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  • 所属章节:第2节 微生物的培养技术与应用

  • 【简答题】同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题:

    KH2PO4

    1.4 g

    Na2HPO4

    2.1 g

    MgSO4·7H2O

    0.2 g

    葡萄糖

    1 g

    尿素

    10 g

    琼脂

    15 g

    将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

    (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入____指示剂,细菌合成的____将尿素分解为____,pH升高,使指示剂变为红色。
    (2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌, 这种培养基属于____培养基。
    (3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的____和____,实验中需要振荡培养,原因是______________。
    (4)右图是利用____法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

    (5)关于右图的操作方法和结果,叙述正确的是____。

    YAWEN OFFICE

    A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
    B.划线操作须在火焰上进行
    C.在5区域中才可以提到所需菌落
    D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

    【答案】:(1)酚红 脲酶 氨 

    (2)选择 

    (3)尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气

    (4)平板划线 

    (5)D


    【解析】:(1)目的菌之所以能利用尿素,是因为体内的脲酶能将尿素分解成氨,氨可以作为细菌的氮源,同时会使培养基的pH升高,升高的pH会使酚红指示剂变为红色,因此可以通过检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解。
    (2)按功能不同,培养基可分成两类,鉴别培养基和选择培养基,培养基中不加其它氮素,只把尿素作为唯一氮源,其目的是想从众多微生物中选出能分解尿素的目的菌。
    (3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别有含氮元素的尿素和含碳元素的葡萄糖提供。生活在土壤中的目的菌是好氧微生物,试验中要振荡培养,以便为目的菌提供充足的氧气。
    (4)为进一步分离和纯化目的菌,尚需进行涂布平板(划线)的方法转入固体培养基,以便于获得单个菌落继续培养。
    (5)在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌主要是稀释作用。