【第 12325 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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胆汁盐水解酶(BSH)对治疗小鼠糖尿病有明显的效果。天然大肠杆菌对外来DNA的入侵具有一定的抵抗力。科研人员从实验小鼠的粪便样本中提取出一种遗传上易驯化（对DNA入侵抵抗力弱）的大肠杆菌菌株M，构建BSH基因的表达载体（如下图）并导入菌株M体内，再将菌株M重新导入小鼠肠道。一段时间后，在小鼠的肠道中出现了能持续分泌BSH的大肠杆菌，小鼠糖尿病症状得到缓解。下列叙述错误的是
 
A. 天然大肠杆菌对外来DNA的入侵具有一定抵抗力，可能与细胞内的限制酶有关
B. 构建基因表达载体时，应该选用限制酶B和限制酶C切割质粒和目的基因
C. 转化前常用Ca²⁺处理大肠杆菌，使其处于能吸收外源DNA分子的状态
D. 将转基因菌株M导入小鼠肠道后，BSH基因在其肠道细胞中稳定复制并表达

 【第 12324 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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CRISPR/Cas9是一种由RNA指导的，利用Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术。CRISPR本质是基因组DNA上的一段特殊序列，它广泛存在于原核生物基因组中，是细菌和古细菌为应对病毒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制，而Cas9则是CRISPR相关核酸酶。该技术原理是一条单链向导RNA引导核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。具体过程是通过设计“向导”RNA中20个碱基的识别序列，实现对目标DNA上某个特定位置的切割或特定DNA片段的添加，如下图所示。下列相关叙述正确的是
 
A. Cas9相当于基因工程中的限制酶，具有识别特定脱氧核苷酸序列并使每一条链中特定部位断开的功能
B. 若用Cas9切开后添加特定的DNA片段，需要DNA聚合酶和DNA连接酶
C. “向导”RNA可在解旋酶和RNA聚合酶的催化下合成
D. Cas9能通过专一性破坏双链DNA分子中的磷酸二酯键来切割DNA分子

 【第 12323 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法错误的是
 

 【第 12322 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序  
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某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，获得此质粒的农杆菌表现出对两种抗生素的抗性。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示。请据图分析，下列叙述错误的是
 
A. 在构建重组质粒时，选用HindⅢ和SalⅠ两种酶切割目的基因的两端及质粒可防止目的基因和质粒的自我环化
B. 用分别含有氨苄青霉素和四环素的培养基筛选农杆菌时，发现含有目的基因的农杆菌不能在含四环素的培养基上生长，说明抗四环素基因未起到标记基因的作用
C. 采用农杆菌转化法是因为农杆菌感染烟草细胞时，其内的重组Ti质粒上的T-DNA能将目的基因插入烟草细胞的染色体DNA上
D. 利用植物组织培养技术培育转基因抗盐烟草植株，依据的原理是高度分化的植物细胞具有发育成完整植株的能力

 【第 12206 题】 【题型】：单选题 【章节】：第3节 基因工程的应用  
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采用CRISPR/Cas9基因编辑技术可将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因定点插入到受精卵的Y染色体上，获得转基因雄性小鼠。该转基因小鼠与野生型雌性小鼠交配，通过观察荧光可确定早期胚胎的性别。下列操作错误的是
A．基因编辑处理的受精卵在体外培养时，不同发育阶段的胚胎需用不同成分的培养液
B．基因编辑处理的受精卵经体外培养至2细胞期，须将其植入同期发情小鼠的子官，才可获得表达EGFP的小鼠
C．分离能表达EGFP的胚胎干细胞，通过核移植等技术可获得大量的转基因小鼠
D．通过观察早期胚胎的荧光，能表达EGFP的即为雄性小鼠胚胎