【第 8278 题】 【题型】：简答题 【章节】：选修3 第3章 基因工程  
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绿色荧光蛋白GFP能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
 
（1）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—，在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点，在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来______________________，理由是：______________________ 。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是___________ 。
（3）获得转基因猪的关键步骤是 ___________（填序号），GFP基因的作用是作为___________ 。抑制小猪抗原表达的基因要插入到启动子和___________之间。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是可以避免___________。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： ___________（用数字表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸    ②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）  ④表达出蓝色荧光蛋白。