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	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第2节基因工程的基本操作..
【试题】 11	二苯乙烯苷是我国传统药材何首乌特有的药效成分，具有抗氧化、清除自由基等功效。合成二苯乙烯苷的关键酶是芪合酶（STS），为获得大量的STS，研究人员利用质粒（如图2）将STS基因（如图1）转化到大肠杆菌细胞内进行表达。回答下列问题： (1)采用_________技术可以快速、大量获得目的基因，据图1分析，利用该技术扩增STS基因时，应选择的引物是________。 (2)为使STS基因与质粒正确连接，需在所选引物的_______（填“3”或“5’”）端分别增加相应限制酶的酶切位点，同时选用__________两种限制酶切割质粒。 (3)启动子是_______识别和结合的部位。很多启动子具有物种特异性，在图2质粒中插入STS基因，其上游启动子应选择_______（填写字母）。 A．何首乌启动子 B．大肠杆菌启动子 C．农杆菌启动子 (4)可将转化后的大肠杆菌接种到含________的培养基上进行筛选。能在该培养基上生长的大肠杆菌是否一定含有STS基因?请判断并说明理由：________。 (5)科研人员利用相关技术替换了STS某个位点的氨基酸，提高了STS的抗氧化能力，该技术属于_________。【第 12037 题】【题型】：简答题【章节】：第2节基因工程的基本操作程序【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)PCR 引物2 和引物 3 (2)5' XhoI和 NdeI (3)RNA聚合酶 B (4)氨苄青霉素不一定，含氨苄青霉素抗性基因的未重组载体(空质粒)也可导入大肠杆菌，使大肠杆菌在培养基上形成菌落 (5)蛋白质工程二苯乙烯苷是我国传统药材何首乌特有的药效成分，具有抗氧化、清除自由基等功效。合成二苯乙烯苷的关键酶是芪合酶（STS），为获得大量的STS，研究人员利用质粒（如图2）将STS基因（如图1）转化到大肠杆菌细胞内进行表达。回答下列问题： (1)采用_________技术可以快速、大量获得目的基因，据图1分析，利用该技术扩增STS基因时，应选择的引物是________。 (2)为使STS基因与质粒正确连接，需在所选引物的_______（填“3”或“5’”）端分别增加相应限制酶的酶切位点，同时选用__________两种限制酶切割质粒。 (3)启动子是_______识别和结合的部位。很多启动子具有物种特异性，在图2质粒中插入STS基因，其上游启动子应选择_______（填写字母）。 A．何首乌启动子 B．大肠杆菌启动子 C．农杆菌启动子 (4)可将转化后的大肠杆菌接种到含________的培养基上进行筛选。能在该培养基上生长的大肠杆菌是否一定含有STS基因?请判断并说明理由：________。 (5)科研人员利用相关技术替换了STS某个位点的氨基酸，提高了STS的抗氧化能力，该技术属于_________。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第2节基因工程的基本操作..
【试题】 12	光敏色素基因在调节作物生长发育中具有重要作用。为探讨玉米中光敏色素基因A（含大约256个碱基对）在棉花种质资源中的利用价值，研究人员将A基因转入到棉花中，对棉花受体细胞进行检测，并通过电泳技术分析结果。该过程所用质粒上相关限制酶的酶切位点如图甲所示，电泳检测结果如图乙所示。回答下列问题： (1)操作过程中需要用到的工具有___________，构建表达载体时应选用_____________这两种限制酶处理质粒。 (2)为保证通过mRNA逆转录获得的光敏色素基因A和质粒的充分连接，一般需要在该基因上、下游引物的___________端分别添加酶切位点。一般在这两部位添加不同的酶切位点，主要目的是___________。 (3)A同学认为仅由图乙电泳结果不能确定1、3、4号转基因棉花均培育成功，理由是_________。 (4)在生物学领域，对光敏色素进行分子改造使用的技术是蛋白质工程。获得光敏色素分子的基本途径为：____________→设计预期的光敏色素的分子结构→推测应有的___________→找到相对应的脱氧核苷酸序列。【第 12033 题】【题型】：简答题【章节】：第2节基因工程的基本操作程序【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)限制性内切核酸酶(限制酶)、DNA连接酶和载体BcI和HindⅢ (2)5'使DNA片段能定向插入表达载体，减少自连 (3)由图乙可知1、3、4号均成功导入光敏色素基因A，但转基因棉花是否培育成功还需要进行生物个体水平上的鉴定 (4) 预期的光敏色素的功能氨基酸序列光敏色素基因在调节作物生长发育中具有重要作用。为探讨玉米中光敏色素基因A（含大约256个碱基对）在棉花种质资源中的利用价值，研究人员将A基因转入到棉花中，对棉花受体细胞进行检测，并通过电泳技术分析结果。该过程所用质粒上相关限制酶的酶切位点如图甲所示，电泳检测结果如图乙所示。回答下列问题： (1)操作过程中需要用到的工具有___________，构建表达载体时应选用_____________这两种限制酶处理质粒。 (2)为保证通过mRNA逆转录获得的光敏色素基因A和质粒的充分连接，一般需要在该基因上、下游引物的___________端分别添加酶切位点。