建BSH基因的表达载体（如下图）并导入菌株M体内，再将菌株M重新导入小鼠肠道。一段时间后，在小鼠的肠道中出现了能持续分泌BSH的大肠杆菌，小鼠糖尿病症状得到缓解。下列叙述错误的是
 
A. 天然大肠杆菌对外来DNA的入侵具有一定抵抗力，可能与细胞内的限制酶有关
B. 构建基因表达载体时，应该选用限制酶B和限制酶C切割质粒和目的基因
C. 转化前常用Ca²⁺处理大肠杆菌，使其处于能吸收外源DNA分子的状态
D. 将转基因菌株M导入小鼠肠道后，BSH基因在其肠道细胞中稳定复制并表达

 【第 12324 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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CRISPR/Cas9是一种由RNA指导的，利用Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术。CRISPR本质是基因组DNA上的一段特殊序列，它广泛存在于原核生物基因组中，是细菌和古细菌为应对病毒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制，而Cas9则是CRISPR相关核酸酶。该技术原理是一条单链向导RNA引导核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。具体过程是通过设计“向导”RNA中20个碱基的识别序列，实现对目标DNA上某个特定位置的切割或特定DNA片段的添加，如下图所示。下列相关叙述正确的是
 
A. Cas9相当于基因工程中的限制酶，具有识别特定脱氧核苷酸序列并使每一条链中特定部位断开的功能
B. 若用Cas9切开后添加特定的DNA片段，需要DNA聚合酶和DNA连接酶
C. “向导”RNA可在解旋酶和RNA聚合酶的催化下合成
D. Cas9能通过专一性破坏双链DNA分子中的磷酸二酯键来切割DNA分子

 【第 12323 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法错误的是
 

 【第 12322 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，获得此质粒的农杆菌表现出对两种抗生素的抗性。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示。请据图分析，下列叙述错误的是
 
A. 在构建重组质粒时，选用HindⅢ和SalⅠ两种酶切割目的基因的两端及质粒可防止目的基因和质粒的自我环化
B. 用分别含有氨苄青霉素和四环素的培养基筛选农杆菌时，发现含有目的基因的农杆菌不能在含四环素的培养基上生长，说明抗四环素基因未起到标记基因的作用
C. 采用农杆菌转化法是因为农杆菌感染烟草细胞时，其内的重组Ti质粒上的T-DNA能将目的基因插入烟草细胞的染色体DNA上
D. 利用植物组织培养技术培育转基因抗盐烟草植株，依据的原理是高度分化的植物细胞具有发育成完整植株的能力

 【第 12321 题】 【题型】：多选题 【章节】：高中生物学科内综合专题  
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大豆种子萌发过程中鲜重的变化曲线如下图所示。下列说法正确的是 

A.阶段Ⅰ中种子细胞的结合水/自由水的值下降
B.阶段Ⅱ中胚细胞合成的有解除休眠作用的赤霉素逐渐增多
C.阶段Ⅰ中种子细胞有机物总质量变多而鲜重增加
D.阶段Ⅲ后根向地生长的原因是生长素分布不均匀

 【第 12320 题】 【题型】：多选题 【章节】：第1节 减数分裂和受精作用  
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下图是同种生物体内的细胞分裂图像，以下有关叙述正确的是 

A.图①所示的细胞中会发生A—T和U—A 的碱基配对
B.图②所示的细胞中，同源染色体的分离同时，非同源染色体自由组合
C.图②、③所示细胞中染色体组的数目是图④所示细胞的2倍
D.四幅图所示的细胞不可能存在于同一个器官中

 【第 12319 题】 【题型】：单选题 【章节】：第1节 减数分裂和受精作用  
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下图为某哺乳动物体内处于不同分裂时期的细胞中部分染色体示意图。下列叙述正确的是 

A.形成甲细胞过程中发生了基因突变或染色体片段交换
B.乙细胞包含了4对同源染色体和2个染色体组
C.丙图①②染色体上的基因可能未发生重组
D.丁细胞形成的配子基因型为AX^b或aX^b 

 【第 12318 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 细胞的分化  
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科学家将𝑂𝑐𝑡3、𝑆𝑜𝑥2、𝑐−𝑀𝑦𝑒和𝐾𝑙𝑓4 基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，然后在培养ES细胞的培养基上培养这些细胞。2～3周后，这些细胞显示出ES 细胞的形态，具有活跃的分裂能力，称为iPS 细胞，这一研究成果有望为人类某些疾病的治疗带来福音。下列有关该实验的分析错误的是 
A.iPS 细胞分化成各种组织细胞的过程不能体现细胞的全能性
B.实验中逆转录病毒需经显微注射才能转入到小鼠成纤维细胞中
C.iPS 细胞的形成过程与植物组织培养的脱分化过程类似
D.iPS 细胞分化程度比小鼠成纤维母细胞分化程度低