第3节 基因工程的应用
返回【简答题】转基因抗病香蕉的培育过程如图甲所示,图乙表示PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题:
(1)质粒的化学本质是_____________________ 。
(2)利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒,即_____________________;将目的基因导入受体细胞的方法是______________________________
(3)将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来,使用的限制酶是____________,图中一令质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为____________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段:______________________________。
(4)转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体(数目)的变异? ____________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断,重组质粒中应含有_____________________基因作为标记基因。
(2)利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒,即_____________________;将目的基因导入受体细胞的方法是______________________________
(3)将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来,使用的限制酶是____________,图中一令质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为____________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段:______________________________。
(4)转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体(数目)的变异? ____________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断,重组质粒中应含有_____________________基因作为标记基因。
【简答题】在HIV侵染免疫细胞的过程中,细胞表面的CCR5蛋白是病毒的一个识别位点,协助介导了H进入细胞的过程。自然情况下,CCR5基因可缺失32个碱基对,成为它的等位基因(称为CCR5△32基因),如果一个人是CCR5△32基因的纯合子,那么他的免疫细胞表面没有完整的CCR5蛋白可用,就不易被HIV感染。2018年底,贺建奎团队声称通过 CRISPR/Cas9技术对数个胚胎进行了基因编辑,被编辑的婴儿的所有细胞不能合成完整的CCR5蛋白,从而天生免疫艾滋病。请回答:
(1)CCR5基因的表达需要________等不可缺少的调控组件,CCR5△32基因指导合成的肽链氨基酸数目减少,原因可能是mRNA________________。
(2)如图所示,CRISPR/Cas9是一种新型的基因组定点编辑系统,根据CCR5基因的序列设计sgRNA(向导RNA),该sgRNA的序列与CCR5基因部分序列互补配对诱导Cas9n蛋白结合于基因的特异性位点并切割,使CCR5基因发生碱基对的________,导致基因突变。该过程中,sgRNA和Cas9n对DNA的共同作用类似________酶的作用。
(3)为验证胚胎的CCR5基因是否成功被编辑,需要在胚胎发育早期,将细胞的微量全基因组DNA用________技术进行扩增,然后采用________技术检测目的基因以及转录出的mRNA是否存在,还需要对________蛋白进行检测。
(4)贺建奎团队的行为遭到了科学界的强烈谴责,因为____________________(写出两点)。
(1)CCR5基因的表达需要________等不可缺少的调控组件,CCR5△32基因指导合成的肽链氨基酸数目减少,原因可能是mRNA________________。
(2)如图所示,CRISPR/Cas9是一种新型的基因组定点编辑系统,根据CCR5基因的序列设计sgRNA(向导RNA),该sgRNA的序列与CCR5基因部分序列互补配对诱导Cas9n蛋白结合于基因的特异性位点并切割,使CCR5基因发生碱基对的________,导致基因突变。该过程中,sgRNA和Cas9n对DNA的共同作用类似________酶的作用。
(4)贺建奎团队的行为遭到了科学界的强烈谴责,因为____________________(写出两点)。
【简答题】科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因,利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中,进而培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题:
(1)据图分析可知,在构建的耐盐基因表达载体中,图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子、______________,其中启动子的功能是_________________________。
(2)据图分析可知,在构建耐盐基因表达载体时,需要用______________对质粒进行切割,从而保证_______________________________________。
(3)常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞,根据农杆菌的感染特点,将耐盐基因插入Ti质粒的________________上,经过转化作用进入水稻细胞,并将其插入_________________上,从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。
(4)检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是______________。
(2)据图分析可知,在构建耐盐基因表达载体时,需要用______________对质粒进行切割,从而保证_______________________________________。
(3)常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞,根据农杆菌的感染特点,将耐盐基因插入Ti质粒的________________上,经过转化作用进入水稻细胞,并将其插入_________________上,从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。
(4)检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是______________。
【简答题】 乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的影响奶牛养殖业的两种疾病。科学家利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)的双转基因奶牛新品种。下图为基因表达载体,回答下列问题:
(1)乳铁蛋白肽基因和质粒连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是_____________________ 。乳铁蛋白肽基因只在转基因奶牛的乳腺细胞表达,人干扰素基因除了可在转基因奶牛的乳腺细胞中表达,还可在转基因奶牛的其他组织细胞中表达,这与构建表达载体时_____________________ 的选择有关。
(2)牛胎儿成纤维细胞可作为受体细胞,将乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因导人牛胎儿成纤维细胞后,将该细胞注入_____________________细胞,通过电刺激使_____________________,构建重组胚胎。
(3)重组胚胎经过胚胎的早期培养后,移人代孕母牛体内,生出转基因犊牛。重组胚胎早期培养过程中,培养液的成分除一些有机盐和无机盐外,还需要添加__________________________ (答出四点),以及血清等物质。当胚胎发育到____________,可移植到代孕母牛体内。
(4)若获得的转基因奶牛(人干扰素基因已经整合到奶牛的基因组中)仍感染口蹄疫,根据中心法则分析,可能的原因是______________________________ 。
(2)牛胎儿成纤维细胞可作为受体细胞,将乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因导人牛胎儿成纤维细胞后,将该细胞注入_____________________细胞,通过电刺激使_____________________,构建重组胚胎。
(3)重组胚胎经过胚胎的早期培养后,移人代孕母牛体内,生出转基因犊牛。重组胚胎早期培养过程中,培养液的成分除一些有机盐和无机盐外,还需要添加__________________________ (答出四点),以及血清等物质。当胚胎发育到____________,可移植到代孕母牛体内。
(4)若获得的转基因奶牛(人干扰素基因已经整合到奶牛的基因组中)仍感染口蹄疫,根据中心法则分析,可能的原因是______________________________ 。
【简答题】为使玉米获得抗除草剂性状,需进行如图所示操作。报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。
(1)从基因文库中获得的除草剂抗性基因G可用_______技术进行扩增;构建含有除草剂抗性基因G(目的基因)的基因表达载体时,需要的工具酶有____________。为使除草剂抗性基因G在农杆菌中高效表达,需要把目的基因片段插入到表达载体的_________之间
(2)图中筛选1时需要在培养基中加入_____以筛选成功导入表达载体的农杆菌;图中筛选2时需要_____________以筛选出呈现蓝色的组织。
(3)将幼胚诱导培育成愈伤组织的过程中,需要在培养基中加入_____以调控发育方向。为从个体水平上检测图中A玉米植株是否具有抗除草剂性状,可采用的方法是__________。
(2)图中筛选1时需要在培养基中加入_____以筛选成功导入表达载体的农杆菌;图中筛选2时需要_____________以筛选出呈现蓝色的组织。
(3)将幼胚诱导培育成愈伤组织的过程中,需要在培养基中加入_____以调控发育方向。为从个体水平上检测图中A玉米植株是否具有抗除草剂性状,可采用的方法是__________。