【第 12324 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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CRISPR/Cas9是一种由RNA指导的，利用Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术。CRISPR本质是基因组DNA上的一段特殊序列，它广泛存在于原核生物基因组中，是细菌和古细菌为应对病毒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制，而Cas9则是CRISPR相关核酸酶。该技术原理是一条单链向导RNA引导核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。具体过程是通过设计“向导”RNA中20个碱基的识别序列，实现对目标DNA上某个特定位置的切割或特定DNA片段的添加，如下图所示。下列相关叙述正确的是
 
A. Cas9相当于基因工程中的限制酶，具有识别特定脱氧核苷酸序列并使每一条链中特定部位断开的功能
B. 若用Cas9切开后添加特定的DNA片段，需要DNA聚合酶和DNA连接酶
C. “向导”RNA可在解旋酶和RNA聚合酶的催化下合成
D. Cas9能通过专一性破坏双链DNA分子中的磷酸二酯键来切割DNA分子

 【第 12323 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法错误的是
 

 【第 12322 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，获得此质粒的农杆菌表现出对两种抗生素的抗性。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示。请据图分析，下列叙述错误的是
 
A. 在构建重组质粒时，选用HindⅢ和SalⅠ两种酶切割目的基因的两端及质粒可防止目的基因和质粒的自我环化
B. 用分别含有氨苄青霉素和四环素的培养基筛选农杆菌时，发现含有目的基因的农杆菌不能在含四环素的培养基上生长，说明抗四环素基因未起到标记基因的作用
C. 采用农杆菌转化法是因为农杆菌感染烟草细胞时，其内的重组Ti质粒上的T-DNA能将目的基因插入烟草细胞的染色体DNA上
D. 利用植物组织培养技术培育转基因抗盐烟草植株，依据的原理是高度分化的植物细胞具有发育成完整植株的能力

 【第 12206 题】 【题型】：单选题 【章节】：第3节 基因工程的应用  
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采用CRISPR/Cas9基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因定点插入到受精卵的Y染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是
A．基因编辑处理的受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液
B．基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期，须将其植入同期发情小鼠的子官，才可获得表达EGFP的小鼠
C．分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠
D．通过观察早期胚胎的荧光，能表达EGFP的即为雄性小鼠胚胎

 【第 12205 题】 【题型】：单选题 【章节】：第3节 基因工程的应用  
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利用基因工程技术生产人胰岛素时，构建重组质粒的过程如图所示，该方法获得的胰岛素分子因容易发生聚合而影响效果。下列说法正确的是
 
A．为避免目的基因任意连接和载体自身环化，应选用Sma Ⅰ、Pst Ⅰ两种酶对它们进行处理
B．基因表达载体除目的基因、标记基因外，还必须有起始密码子和终止密码子等
C．利用乳腺生物反应器生产人胰岛素时，应选用哺乳动物的乳腺细胞为受体细胞
D．可利用蛋白质工程技术直接对胰岛素分子进行改造，使其功能更符合人类的要求

 【第 12204 题】 【题型】：单选题 【章节】：第3节 基因工程的应用  
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下图1表示限制酶Spe Ⅰ、Xba Ⅰ识别序列和切割位点，图2表示基因P(960 bp)、基因Q(840 bp)的限制酶Spe Ⅰ或Xba Ⅰ的酶切图谱和融合基因，图3表示几种基因经限制酶Spe Ⅰ或Xba Ⅰ处理后进行电泳(电泳条带表示特定长度的DNA片段)得到的带谱图。下列相关分析错误的是
 　　　　 
A．基因P经限制酶Spe Ⅰ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅰ相同
B．基因Q经限制酶Xba Ⅰ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅱ相同
C．融合基因经限制酶Spe Ⅰ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅲ相同
D．融合基因经限制酶Xba Ⅰ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅳ相同

 【第 12203 题】 【题型】：单选题 【章节】：第3节 基因工程的应用  
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MAb技术是一种通过DNA编码产生单克隆抗体的技术，比传统的单克隆抗体制备方法有更多的发展潜力。此前发表的研究显示，以埃博拉病毒为目标且高度优化的基于DNA的单克隆抗体，单次给药在小鼠血液中产生了高水平的抗体表现。下图是dMAb技术在埃博拉病毒感染疾病的临床研究中的操作流程。下列相关叙述错误的是
 
A．dMAb技术涉及蛋白质工程，需要通过抗体结构1和结构2的氨基酸序列人工合成目的基因1和2
B．过程②是基因工程的核心步骤
C．与传统利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体的技术相比，dMAb技术在抗体的制备上的优势有产生抗体的细胞种类不局限于免疫细胞(浆细胞)等
D．重组质粒的构建所需的工具只有限制酶和DNA连接酶

 【第 12040 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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限制酶BamHI和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHI切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒，下列相关叙述错误的是
A.酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素

B.目的基因经限制酶BamHI切割后形成的黏性末端是-CTAG-

 【第 12036 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量；酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌内催化乳酸生成的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的酵母工程菌株。下图为通过双酶切构建重组质粒的过程。GTG为原核生物偏好的起始密码子编码序列，ATG为真核生物偏好的起始密码子编码序列。下列说法正确的是

 【第 12035 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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脱氧核苷三磷酸（dNTP）和双脱氧核苷三磷酸（ddNTP、ddN—P_α~P_β~P_γ）结构类似，两者的区别是ddNTP脱氧核糖第3位碳原子上的羟基被氢原子取代。DNA复制时，ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸。现有一些序列为5’—GCCTAAGATCGTA—3’的DNA分子单链片段，拟通过PCR获得被32P标记且3’端为碱基A的不同长度的子链DNA。在反应管中加入单链模板、引物、底物、TaqDNA聚合酶、Mg²⁺及缓冲溶液。下列叙述正确的是
A．反应底物是dCTP、dGTP、dTTP和γ位³²P标记的ddATP
B．TaqDNA聚合酶催化磷酸二酯键的形成，并需要Mg2+激活
C．ddNTP与dNTP竞争脱氧核苷酸链的3’末端和5’末端
D．实验中可得到4种不同长度被³²P标记且3’端为碱基A的子链DNA