【第 6986 题】 【题型】:简答题 【章节】:第3节 基因工程的应用
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【参考答案】(1)需要 (2)感受态 Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性) (3)白色 (4)SHH基因转录的mRNA
为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性,科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针,进行分子杂交实验,以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图:(Amp表示氨苄青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表达)
请回答问题:
(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时,________(填“需要”或“不需要”)启动子。
(2)步骤②中,用Ca2+处理大肠杆菌,使之成为___________________________________
细胞,然后导入重组载体。实验中,用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌,未导入质粒的细菌将会死亡,原因是这些细菌不含有__________基因。
(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落,易于识别。根据上述原理可以初步判断________(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。
(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中,探针将与______________________形成杂交带,进而判断SHH基因的转录情况。