【单选题】限制酶BamHI和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHI切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒，下列相关叙述错误的是
A.酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素

B.目的基因经限制酶BamHI切割后形成的黏性末端是-CTAG-

C.分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒

【答案】：B

【解析】：【详解】限制酶破坏的是磷酸二酯键，A错误;目的基因经 BamHI切割后形成的黏性末端是 GATC-，B错误;两种限制酶切割产生的黏性末端相同，仍然会出现自身环化，不能保证目的基因定向插入质粒，C错误。两种限制酶切割产生的黏性末端均为 GATC，经过 DNA 连接酶处理后获得的序列是:-AGATCC-和-TCTAGG-，不能被 BamHI和 BgII识别，D 正确，故选B。