【第 12462 题】 【题型】：简答题 【章节】：
第2节 基因工程的基本操作程序
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【参考答案】(1) 细胞毒性T 免疫排斥 （碱基）互补配对
(2)从基因文库中获取、PCR技术扩增目的基因、化学方法直接人工合成
(3) 维持培养液的pH 敲除3KO 并插入7IG会对异体细胞有更强的保护作用
(4)供体猪器官携带猪内源性逆转录病毒(PERV)，PERV接触并侵染人类细胞，在人体细胞内逆转录形成DNA，整合到人类基因组中。
(5)动物体细胞核移植、动物细胞培养(或早期胚胎培养、胚胎移植)
动物器官移植到人体内（异种移植）或是解决全球器官紧缺的办法之一。研究团队对猪肾内皮细胞进行基因编辑、改造后，得到了3种工程细胞和可提供异种移植肾源的供体猪。具体流程及部分测量数据如图示。
(1)研究证实供体猪的3个聚糖抗原基因（3KO）会引致人类、猴等受体的组织不相容。若以未经改造的猪肾作为异体肾源进行器官移植，受体动物的______________________ 细胞和抗体都有可能对供体器官产生特异性攻击效应，导致出现______________________现象。利用CRISPR-Cas9编辑技术敲除肾内皮细胞的3KO,该技术需人工设计一种“向导”RNA，其部分序列与3KO遵循__________原则结合，并引导Cas9蛋白断裂DNA双链，从而敲除3KO。
(2)研究表明7个人类基因（7TG）可增加不同物种之间的兼容性。获取7TG的方法有______________________（答出一种即可）。
(3)为验证敲除3KO、插入7TG对异体细胞的保护作用，研究者将三组细胞与受体猴血清共孵育，置于CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是___________。测量裂解细胞数如图示。据此得出结论:
(4)供体猪器官常携带多种病毒,其中部分病毒潜在人畜传播风险。例如已有实验证明PERV（猪内源性逆转录病毒）可以整合到体外培养的人类细胞基因组中。试分析若给人进行异种移植，PERV的基因可能通过供体猪器官整合到人类基因组的途径_________________________________ 。因此，为确保安全，对已构建好的3KO.7TG.细胞需要进行灭活PERV处理，且在临床试行前须在动物模型中测试。
(5)从3KO.7TG.RI.细胞通过④过程构建供体猪所利用的现代生物学技术有________________（至少答出一种）
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