一般在这两部位添加不同的酶切位点，主要目的是___________。 (3)A同学认为仅由图乙电泳结果不能确定1、3、4号转基因棉花均培育成功，理由是_________。 (4)在生物学领域，对光敏色素进行分子改造使用的技术是蛋白质工程。获得光敏色素分子的基本途径为：____________→设计预期的光敏色素的分子结构→推测应有的___________→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 13	抗除草剂转基因作物的推广可有效减轻除草劳动强度、提高农业生产效率。图1为抗除草剂转基因玉米的技术流程。 (1)构建含除草剂抗性基因的表达载体，传统的方法是目的基因通过限制酶和____________酶与载体进行重组。载体上目的基因插入位点的限制酶识别序列________(填“能”或“不能”)出现在目的基因内部，可通过________技术在目的基因两侧添加相应限制酶识别序列，以便构建表达载体。 (2)为了减少限制酶识别序列的影响，科研人员研发了新的DNA重组方法：无缝克隆技术(图2)，其中InFusion酶可以将任何具有相同15 bp末端序列的线性DNA分子进行连接，类似同源重组。 ①科研人员希望应用以上方法构建含有A和GUS基因的重组DNA分子，首先获得了3种DNA分子如图3，然后混合进行InFusion反应。如果引物2上额外添加的片段对应GUS基因中加粗的e片段，那么引物1和引物4上额外增加的片段分别对应载体中的片段________。完成重组反应后，将重组表达载体加入经过________处理的农杆菌中。 ②为筛选成功转入重组DNA分子的菌落，可以选取引物________扩增目的基因并电泳检测。请在图4中画出阳性菌落的电泳结果。 (3)农杆菌转化愈伤组织时，用含________的选择培养基筛选转化的愈伤组织。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织(假阳性)也可能在选择培养基上生长。已知报告基因GUS表达产物能催化无色物质K呈现蓝色，则排除假阳性的原理是：报告基因GUS在________细胞中表达，而在农杆菌中不表达，因此用无色物质K处理上述能正常生长的愈伤组织，假阳性的农杆菌________(填“出现”或“不出现”)蓝色。【第 12023 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)DNA连接　不能　PCR　(2)①a、d　Ca²⁺　②1和4 (3)除草剂　真核　不出现抗除草剂转基因作物的推广可有效减轻除草劳动强度、提高农业生产效率。图1为抗除草剂转基因玉米的技术流程。 (1)构建含除草剂抗性基因的表达载体，传统的方法是目的基因通过限制酶和____________酶与载体进行重组。载体上目的基因插入位点的限制酶识别序列________(填“能”或“不能”)出现在目的基因内部，可通过________技术在目的基因两侧添加相应限制酶识别序列，以便构建表达载体。 (2)为了减少限制酶识别序列的影响，科研人员研发了新的DNA重组方法：无缝克隆技术(图2)，其中InFusion酶可以将任何具有相同15 bp末端序列的线性DNA分子进行连接，类似同源重组。 ①科研人员希望应用以上方法构建含有A和GUS基因的重组DNA分子，首先获得了3种DNA分子如图3，然后混合进行InFusion反应。如果引物2上额外添加的片段对应GUS基因中加粗的e片段，那么引物1和引物4上额外增加的片段分别对应载体中的片段________。完成重组反应后，将重组表达载体加入经过________处理的农杆菌中。 ②为筛选成功转入重组DNA分子的菌落，可以选取引物________扩增目的基因并电泳检测。请在图4中画出阳性菌落的电泳结果。 (3)农杆菌转化愈伤组织时，用含________的选择培养基筛选转化的愈伤组织。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织(假阳性)也可能在选择培养基上生长。已知报告基因GUS表达产物能催化无色物质K呈现蓝色，则排除假阳性的原理是：报告基因GUS在________细胞中表达，而在农杆菌中不表达，因此用无色物质K处理上述能正常生长的愈伤组织，假阳性的农杆菌________(填“出现”或“不出现”)蓝色。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 14	铝在土壤中常以铝酸盐的形式存在，可造成土壤酸化而影响植物生长。铝能抑制植物根尖细胞的分裂，抑制根生长，破坏根组织。部分植物能通过根部细胞膜上的苹果酸通道蛋白（ALMT）将苹果酸转运到细胞外来缓解铝毒。可将 ALMT 基因导入植物细胞，来培育转基因耐铝植物，请回答下列问题：（1）可以从基因文库中获得 ALMT 基因，在合成 cDNA 的过程中，反应体系内加入的物质除 mRNA 和 ATP 外，还包括__________________、____________________________________。（2）可将 ALMT 基因插入农杆菌 Ti 质粒的__________________片段中，以便目的基因进入植物细胞。利用该方法导入的目的基因的遗传一般遵循孟德尔遗传定律，原因是____________________________________。（3）启动子是__________________特异性识别并结合的位点，能调控目的基因的表达。ALMT基因的启动子有两种类型，其中 α 启动子能使 ALMT 基因在酸性土壤的诱导下表达，β 启动子能使 ALMT 基因高效表达而无需酸性诱导。