第2节 微生物的培养技术与应用
返回【简答题】螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素,幽门螺杆菌重要毒性物质尿素酶可以分解口腔内的尿素等物质产生难闻的、严重的氨臭味。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:回答下列问题:
(1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为Hp含有_______________________,它能以尿素作为氮源;若有Hp,则菌落周围会出现________________ 色环带。
(2)步骤X表示________________。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液涂布到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________________菌落。
(3)若在稀释倍数为106倍下涂布了三个平板(每次取0.1mL),统计菌落数分别为169、171、170,则稀释前1mL菌液中所含螺杆菌为________________个。这种计数方法统计的数据结果往往会比显微镜直接计数的结果小,其原因是________________________________ 。
(4)临床上用14 C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14 C标记的分解为NH3和14CO2。
(2)步骤X表示________________。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液涂布到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________________菌落。
(3)若在稀释倍数为106倍下涂布了三个平板(每次取0.1mL),统计菌落数分别为169、171、170,则稀释前1mL菌液中所含螺杆菌为________________个。这种计数方法统计的数据结果往往会比显微镜直接计数的结果小,其原因是________________________________ 。
(4)临床上用14 C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14 C标记的分解为NH3和14CO2。
【简答题】测定水样是否符合饮用水卫生标准,常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示,滤膜法的大致流程:用滤膜过滤待测水样一水样中的细菌留在滤膜上一将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB培养基)上培养一统计菌落数目。据图回答问题:
(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,其中需要进行灭菌处理的是_______________。与过滤有关的操作都要在_______________旁进行。
(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上,这属于微生物培养中的______________操作。从物理状态的角度分析,EMB培养基属于_______________培养基。
(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定,无菌操作下将l0 ml 待测水样加入到90 ml无菌水中,稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养 基上的菌落数平均为124,黑色菌落数平均为31,则推测l升待测水样中的大肠杆菌数目为_______________个。
(4)该同学进一步思考,利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样,一份待测水样来自变酸的果酒,从中检测到两种微生物,它们在结构上的主要区别是__________。另一份要通过测量蓝藻的数目来研究水华,应更换上述过滤装置中的滤膜,选择孔径_____(填“更小” “不变”或“更大”)的滤膜,而培养基配方中则必需添加__________(从“水、无机盐、碳源、氮源”中选择)。
(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上,这属于微生物培养中的______________操作。从物理状态的角度分析,EMB培养基属于_______________培养基。
(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定,无菌操作下将l0 ml 待测水样加入到90 ml无菌水中,稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养 基上的菌落数平均为124,黑色菌落数平均为31,则推测l升待测水样中的大肠杆菌数目为_______________个。
(4)该同学进一步思考,利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样,一份待测水样来自变酸的果酒,从中检测到两种微生物,它们在结构上的主要区别是__________。另一份要通过测量蓝藻的数目来研究水华,应更换上述过滤装置中的滤膜,选择孔径_____(填“更小” “不变”或“更大”)的滤膜,而培养基配方中则必需添加__________(从“水、无机盐、碳源、氮源”中选择)。
【简答题】日前微博传言手机细菌比马桶多。如图,央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题:
(1) 该实验需制备培养基,培养基一般都含有水、碳源、氮源、___________________,培养基一般放人___________中进行灭菌。
(2) 据图。两电视台均采用___________法接种,该方法需要___________________。(多选)
A.接种环 B.酒精灯 C.移液管 D.涂布器 E,无菌水
(3) 通过观察菌落的___________________。可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为原因是:
______________________________________________________
(4) 按图操作取样面积。实验员测定某手机屏幕的细菌数量,将l0 ml,菌悬液进行梯度稀释。分别取0.1 ml。稀释倍数为l02的样品液接种到三个培养基上。
培养一段时间后。统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏幕的细菌数为______个/平方厘米。该实验对照组该如何设置________________________。
(2) 据图。两电视台均采用___________法接种,该方法需要___________________。(多选)
A.接种环 B.酒精灯 C.移液管 D.涂布器 E,无菌水
(3) 通过观察菌落的___________________。可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为原因是:
______________________________________________________
(4) 按图操作取样面积。实验员测定某手机屏幕的细菌数量,将l0 ml,菌悬液进行梯度稀释。分别取0.1 ml。稀释倍数为l02的样品液接种到三个培养基上。
培养一段时间后。统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏幕的细菌数为______个/平方厘米。该实验对照组该如何设置________________________。
【简答题】一科技小组欲从土壤中筛选纤维素分解菌。请回答下列问题:
(1)配制能筛选纤维素分解菌的培养基时,要选用以纤维素为唯一_______的选择培养基,理由是____________。对培养基灭菌时常采用的方法是___________________。
(2)将1 g土壤样品稀释104倍,然后在三个平板上用涂布法分别接种0.1 mL稀释液,经适当培养后3个平板上的菌落数分别为42、40和44。由此推测原土壤中1 g样品中的活菌数为______;涂布平板时滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是__________。
(3)为鉴定不同菌株分解纤维素的能力,在配制含有刚果红的鉴别培养基上接种第(2)步中的不同菌株,原因是刚果红可与纤维素形成_____色复合物。应选择透明圈直径与菌落直径比值_____(填“大”或“小”)的菌落用于生产。
(1)配制能筛选纤维素分解菌的培养基时,要选用以纤维素为唯一_______的选择培养基,理由是____________。对培养基灭菌时常采用的方法是___________________。
(2)将1 g土壤样品稀释104倍,然后在三个平板上用涂布法分别接种0.1 mL稀释液,经适当培养后3个平板上的菌落数分别为42、40和44。由此推测原土壤中1 g样品中的活菌数为______;涂布平板时滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是__________。
(3)为鉴定不同菌株分解纤维素的能力,在配制含有刚果红的鉴别培养基上接种第(2)步中的不同菌株,原因是刚果红可与纤维素形成_____色复合物。应选择透明圈直径与菌落直径比值_____(填“大”或“小”)的菌落用于生产。
【简答题】苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如图所示:①为土壤样品。请回答下列问题:
(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入_____作为碳源。②中不同浓度碳源的培养基_____(A.影响;B.不影响)细菌的数量。如果要测定②中活细菌数量,常采用__________法。
(2)④为对照,微生物在④中不生长,在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于
_____________________________________________;
使用_____法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养?
(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?
(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染?
(2)④为对照,微生物在④中不生长,在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于
_____________________________________________;
使用_____法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养?
(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?
(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染?