【单选题】胆汁盐水解酶(BSH)对治疗小鼠糖尿病有明显的效果。天然大肠杆菌对外来DNA的入侵具有一定的抵抗力。科研人员从实验小鼠的粪便样本中提取出一种遗传上易驯化（对DNA入侵抵抗力弱）的大肠杆菌菌株M，构建BSH基因的表达载体（如下图）并导入菌株M体内，再将菌株M重新导入小鼠肠道。一段时间后，在小鼠的肠道中出现了能持续分泌BSH的大肠杆菌，小鼠糖尿病症状得到缓解。下列叙述错误的是
 
A. 天然大肠杆菌对外来DNA的入侵具有一定抵抗力，可能与细胞内的限制酶有关
B. 构建基因表达载体时，应该选用限制酶B和限制酶C切割质粒和目的基因
C. 转化前常用Ca²⁺处理大肠杆菌，使其处于能吸收外源DNA分子的状态
D. 将转基因菌株M导入小鼠肠道后，BSH基因在其肠道细胞中稳定复制并表达

【答案】：D

【解析】：根据题意“天然大肠杆菌对外来DNA 的入侵具有一定的抵抗力”，推测可能是天然大肠杆菌的细胞内有能将外来DNA 切割的限制酶，A正确；由题图可知，使用酶A 会将氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因这两个标记基因破坏，且酶B 和酶C 在目的基因和质粒上都有识别位点，故构建基因表达载体时，应该选用限制酶B 和限制酶C 切割质粒和目的基因，B正确；转化前常用Ca²⁺ 处理大肠杆菌，目的是使其处于能吸收外源DNA 分子的状态，以利于将重组质粒导入受体细胞中，C正确；根据题意可知，转基因菌株M 导入小鼠肠道后，小鼠的肠道中出现了能持续分泌BSH 的大肠杆菌，说明BSH 基因在大肠杆菌中稳定复制并表达，D错误。