第2节 动物细胞工程
返回【简答题】下图表示通过现代生物技术制备单克隆抗体的两种途径,其中①~⑥表示相关过程。请分析并回答下列问题:
(1)细胞A的名称是__________________________。与通过传统方法获得的抗体相比,通过上述两种途径得到的单克隆抗体具有的显著优点是__________________________。
(2)通过过程④_____________________可获得Vl基因。用_____________________技术可以获得更多的Vl基因。
(3)抗体l与抗体2的氨基酸排列顺序相同,两者的生物活性——(填“相同”或“不相同”),原因是
___________________________________。
(4)除通过上述途径获得的单克隆抗体外,请再写出一种目前应用动物细胞工程技术生产的生物制品:
_____________________________________。
(2)通过过程④_____________________可获得Vl基因。用_____________________技术可以获得更多的Vl基因。
(3)抗体l与抗体2的氨基酸排列顺序相同,两者的生物活性——(填“相同”或“不相同”),原因是
___________________________________。
(4)除通过上述途径获得的单克隆抗体外,请再写出一种目前应用动物细胞工程技术生产的生物制品:
_____________________________________。
【简答题】第一代单克隆抗体是在体外诱导小鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的淋巴细胞融合,然后经过两次筛选,再经培养而获得的。而用转基因技术生产的人源单克隆抗体是从鼠源抗体生成基因被相应人基因所取代的转基因小鼠开始的。获得此类转基因小鼠的步骤如下:回答下列相关问题:
(1)第一代单克隆抗体技术操作过程中两次筛选,筛选出_______________细胞。
(2)基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤,完整的基因表达载体除必须包含目的基因外,还要有启动子、终止子、标记基因等。位于目的基因首段的是__________,其作用是驱动_____________。
(3)重组载体导人干细胞常用的方法是________________。检验重组载体是否整合到小鼠于细胞基因组的常用方法是用________________________________检测胚胎干细胞基因组,导入到胚胎干细胞的基因能否成功表达,还要进行________________两方面的检测。
(4)导入了重组载体的胚胎干细胞需要移植到代孕母鼠才能发育成转基因小鼠,对代孕母鼠的基本要求是____________________ ,为保证代孕母鼠对移植胚胎不排斥,移植前要对代孕母鼠进行处理。
(2)基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤,完整的基因表达载体除必须包含目的基因外,还要有启动子、终止子、标记基因等。位于目的基因首段的是__________,其作用是驱动_____________。
(3)重组载体导人干细胞常用的方法是________________。检验重组载体是否整合到小鼠于细胞基因组的常用方法是用________________________________检测胚胎干细胞基因组,导入到胚胎干细胞的基因能否成功表达,还要进行________________两方面的检测。
(4)导入了重组载体的胚胎干细胞需要移植到代孕母鼠才能发育成转基因小鼠,对代孕母鼠的基本要求是____________________ ,为保证代孕母鼠对移植胚胎不排斥,移植前要对代孕母鼠进行处理。
【简答题】研究发现,Graves病(GD)患者的甲状腺细胞会表达大量细胞间粘附分子 l(ICAM—1),导致甲状腺肿大,进而引起甲亢。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)为检测注射ICAM—l的小鼠体内是否产生相应的抗体,需在多孔培养板中加入ICAM—l和______________ ,依据反应结果,选出_____________________反应最强的培养孔所对应的小鼠继续实验。
(2)在培养骨髓瘤细胞和小鼠脾脏细胞时,培养箱中的气体环境要求是含______________的气体;然后可通过一定手段让这两种细胞融合。融合完成后,融合体系中会出现多种类型的细胞,原因是_________________________。
(3)融合体系中的B淋巴细胞不需要利用选择培养基进行筛选,经多次传代培养后就不能存活,原因是_____________________。而融合体系中的其他细胞,还需进行两次筛选,首先用HAT培养基筛选出具有_____________________能力的杂交瘤细胞;然后将这些杂交瘤细胞放在多孔培养板上培养,用ICAM—l检测,筛选出的杂交瘤细胞。
(1)为检测注射ICAM—l的小鼠体内是否产生相应的抗体,需在多孔培养板中加入ICAM—l和______________ ,依据反应结果,选出_____________________反应最强的培养孔所对应的小鼠继续实验。
(2)在培养骨髓瘤细胞和小鼠脾脏细胞时,培养箱中的气体环境要求是含______________的气体;然后可通过一定手段让这两种细胞融合。融合完成后,融合体系中会出现多种类型的细胞,原因是_________________________。
(3)融合体系中的B淋巴细胞不需要利用选择培养基进行筛选,经多次传代培养后就不能存活,原因是_____________________。而融合体系中的其他细胞,还需进行两次筛选,首先用HAT培养基筛选出具有_____________________能力的杂交瘤细胞;然后将这些杂交瘤细胞放在多孔培养板上培养,用ICAM—l检测,筛选出的杂交瘤细胞。
【简答题】下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究.据图回答相关问题.
(1)图中Y细胞的名称是______________。
(2)①过程类似于植物组织培养技术中的______________过程。②过程的实质是______________。
(3)③过程中需用到的生物诱导剂是______________。
(4)④处需要筛选,其目的是_____________________。
(5)若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞,能检测到放射性32P的细胞器是______________。研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。
(6)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_______(填“低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如右图所示。制备免疫小鼠所用的H蛋白(抗原)时,应构建________区基因,转入原核细胞表达并提纯。
(2)①过程类似于植物组织培养技术中的______________过程。②过程的实质是______________。
(3)③过程中需用到的生物诱导剂是______________。
(4)④处需要筛选,其目的是_____________________。
(5)若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞,能检测到放射性32P的细胞器是______________。研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段。
(6)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中_______(填“低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如右图所示。制备免疫小鼠所用的H蛋白(抗原)时,应构建________区基因,转入原核细胞表达并提纯。
【单选题】牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体,筛选胚胎进行移植,以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是
A.H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B.应选用原肠胚做雌雄鉴别
C.鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D.用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体
A.H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B.应选用原肠胚做雌雄鉴别
C.鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D.用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体