【简答题】为使玉米获得抗除草剂性状，需进行如图所示操作。报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。

（1）从基因文库中获得的除草剂抗性基因G可用______技术进行扩增；构建含有除草剂抗性基因G（目的基因）的基因表达载体时，需要的工具酶有___________。为使除草剂抗性基因G在农杆菌中高效表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的________之间
（2）图中筛选1时需要在培养基中加入____以筛选成功导入表达载体的农杆菌；图中筛选2时需要___________以筛选出呈现蓝色的组织。
（3）将幼胚诱导培育成愈伤组织的过程中，需要在培养基中加入____以调控发育方向。为从个体水平上检测图中A玉米植株是否具有抗除草剂性状，可采用的方法是________。

 

 

【答案】：（1）PCR 限制酶和 DNA 连接酶 启动子和终止子
（2）氨苄青霉素 用无色物质 K 处理愈伤组织（3 分）
（3）植物激素 用相应除草剂喷洒待测玉米植株

【解析】：（1）从基因文库中获得的除草剂抗性基因 G 可用 PCR 技术进行扩增；构建含有除草剂抗性基因 G（目的基因）的基因表达载体时，需要的工具酶有 DNA 连接酶和限制酶。为使除草剂抗性基因G 在农杆菌中高效表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的启动子和终止子之间，其中启动子的功能是启动目的基因的转录过程，终止子的功能是终止目的基因的转录过程。（2）由图示可知，质粒上含有氨苄青霉素抗性基因，可作为标记基因，因此图中筛选 1 时需要在培养基中加入氨苄青霉素以筛选成功导入表达载体的农杆菌；由题意可知报告基因的产物能催化无色物质 K 呈现蓝色，因此图中筛选 2 时需要用无色物质 K 处理愈伤组织，以筛选报告基因成功表达的呈蓝色的组织。（3）将幼胚诱导培育成愈伤组织的过程中，需要在培养基中加入植物激素（生长素和细胞分裂素）调控发育方向；为从个体水平上检测图中 A 玉米植株是否具有抗除草剂性状，可采用的方法是用相应除草剂喷洒待测玉米植株。