钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用。科学家通过将CDPK基因导入拟南芥(双子叶植物)中,来获得具有抗性的新品种。如图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图,图中标记了限制酶的切割位点。据此回答下列问题:
(1)通过基因工程,将CDPK基因导入拟南芥中,获得具有抗性的新品种的育种原理是____________________。为了使CDPK基因插入质粒中,应选取____________________(两种限制性内切核酸酶)分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。
(2)利用PCR可获得大量的CDPK基因,PCR扩增的第一步:用微量移液器在微量离心管中加入缓冲液、4种脱氧核苷酸的等量混合液、水、还需要加入________________________。PCR的产物一般通过琼脂凝胶电泳来鉴定,在凝胶中的DNA分子的迁移速率与_______________有关。
(3)将CDPK基因导入拟南芥细胞通常采用的方法是_________________________________。
(4)检测CDPK基因是否成功表达的方法是______________________,若有杂交带出现,表明已产生了CDPK。
【第 12200 题】 【题型】:简答题 【章节】:第3节 基因工程的应用
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【参考答案】(1)基因重组 Smal Ⅰ和Xba Ⅰ (2)TaqDNA聚合酶,两种引物和模板DNA 凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象 (3)农杆菌转化法 (4)抗原—抗体杂交
钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用。科学家通过将CDPK基因导入拟南芥(双子叶植物)中,来获得具有抗性的新品种。如图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图,图中标记了限制酶的切割位点。据此回答下列问题:
(1)通过基因工程,将CDPK基因导入拟南芥中,获得具有抗性的新品种的育种原理是____________________。为了使CDPK基因插入质粒中,应选取____________________(两种限制性内切核酸酶)分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。
(2)利用PCR可获得大量的CDPK基因,PCR扩增的第一步:用微量移液器在微量离心管中加入缓冲液、4种脱氧核苷酸的等量混合液、水、还需要加入________________________。PCR的产物一般通过琼脂凝胶电泳来鉴定,在凝胶中的DNA分子的迁移速率与_______________有关。
(3)将CDPK基因导入拟南芥细胞通常采用的方法是_________________________________。
(4)检测CDPK基因是否成功表达的方法是______________________,若有杂交带出现,表明已产生了CDPK。