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	题型：单选题难度值：1 [0] 知识点：第2节基因工程的基本操作..
【试题】 51	某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是 A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接 B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接 C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接 D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接【第 12016 题】【题型】：单选题【章节】：第2节基因工程的基本操作程序【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】C 某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是 A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接 B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接 C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接 D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接

	题型：单选题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 52	以菜花为材料提取DNA时，需将材料进行研磨，研磨液的成分常含有SDS(蛋白质变性剂)、EDTA(DNA酶抑制剂，稳定DNA活性)、Tris(缓冲剂)。下列有关叙述错误的是 A．若选择鸡血细胞为材料，则省去了研磨过程 B．SDS可以使蛋白质变性，便于DNA与蛋白质分离 C．EDTA可以防止DNA水解成核糖核苷酸 D．Tris可以调节溶液中的pH 【第 12015 题】【题型】：单选题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】C 以菜花为材料提取DNA时，需将材料进行研磨，研磨液的成分常含有SDS(蛋白质变性剂)、EDTA(DNA酶抑制剂，稳定DNA活性)、Tris(缓冲剂)。下列有关叙述错误的是 A．若选择鸡血细胞为材料，则省去了研磨过程 B．SDS可以使蛋白质变性，便于DNA与蛋白质分离 C．EDTA可以防止DNA水解成核糖核苷酸 D．Tris可以调节溶液中的pH

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 53	铝在土壤中常以铝酸盐的形式存在，可造成土壤酸化而影响植物生长。铝能抑制植物根尖细胞的分裂，抑制根生长，破坏根组织。部分植物能通过根部细胞膜上的苹果酸通道蛋白（ALMT）将苹果酸转运到细胞外来缓解铝毒。可将 ALMT 基因导入植物细胞，来培育转基因耐铝植物，请回答下列问题：（1）可以从基因文库中获得 ALMT 基因，在合成 cDNA 的过程中，反应体系内加入的物质除 mRNA 和 ATP 外，还包括__________________、____________________________________。（2）可将 ALMT 基因插入农杆菌 Ti 质粒的__________________片段中，以便目的基因进入植物细胞。利用该方法导入的目的基因的遗传一般遵循孟德尔遗传定律，原因是____________________________________。（3）启动子是__________________特异性识别并结合的位点，能调控目的基因的表达。ALMT基因的启动子有两种类型，其中 α 启动子能使 ALMT 基因在酸性土壤的诱导下表达，β 启动子能使 ALMT 基因高效表达而无需酸性诱导。则在获得转 ALMT 基因耐铝植物时应使用___________启动子，不使用另外一种启动子的原因是______________________。【第 11367 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）四种脱氧核苷酸逆转录酶（2）T-DNA T-DNA 可携带目的基因，整合并转移到宿主细胞染色体的 DNA 上（3）RNA 聚合酶 α β 启动子可使植物根细胞持续转运苹果酸，导致正常土壤酸化，并影响植物自身的生长（3 分）铝在土壤中常以铝酸盐的形式存在，可造成土壤酸化而影响植物生长。铝能抑制植物根尖细胞的分裂，抑制根生长，破坏根组织。部分植物能通过根部细胞膜上的苹果酸通道蛋白（ALMT）将苹果酸转运到细胞外来缓解铝毒。可将 ALMT 基因导入植物细胞，来培育转基因耐铝植物，请回答下列问题：（1）可以从基因文库中获得 ALMT 基因，在合成 cDNA 的过程中，反应体系内加入的物质除 mRNA 和 ATP 外，还包括__________________、____________________________________。（2）可将 ALMT 基因插入农杆菌 Ti 质粒的__________________片段中，以便目的基因进入植物细胞。利用该方法导入的目的基因的遗传一般遵循孟德尔遗传定律，原因是____________________________________。（3）启动子是__________________特异性识别并结合的位点，能调控目的基因的表达。ALMT基因的启动子有两种类型，其中 α 启动子能使 ALMT 基因在酸性土壤的诱导下表达，β 启动子能使 ALMT 基因高效表达而无需酸性诱导。则在获得转 ALMT 基因耐铝植物时应使用___________启动子，不使用另外一种启动子的原因是______________________。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 54	转基因抗病香蕉的培育过程如图甲所示，图乙表示PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：（1）质粒的化学本质是______________________________ 。（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即______________________________；将目的基因导入受体细胞的方法是_____________________________________________ （3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是_______________，图中一令质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为_______________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：_____________________________________________。