【多选题】

荧光 PCR 法根据化学发光原理可以分为染料法和探针法。染料法中特殊染料本身不发光,但是当PCR 扩增的时候,染料能够与DNA双链结合从而发光,如图1所示。探针法中除了引物外另外设置了一个探针,在探针的两端分别带上发光基团和淬灭基团,此时发光基团并不发光,但是当DNA通过引物合成的时候,探针被酶切降解释放出发光基团和淬灭基团,两种基团分开后产生荧光,如图2所示。下列说法正确的是

A.两种方法均可用于目标 DNA 的定量分析
B.与染料法相比,探针法的特异性更强
C.通过适当延长引物长度和降低复性温度可提高荧光PCR的特异性
D.用荧光 PCR 法检测人体是否感染新冠病毒前需要先进行逆转录

【答案】：A, B, D

【解析】：染料法中“染料能够与 DNA 双链结合从而发光”,探针法中“两种基团分开后产生荧光”,荧光强度和DNA含量成正相关,A正确;染料法中,染料不与单链 DNA 链结合,只要掺入 DNA 双链中就可以发光。探针法中,只有探针结合的片段上发生扩增才能发光,探针法的特异性更强,B正确:适当延长引物长度,和引物互补配对的特定 DNA 序列更长,能提高荧光 POR的特异性:降低复性温度,则引物和 DNA序列更容易结合,可能发生错误配对,降低荧光 PCR的特异性,C错误;新冠病毒的遗传物质是 RNA,染料法和探针法都是检测 DNA,检测人体是否感染新冠病毒前需要先进行逆转录,以病毒 RNA 为模板来合成 DNA,D正确。