题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
1
荧光 PCR 法根据化学发光原理可以分为染料法和探针法。染料法中特殊染料本身不发光,但是当PCR 扩增的时候,染料能够与DNA双链结合从而发光,如图1所示。探针法中除了引物外另外设置了一个探针,在探针的两端分别带上发光基团和淬灭基团,此时发光基团并不发光,但是当DNA通过引物合成的时候,探针被酶切降解释放出发光基团和淬灭基团,两种基团分开后产生荧光,如图2所示。下列说法正确的是
A.两种方法均可用于目标 DNA 的定量分析
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荧光 PCR 法根据化学发光原理可以分为染料法和探针法。染料法中特殊染料本身不发光,但是当PCR 扩增的时候,染料能够与DNA双链结合从而发光,如图1所示。探针法中除了引物外另外设置了一个探针,在探针的两端分别带上发光基团和淬灭基团,此时发光基团并不发光,但是当DNA通过引物合成的时候,探针被酶切降解释放出发光基团和淬灭基团,两种基团分开后产生荧光,如图2所示。下列说法正确的是
A.两种方法均可用于目标 DNA 的定量分析
题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
2
热启动PCR可提高扩增效率，方法之一是：先将除𝑇𝑎𝑞DNA聚合酶以外的各成分混合后，加热到80℃以上再混入酶，然后直接从94℃开始PCR扩增，下列叙述正确的有
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热启动PCR可提高扩增效率，方法之一是：先将除𝑇𝑎𝑞DNA聚合酶以外的各成分混合后，加热到80℃以上再混入酶，然后直接从94℃开始PCR扩增，下列叙述正确的有
题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
3
用农杆菌侵染水稻（二倍体）细胞，获得1条染色体上R基因被插入T-DNA的个体T0。T-DNA插入基因的位置如图1所示。T0自交得T1，用P1、P2、P3为引物检测不同T1个体的基因组成情况，如图2所示。图1箭头方向为引物所在子链的延伸方向；R基因被T-DNA插入后，用P1、P2为引物无法完成PCR。下列叙述错误的是
A. 该实验中所用的引物P1、P2、P3为短双链核酸
B. R基因被T-DNA插入后导致基因被破坏，可能无法表达相应蛋白
C. 用P1、P2引物进行PCR得到产物的个体均为R基因纯合子
D. 若调查样本量足够大，W、H、M个体的比例约为1:2:1
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用农杆菌侵染水稻（二倍体）细胞，获得1条染色体上R基因被插入T-DNA的个体T0。T-DNA插入基因的位置如图1所示。T0自交得T1，用P1、P2、P3为引物检测不同T1个体的基因组成情况，如图2所示。图1箭头方向为引物所在子链的延伸方向；R基因被T-DNA插入后，用P1、P2为引物无法完成PCR。下列叙述错误的是
题型：多选题 1 [0] 第3节 基因工程的应用 【试题】
4
D基因中含两种限制酶BamHⅠ和Msp Ⅰ (5′C↓CGG3′)的酶切位点，Hpa Ⅱ和Msp Ⅰ酶切位点相同，酶切位点处的胞嘧啶可能被甲基化，Hpa Ⅱ对胞嘧啶甲基化敏感(即不能切割甲基化的酶切位点)，而Msp Ⅰ对胞嘧啶甲基化不敏感。某种基因型小鼠(Dd)有表型1和表型2两种表型，利用两种表型的小鼠D基因做了三组酶切实验：第一组单独使用BamHⅠ，第二组使用BamHⅠ＋Msp Ⅰ，第三组使用BamHⅠ＋Hpa Ⅱ；每组完全酶切产物(每一个酶切位点均被切割)通过电泳分离并使用探针得到杂交带，结果如图所示。下列叙述正确的是
A．该种小鼠(Dd)有两种表型可能与D基因甲基化程度不同影响了基因的表达有关
B．若经过第一组处理后均可得到8.9kb的基因片段(包含探针)，则说明经过第一组处理后的D基因的酶切位点均没有被甲基化
C．若控制表型1的D基因经过第二组和第三组处理后的酶切结果分别是3.5 kb和8.9 kb，则说明控制表型1的D基因中的4个Msp Ⅰ酶切位点均被甲基化
D．若控制表型2的D基因经过第三组处理后的酶切结果介于3.5kb和8.9kb之间，则说明D基因中最多有3个Hpa Ⅱ酶切位点被甲基化
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D基因中含两种限制酶BamHⅠ和Msp Ⅰ (5′C↓CGG3′)的酶切位点，Hpa Ⅱ和Msp Ⅰ酶切位点相同，酶切位点处的胞嘧啶可能被甲基化，Hpa Ⅱ对胞嘧啶甲基化敏感(即不能切割甲基化的酶切位点)，而Msp Ⅰ对胞嘧啶甲基化不敏感。某种基因型小鼠(Dd)有表型1和表型2两种表型，利用两种表型的小鼠D基因做了三组酶切实验：第一组单独使用BamHⅠ，第二组使用BamHⅠ＋Msp Ⅰ，第三组使用BamHⅠ＋Hpa Ⅱ；每组完全酶切产物(每一个酶切位点均被切割)通过电泳分离并使用探针得到杂交带，结果如图所示。下列叙述正确的是
题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
5
如图为DNaseI (一种消化DNA的内切核酸酶)足迹法示意图，该方法可鉴别RNA聚合酶等蛋白质在DNA上的结合位点，下列有关叙述正确的是
A．DNaseI作用于DNA的氢键和磷酸二酯键
B．加入的蛋白质可保护相应DNA序列不受DNaseI攻击
C．图中①处的空白区域是蛋白质与DNA结合后留下的“足迹”
D．该方法可找到与特异性DNA结合的目标蛋白且能确定目标蛋白结合的碱基
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如图为DNaseI (一种消化DNA的内切核酸酶)足迹法示意图，该方法可鉴别RNA聚合酶等蛋白质在DNA上的结合位点，下列有关叙述正确的是
题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
6
下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是
A．在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌
