第2节 基因工程的基本操作程序
返回【单选题】CRISPR/Cas9 是一种高效的基因编辑技术,𝐶𝑎𝑠9基因表达的Cas9 蛋白像一把“分子剪刀”,在单链向导RNA(SgRNA) 引导下,切割DNA 双链以敲除目标基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9 基因编辑技术的工作原理如右图所示。据图分析,下列叙述正确的是
A.构建CRISPR/Cas9重组质粒,需要用到的工具酶有限制酶、DNA 连接酶和质粒
B.将重组质粒导入大肠杆菌细胞的方法是农杆菌转化法
C.SgRNA与Cas9蛋白形成复合体,该复合体的Cas9蛋白可识别并与目标DNA 序列特异性结合
D.利用基因编辑技术进行特定基因敲除,可以通过DNA 分子杂交技术进行检测
A.构建CRISPR/Cas9重组质粒,需要用到的工具酶有限制酶、DNA 连接酶和质粒
B.将重组质粒导入大肠杆菌细胞的方法是农杆菌转化法
C.SgRNA与Cas9蛋白形成复合体,该复合体的Cas9蛋白可识别并与目标DNA 序列特异性结合
D.利用基因编辑技术进行特定基因敲除,可以通过DNA 分子杂交技术进行检测
【单选题】临床上可采用PCR和DNA反向点杂交相结合的检测技术对HPV基因进行分型,过程如下:设计出针对已知有致癌风险的23种HPV基因的特异性引物并标记上会发生显色反应的生物素,通过 PCR对待测样本 DNA进行扩增,再将扩增产物直接与固定在膜上的分型基因探针(包括17种高危型和6种低危型)进行杂交。经显色处理后,与固定化探针结合的HPV基因就会在相应位置产生显色反应,从而判断待测样本是否被含有这些HPV基因的病毒感染。有关说法错误的是
A.生物素应标记在引物的5'端
B.该检测技术需要对扩增的DNA样本进行琼脂糖凝胶电泳
C.该检测技术具有高度的特异性,能够准确地区分不同类型的HPV病毒
D.反向点杂交是通过分型基因探针与扩增的目的片段碱基互补配对结合在起的
A.生物素应标记在引物的5'端
B.该检测技术需要对扩增的DNA样本进行琼脂糖凝胶电泳
C.该检测技术具有高度的特异性,能够准确地区分不同类型的HPV病毒
D.反向点杂交是通过分型基因探针与扩增的目的片段碱基互补配对结合在起的
【单选题】“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段,若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”,需在PCR反应中加入两种引物,两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。下列叙述错误的是
A.第一轮复制得到2个DNA分子,即①②各一个
B.第二轮复制得到4个DNA分子,即①②③④各一个
C.第四轮复制得到16个DNA分子,其中有4个X基因
D.经五轮循环后产物中有五种不同的DNA分子
A.第一轮复制得到2个DNA分子,即①②各一个
B.第二轮复制得到4个DNA分子,即①②③④各一个
C.第四轮复制得到16个DNA分子,其中有4个X基因
D.经五轮循环后产物中有五种不同的DNA分子
【单选题】重叠延伸PCR可实现定点基因诱变,其操作过程如图所示(凸起处代表突变位点)。下列说法正确的是
A.过程①需要把两对引物同时加入一个扩增体系以提高扩增效率
B.过程①需要2轮PCR才能得到图中所示PCR产物
C.过程②的产物都可以完成延伸过程
D.若过程④得到16个突变基因则需要消耗15个通用引物RP2
A.过程①需要把两对引物同时加入一个扩增体系以提高扩增效率
B.过程①需要2轮PCR才能得到图中所示PCR产物
C.过程②的产物都可以完成延伸过程
D.若过程④得到16个突变基因则需要消耗15个通用引物RP2
【单选题】荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量,用于病毒检测。其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时,加入与某条模板链互补的荧光探针。当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针,使荧光监测系统接收到荧光信号,即每扩增一次,就有一个荧光分子生成(如图)。通过实时检测荧光信号强度,可得Ct值(荧光信号达到设定阈值时所经历的循环次数)。下列相关叙述错误的是
A.PCR每个循环包括变性、复性(引物和模板结合)、延伸3个阶段
B.耐高温的DNA聚合酶在该反应中的作用是形成磷酸二酯键
C.最终监测的荧光强度与起始时反应管内样本DNA的含量呈正相关
D.Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多,患者危险性更高
A.PCR每个循环包括变性、复性(引物和模板结合)、延伸3个阶段
B.耐高温的DNA聚合酶在该反应中的作用是形成磷酸二酯键
C.最终监测的荧光强度与起始时反应管内样本DNA的含量呈正相关
D.Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多,患者危险性更高