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  • 所属章节:第1节 降低化学反应活化能的酶

  • 【简答题】萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70 ℃条件下15 min后失活。
    实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。
    主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等。
    实验步骤:
    步骤一:制作麦芽糖梯度液。取7支干净的具塞刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60 ℃水浴中加热2 min,取出后按试管号顺序排列。

    试剂

    试管号

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    7

    麦芽糖标准液(mL)

    0

    0.2

    0.6

    1.0

    1.4

    1.6

    2.0

    蒸馏水(mL)

    2.0

    1.8

    1.4

    1.0

    X

    Y

    Z

    斐林试剂(mL)

    2.0

    2.0

    2.0

    2.0

    2.0

    2.0

    2.0

    步骤二:利用萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液。
    步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70 ℃水浴中15 min,取出后迅速冷却。
    步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5 mL 5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2 mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40 ℃恒温水浴中保温10 min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40 ℃恒温水浴中保温10 min。
    步骤五:取A、B试管中反应溶液各2 mL分别加入E、F试管,然后向E、F试管分别加入________,________,观察颜色变化。
    结果分析:将E试管中颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率。
    请分析回答:
    (1)本实验的目的是测定_____________________________。
    (2)步骤一的5~7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是________(单位mL)。
    (3)实验中B试管所起的具体作用是__________________。
    (4)请补全步骤五的做法:________,__________________。
    (5)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤____进行改变。

    【答案】:(1)小麦种子中α¬淀粉酶催化效率
    (2)0.6、0.4、0
    (3)检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖
    (4)2 mL斐林试剂 60 ℃水浴加热2 min
    (5)三