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所属章节:第2节 基因工程的基本操作程序
【单选题】CRISPR/Cas9是一种由RNA指导的,利用Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术。CRISPR本质是基因组DNA上的一段特殊序列,它广泛存在于原核生物基因组中,是细菌和古细菌为应对病毒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制,而Cas9则是CRISPR相关核酸酶。该技术原理是一条单链向导RNA引导核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。具体过程是通过设计“向导”RNA中20个碱基的识别序列,实现对目标DNA上某个特定位置的切割或特定DNA片段的添加,如下图所示。下列相关叙述正确的是
A. Cas9相当于基因工程中的限制酶,具有识别特定脱氧核苷酸序列并使每一条链中特定部位断开的功能
B. 若用Cas9切开后添加特定的DNA片段,需要DNA聚合酶和DNA连接酶
C. “向导”RNA可在解旋酶和RNA聚合酶的催化下合成
D. Cas9能通过专一性破坏双链DNA分子中的磷酸二酯键来切割DNA分子
【答案】:D
【解析】:Cas9 相当于基因工程中的限制酶,但不具有识别特定脱氧核苷酸序列的功能,起识别定位作用的是“向导”RNA序列,A错误;若用Cas9 切开后添加特定的DNA 片段,需要DNA 连接酶,但不需要DNA 聚合酶,B错误;“向导”RNA的合成不需要解旋酶,只需要RNA 聚合酶,C错误;Cas9能通过专一性破坏双链DNA 分子中的磷酸二酯键来切割DNA 分子,D正确。