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  • 所属章节:第2节 基因工程的基本操作程序

  • 【简答题】编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。
    YAWEN OFFICE 
    回答下列问题:
    (1)先要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是_____________________.
    (2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为_____________,加入了________作为合成DNA的原料。
    (3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。
    ①由图2 可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是__________。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是__________。
    ②仅根据图1、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少__________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。

    【答案】:(1)编码乙的DNA序列起始端无ATG,转录出的mRNA无起始密码子
    (2)模板     dNTP
    (3)①进行细胞传代培养    维持培养液是的pH     ② C