（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异? _______________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有______________________________基因作为标记基因。【第 11320 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)DNA（1分) (2)基因表达载体的构建农杆菌转化法 (3) PstⅠ和EcoRⅠ 3个和4 如图： (4)否抗卡那霉素转基因抗病香蕉的培育过程如图甲所示，图乙表示PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：（1）质粒的化学本质是______________________________ 。（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即______________________________；将目的基因导入受体细胞的方法是_____________________________________________ （3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是_______________，图中一令质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为_______________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：_____________________________________________。（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异? _______________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有______________________________基因作为标记基因。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 55	在HIV侵染免疫细胞的过程中，细胞表面的CCR5蛋白是病毒的一个识别位点，协助介导了H进入细胞的过程。自然情况下，CCR5基因可缺失32个碱基对，成为它的等位基因(称为CCR5△32基因)，如果一个人是CCR5△32基因的纯合子，那么他的免疫细胞表面没有完整的CCR5蛋白可用，就不易被HIV感染。2018年底，贺建奎团队声称通过 CRISPR/Cas9技术对数个胚胎进行了基因编辑，被编辑的婴儿的所有细胞不能合成完整的CCR5蛋白，从而天生免疫艾滋病。请回答：（1）CCR5基因的表达需要___________等不可缺少的调控组件，CCR5△32基因指导合成的肽链氨基酸数目减少，原因可能是mRNA______________________。（2）如图所示，CRISPR/Cas9是一种新型的基因组定点编辑系统，根据CCR5基因的序列设计sgRNA（向导RNA)，该sgRNA的序列与CCR5基因部分序列互补配对诱导Cas9n蛋白结合于基因的特异性位点并切割，使CCR5基因发生碱基对的___________，导致基因突变。该过程中，sgRNA和Cas9n对DNA的共同作用类似___________酶的作用。（3）为验证胚胎的CCR5基因是否成功被编辑，需要在胚胎发育早期，将细胞的微量全基因组DNA用___________技术进行扩增，然后采用___________技术检测目的基因以及转录出的mRNA是否存在，还需要对___________蛋白进行检测。（4）贺建奎团队的行为遭到了科学界的强烈谴责，因为_____________________________(写出两点)。【第 11307 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）启动子、终止子变短（终止密码提前出现）（2）缺失（1分）限制（1分）（3） PCR 分子杂交 CCR5 （4）无法证实被编辑个体是否能免疫H1V；可能被编辑个体受其他疾病感染的风险提高；可能被编辑个体的其他基因被破坏在HIV侵染免疫细胞的过程中，细胞表面的CCR5蛋白是病毒的一个识别位点，协助介导了H进入细胞的过程。自然情况下，CCR5基因可缺失32个碱基对，成为它的等位基因(称为CCR5△32基因)，如果一个人是CCR5△32基因的纯合子，那么他的免疫细胞表面没有完整的CCR5蛋白可用，就不易被HIV感染。2018年底，贺建奎团队声称通过 CRISPR/Cas9技术对数个胚胎进行了基因编辑，被编辑的婴儿的所有细胞不能合成完整的CCR5蛋白，从而天生免疫艾滋病。请回答：（1）CCR5基因的表达需要___________等不可缺少的调控组件，CCR5△32基因指导合成的肽链氨基酸数目减少，原因可能是mRNA______________________。（2）如图所示，CRISPR/Cas9是一种新型的基因组定点编辑系统，根据CCR5基因的序列设计sgRNA（向导RNA)，该sgRNA的序列与CCR5基因部分序列互补配对诱导Cas9n蛋白结合于基因的特异性位点并切割，使CCR5基因发生碱基对的___________，导致基因突变。该过程中，sgRNA和Cas9n对DNA的共同作用类似___________酶的作用。（3）为验证胚胎的CCR5基因是否成功被编辑，需要在胚胎发育早期，将细胞的微量全基因组DNA用___________技术进行扩增，然后采用___________技术检测目的基因以及转录出的mRNA是否存在，还需要对___________蛋白进行检测。（4）贺建奎团队的行为遭到了科学界的强烈谴责，因为_____________________________(写出两点)。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 56	科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因，利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中，进而培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题：（1）据图分析可知，在构建的耐盐基因表达载体中，图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子、____________________，其中启动子的功能是________________________________________。（2）据图分析可知，在构建耐盐基因表达载体时，需要用____________________对质粒进行切割，从而保证____________________________________________________________。（3）常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞，根据农杆菌的感染特点，将耐盐基因插入Ti质粒的_________________________上，经过转化作用进入水稻细胞，并将其插入_______________________上，从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。（4）检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是____________________。