则在获得转 ALMT 基因耐铝植物时应使用___________启动子，不使用另外一种启动子的原因是______________________。【第 11367 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）四种脱氧核苷酸逆转录酶（2）T-DNA T-DNA 可携带目的基因，整合并转移到宿主细胞染色体的 DNA 上（3）RNA 聚合酶 α β 启动子可使植物根细胞持续转运苹果酸，导致正常土壤酸化，并影响植物自身的生长（3 分）铝在土壤中常以铝酸盐的形式存在，可造成土壤酸化而影响植物生长。铝能抑制植物根尖细胞的分裂，抑制根生长，破坏根组织。部分植物能通过根部细胞膜上的苹果酸通道蛋白（ALMT）将苹果酸转运到细胞外来缓解铝毒。可将 ALMT 基因导入植物细胞，来培育转基因耐铝植物，请回答下列问题：（1）可以从基因文库中获得 ALMT 基因，在合成 cDNA 的过程中，反应体系内加入的物质除 mRNA 和 ATP 外，还包括__________________、____________________________________。（2）可将 ALMT 基因插入农杆菌 Ti 质粒的__________________片段中，以便目的基因进入植物细胞。利用该方法导入的目的基因的遗传一般遵循孟德尔遗传定律，原因是____________________________________。（3）启动子是__________________特异性识别并结合的位点，能调控目的基因的表达。ALMT基因的启动子有两种类型，其中 α 启动子能使 ALMT 基因在酸性土壤的诱导下表达，β 启动子能使 ALMT 基因高效表达而无需酸性诱导。则在获得转 ALMT 基因耐铝植物时应使用___________启动子，不使用另外一种启动子的原因是______________________。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 15	转基因抗病香蕉的培育过程如图甲所示，图乙表示PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：（1）质粒的化学本质是______________________________ 。（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即______________________________；将目的基因导入受体细胞的方法是_____________________________________________ （3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是_______________，图中一令质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为_______________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：_____________________________________________。（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异? _______________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有______________________________基因作为标记基因。【第 11320 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)DNA（1分) (2)基因表达载体的构建农杆菌转化法 (3) PstⅠ和EcoRⅠ 3个和4 如图： (4)否抗卡那霉素转基因抗病香蕉的培育过程如图甲所示，图乙表示PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：（1）质粒的化学本质是______________________________ 。（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即______________________________；将目的基因导入受体细胞的方法是_____________________________________________ （3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是_______________，图中一令质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为_______________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：_____________________________________________。（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异? _______________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有______________________________基因作为标记基因。

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