B．在含氨苄青霉素的培养基上，能生长的是导入了重组质粒的细菌
C．在含氨苄青霉素的培养基上能生长，但在含四环素的培育基不能生长的细菌是导入了重组质粒的细菌
D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
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下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是
题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
7
检测发现，转入大肠杆菌的蛋白M基因表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白 M 基因结合的两对引物（引物B和引物C中都替换了一个碱基），并按图示方式依次进行了4次PCR，以得到定点突变的新的蛋白M基因。这4次PCR应该选择的引物，正确的是
A.PCR1--引物A和引物B
B.PCR2--引物C和引物 D
C.PCR3--引物B和引物C
D.PCR4--引物A和引物 D
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检测发现，转入大肠杆菌的蛋白M基因表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白 M 基因结合的两对引物（引物B和引物C中都替换了一个碱基），并按图示方式依次进行了4次PCR，以得到定点突变的新的蛋白M基因。这4次PCR应该选择的引物，正确的是
A.PCR1--引物A和引物B
B.PCR2--引物C和引物 D
C.PCR3--引物B和引物C
D.PCR4--引物A和引物 D
题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
8
水蛭素是一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质。若用赖氨酸（密码子为AAA、AAG）替换水蛭素第47位的天冬酰胺（密码子为AAC、AAU）后可以提高它的抗凝血活性。某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水蛭素基因的第47位点引入特定突变后（原理见图），合成了大量抗凝血活性增强的水蛭素。下列相关叙述正确的是
A．若原基因拟突变位点的碱基对为A-T，则让其突变为T-A后即能达到目的
B．除图示物质外，过程②、③和⑤还需提供含Mg2+的缓冲液、热稳定性DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸
C．过程②和③可在同一反应容器内同时进行，过程⑤的引物可使用引物1和引物4
D．突变后的水蛭素基因需要与载体结合，并将其导入受体细胞内进行表达，才能获得相应的蛋白质产品
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水蛭素是一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质。若用赖氨酸（密码子为AAA、AAG）替换水蛭素第47位的天冬酰胺（密码子为AAC、AAU）后可以提高它的抗凝血活性。某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水蛭素基因的第47位点引入特定突变后（原理见图），合成了大量抗凝血活性增强的水蛭素。下列相关叙述正确的是
题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
9
亚洲棉的突变型光籽和野生型毛籽是-对相对性状，研究发现，亚洲棉某突变体的光籽表型与8号染色体的~880kb至~903kb区间相关，研究人员根据野生型毛籽棉的该区间设计连续的重叠引物进行PCR，产物扩增结果如图所示，下列说法正确的是
A．应提取该突变体和野生型亚洲棉的全部染色体DNA进行PCR
B．上图中PCR产物的鉴定是通过琼脂糖凝胶电泳来进行的
C．据图分析可知，分子量较大的扩增产物与点样处的距离较小
D．该突变体出现的根本原因是第6对引物对应区间发生了基因突变
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亚洲棉的突变型光籽和野生型毛籽是-对相对性状，研究发现，亚洲棉某突变体的光籽表型与8号染色体的~880kb至~903kb区间相关，研究人员根据野生型毛籽棉的该区间设计连续的重叠引物进行PCR，产物扩增结果如图所示，下列说法正确的是
题型：多选题 1 [0] 第2节 基因工程的基本操作.. 【试题】
10
蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DM片段结构示意图，其中14表示A上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述错误的是
A．若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏2个磷酸二酯键
B．若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置
C．若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化
D．在PCR扩增仪中根据选定的引物至少需经过7次循环才可获得32个两条链等长的目的基因片段
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蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DM片段结构示意图，其中14表示A上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述错误的是
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【第 12452 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序 