【第 11249 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】 (1)标记基因和终止子(2分)【说明：答全给2分】作为RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动目的基因转录(2分)【说明：答对l点给1分】 (2)HindⅢ、XbaⅠ(2分)【说明：答全给2分】耐盐基因与质粒正确连接(2分) (3)T-DNA【补充：可转移DNA】(2分) 水稻细胞染色体的DNA(2分) (4)将其种植在盐碱地上【补充：用一定浓度的盐水浇灌】(3分) 科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因，利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中，进而培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题：（1）据图分析可知，在构建的耐盐基因表达载体中，图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子、____________________，其中启动子的功能是________________________________________。（2）据图分析可知，在构建耐盐基因表达载体时，需要用____________________对质粒进行切割，从而保证____________________________________________________________。（3）常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞，根据农杆菌的感染特点，将耐盐基因插入Ti质粒的_________________________上，经过转化作用进入水稻细胞，并将其插入_______________________上，从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。（4）检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是____________________。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 57	乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的影响奶牛养殖业的两种疾病。科学家利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)的双转基因奶牛新品种。下图为基因表达载体，回答下列问题： (1)乳铁蛋白肽基因和质粒连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是______________________________ 。乳铁蛋白肽基因只在转基因奶牛的乳腺细胞表达，人干扰素基因除了可在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，还可在转基因奶牛的其他组织细胞中表达，这与构建表达载体时______________________________ 的选择有关。 (2)牛胎儿成纤维细胞可作为受体细胞，将乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因导人牛胎儿成纤维细胞后，将该细胞注入______________________________细胞，通过电刺激使______________________________，构建重组胚胎。 (3)重组胚胎经过胚胎的早期培养后，移人代孕母牛体内，生出转基因犊牛。重组胚胎早期培养过程中，培养液的成分除一些有机盐和无机盐外，还需要添加_________________________________________ (答出四点)，以及血清等物质。当胚胎发育到_______________，可移植到代孕母牛体内。 (4)若获得的转基因奶牛(人干扰素基因已经整合到奶牛的基因组中)仍感染口蹄疫，根据中心法则分析，可能的原因是_____________________________________________ 。【第 11175 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】 (1)磷酸二酯键启动子 (2)去核卵母供体细胞核和去核卵母细胞融合 (3)维生素、激索、氨基酸、核苷酸等桑椹胚或囊胚 (4)人干扰素基因的转录或翻译异常(3分) 乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的影响奶牛养殖业的两种疾病。科学家利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)的双转基因奶牛新品种。下图为基因表达载体，回答下列问题： (1)乳铁蛋白肽基因和质粒连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是______________________________ 。乳铁蛋白肽基因只在转基因奶牛的乳腺细胞表达，人干扰素基因除了可在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，还可在转基因奶牛的其他组织细胞中表达，这与构建表达载体时______________________________ 的选择有关。 (2)牛胎儿成纤维细胞可作为受体细胞，将乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因导人牛胎儿成纤维细胞后，将该细胞注入______________________________细胞，通过电刺激使______________________________，构建重组胚胎。 (3)重组胚胎经过胚胎的早期培养后，移人代孕母牛体内，生出转基因犊牛。重组胚胎早期培养过程中，培养液的成分除一些有机盐和无机盐外，还需要添加_________________________________________ (答出四点)，以及血清等物质。当胚胎发育到_______________，可移植到代孕母牛体内。 (4)若获得的转基因奶牛(人干扰素基因已经整合到奶牛的基因组中)仍感染口蹄疫，根据中心法则分析，可能的原因是_____________________________________________ 。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 58	为使玉米获得抗除草剂性状，需进行如图所示操作。报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。（1）从基因文库中获得的除草剂抗性基因G可用__________技术进行扩增；构建含有除草剂抗性基因G（目的基因）的基因表达载体时，需要的工具酶有_______________。为使除草剂抗性基因G在农杆菌中高效表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的____________之间（2）图中筛选1时需要在培养基中加入________以筛选成功导入表达载体的农杆菌；图中筛选2时需要___________________以筛选出呈现蓝色的组织。（3）将幼胚诱导培育成愈伤组织的过程中，需要在培养基中加入________以调控发育方向。为从个体水平上检测图中A玉米植株是否具有抗除草剂性状，可采用的方法是________________。【第 10779 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）PCR 限制酶和 DNA 连接酶启动子和终止子（2）氨苄青霉素用无色物质 K 处理愈伤组织（3 分）（3）植物激素用相应除草剂喷洒待测玉米植株为使玉米获得抗除草剂性状，需进行如图所示操作。报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。（1）从基因文库中获得的除草剂抗性基因G可用__________技术进行扩增；构建含有除草剂抗性基因G（目的基因）的基因表达载体时，需要的工具酶有_______________。为使除草剂抗性基因G在农杆菌中高效表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的____________之间（2）图中筛选1时需要在培养基中加入________以筛选成功导入表达载体的农杆菌；图中筛选2时需要___________________以筛选出呈现蓝色的组织。（3）将幼胚诱导培育成愈伤组织的过程中，需要在培养基中加入________以调控发育方向。为从个体水平上检测图中A玉米植株是否具有抗除草剂性状，可采用的方法是________________。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 59	例3口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防，疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因细菌来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示。请据图回答。 (1)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，①过程用____________的方法合成DNA，再用限制酶将VP1基因片段切下。 (2)②过程一般使用同一种限制酶切割目的基因和质粒，再用____________将两者连接成重组质粒，若只考虑两个DNA相连，②过程会得到________种连接产物。故③过程之后需要进一步筛选。 (3)③过程之后，应先将细菌分别培养在含______________的培养基中，未形成菌落的即为______________的细菌，然后从长出菌落的培养基中分别挑取少量菌种接种到多个含____________的培养基中，培养基________(填“有”或“无”)菌落产生即为导入了重组质粒的目的菌。 (4)导入重组质粒的目的菌是否成功表达，还需用____________法进行检测。【第 10377 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)反转录　(2)DNA连接酶　3　(3)四环素　未导入质粒　氨苄青霉素　无　(4)抗原抗体杂交例3口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防，疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因细菌来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示。请据图回答。 (1)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，①过程用____________的方法合成DNA，再用限制酶将VP1基因片段切下。 (2)②过程一般使用同一种限制酶切割目的基因和质粒，再用____________将两者连接成重组质粒，若只考虑两个DNA相连，②过程会得到________种连接产物。故③过程之后需要进一步筛选。 (3)③过程之后，应先将细菌分别培养在含______________的培养基中，未形成菌落的即为______________的细菌，然后从长出菌落的培养基中分别挑取少量菌种接种到多个含____________的培养基中，培养基________(填“有”或“无”)菌落产生即为导入了重组质粒的目的菌。 (4)导入重组质粒的目的菌是否成功表达，还需用____________法进行检测。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 60	番茄果实中含丰富的番茄红素，对人体防治肿瘤、心血管疾病以及延缓衰老具有一定作用。 (1)科学家为构建高产番茄红素的酵母细胞应用了转基因技术，其核心步骤是______________________________。如下图所示其部分模式图，位点1、2、3、4对应的限制酶分别是PacⅠ、SexAⅠ、AscⅠ、 PmeⅠ，则获取目的基因使用的限制酶是____________________；PacⅠ能否切割位点2？__________________；原因是_________________。 (2)为确定目的基因已导入番茄细胞中，常用__________________技术进行检测，最后再进行个体水平的鉴定。 (3)科学家运用__________________技术培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株，但并没有获得预期的性状，主要原因是__________________。 (4)转基因技术和植物体细胞杂交技术在育种上具有的共同意义是__________________________。【第 10376 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)构建基因表达载体(目的基因与运载体结合)　 SexA Ⅰ和Asc Ⅰ　不能　因为限制酶具有特异性(合理即可) (2)DNA分子杂交 (3)植物体细胞杂交　基因的表达不是孤立的，是相互调控、相互影响的(合理即可) (4)能克服物种间远缘杂交不亲和的障碍(合理即可) 番茄果实中含丰富的番茄红素，对人体防治肿瘤、心血管疾病以及延缓衰老具有一定作用。 (1)科学家为构建高产番茄红素的酵母细胞应用了转基因技术，其核心步骤是______________________________。如下图所示其部分模式图，位点1、2、3、4对应的限制酶分别是PacⅠ、SexAⅠ、AscⅠ、 PmeⅠ，则获取目的基因使用的限制酶是____________________；PacⅠ能否切割位点2？__________________；原因是_________________。 (2)为确定目的基因已导入番茄细胞中，常用__________________技术进行检测，最后再进行个体水平的鉴定。 (3)科学家运用__________________技术培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株，但并没有获得预期的性状，主要原因是__________________。 (4)转基因技术和植物体细胞杂交技术在育种上具有的共同意义是__________________________。

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