柑橘是广受欢迎的水果之一，无核是其作为鲜食水果的优良经济性状之一。柑橘为雌雄同株植物。位于线粒体DNA上的雄性不育基因CMS 使植株形成无核果实（传粉受精后，种子不能正常发育导致无核）。位于染色体上的一等位基因R和r 对育性起调控作用，其中R可以让育性恢复使植株产生有核果实，r 无此效应。研究人员通过设计特定的引物对不同品种的柑橘细胞的DNA进行PCR，然后检测细胞中CMS和R 基因的数量，结果如表所示。

注：“+ ”代表有此基因及数量，“-”代表无此基因。

（1）CMS基因的遗传_______________（填“遵循”或“不遵循”）分离定律。利用PCR 技术扩增CMS基因和R基因需要设计__________对引物。

（2）表中所列的六个品种中结无核果实的是___（填字母）。

（3）等量品种C与品种D间行种植，随机授粉。收获C植株上所结的全部F1 ，理论上其体细胞中____（填“有”或“无”）CMS 基因，核基因型为____。D植株上收获的果实中，有核果实所占的比例为_______。

（4）培育三倍体是获得无核品种的另一条有效途径，科研工作者以二倍体柑橘为母本，以四倍体柑橘为父本培育了57株三倍体柑橘。用分子标记技术对亲本及子代群体进行PCR 扩增及凝胶电泳，结果如下图所示。若父本产生配子时染色体随机组合，两两分离，则母本和父本的基因型分别为____________，理论上F1 的基因型及比例为___________________________。

为研究体育锻炼能缓解焦虑的机制，利用慢性束缚应激模型(CRS) 小鼠和正常小鼠做了系列实验，结果见下图。已知SNAP91 为突触蛋白，其发生乳酸化（和乳酸通过共价键结合）后功能改变；DCA 是一种乳酸生成抑制剂。回答下列问题：

（1）图1实验中________组的结果能说明注射乳酸能够缓解CRS 小鼠焦虑行为。为证明运动产生的乳酸能缓解CRS 小鼠焦虑行为，需增设第⑤组，其处理是_______________________________。

（2）测得运动后CRS小鼠大脑前额叶中乳酸化SNAP91 上升，突触小泡的数量增加、突触后膜增厚。乳酸化的SNAP91 使突触后膜动作电位频率提高，其原因是突触小泡的变化使__________________________，与突触后膜的受体结合导致_________________内流产生动作电位。

（3）结合图2分析，将SNAP91 乳酸化位点突变失活后，突触后膜________（填“容易”或“不容易”）兴奋，判断依据是__________________________________________________________________。

豆大蓟马是一种缨翅目昆虫，危害多种植物，尤其偏爱危害花期作物，为加强预防，科研人员对其传播规律进行了下列研究。
实验一：室内转寄主实验研究不同植物对豆大蓟马的引诱效果。
实验方法:将豇豆和丝瓜（均诱导至盛花期）放在养虫笼两侧（如图1所示），并分别接人相同数目的豆大蓟马成虫,此时保持中间通道为开放状态。3d 后，关闭中间通道，再分别记录不同作物上豆大蓟马的数量。结果如图2所示。
实验二：田间扩散实验研究大田中豆大蓟马的迁移现象。
实验方法:寻找豇立田与丝瓜田相邻的区域，在距离豇豆田或丝瓜田的3m起，每隔2m 取一个采样点（如图3所示，采样点均位于两块田之间区域），设置粘虫板进行采样.2d 后，将粘虫板带回实验室，利用体视显微镜对粘附的豆大蓟马进行鉴定并记录数量，结果如图4所示。通过比较不同采样点豆大蓟马的数量，以判断其扩散趋势，实验重复进行多次以确保数据的可靠性。
请回答下列相关问题。
（1）豆大蓟马、豇豆和丝瓜三者之间的种间关系包括________________。
（2）实验一说明__________________________________，实验二的结论和实验一________（填“一致”或“不一致”）。
（3）科研人员第二年交换两块农田种植作物，同一时期进行实验，其结果仍然相同，结合豆大蓟马食性特征，推测最可能的原因是______________________________________________。
（4）为对上述推测进行初步验证，科研人员设置一如实验一中所示养虫笼，分别放入未开花豇豆与盛花期丝瓜各一株，每株植物分别接入15头成年豆大蓟马，保持通道开放，3 d 后关闭通道，分别记录两侧植物上豆大蓟马的数量，若____________________________________________，则上述推测合理。

长叶烯是重质松节油的主要成分，具有木香和龙涎香气，溶于甲苯，不溶于水，是合成香料、合成树脂和高能燃料的重要原料。尽管资源分布广泛，但长叶烯的产量有限，工业化生产受到限制，微生物发酵则为合成长叶烯提供了绿色可持续的途径。现有研究以大肠杆菌内源的MEP途径为基础，以法尼基焦磷酸(FPP) 为直接前体物质，在异源长叶烯合酶(lgfs) 的催化作用下环化合成长叶烯。此过程的调控策略有：①引入经密码子优化的lgfs，②过表达大肠杆菌FPP合成过程中关键酶基因idi、ispA ，提高前体物FPP的供应量，③加强大肠杆菌内源MEP途径2个关键酶基因dxs、dxr 的表达。请回答下列问题：

（1）为构建如图甲所示的重组pET28a-lgfs表达载体，需先将经密码子优化的lgfs 基因通过PCR特异性扩增，用于扩增lgfs 基因的引物是指_______________________________________。为使PCR 产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的____________（填“3'端”或“5' 端”）。

注:ori:复制原点;KanR:卡那霉素抗性基因;erg20:酿酒酵母来源的FPP 合酶关键酶基因

（2）除图甲中标出的结构外，作为载体，质粒还需具备的结构有_________________________________（答出2个结构即可）。将得到的重组pET28a-lgfs 表达载体、重组pET28a-lgfs-ispA-idi表达载体、重组pET28a-lgfs-erg20-idi 表达载体、重组pET28a-lgfs-ispA-idi表达载体+重组pET28a-dxs-dxr 表达载体，分别转入经______________________________处理的大肠杆菌，构建出重组菌株A、重组菌株B、重组菌株C、重组菌株D。

（3）将各重组菌株分别发酵后，检测不同发酵时长发酵样品中所含长叶烯的产量，结果如图乙所示。

已知生成1 mol FPP 需要2 mol异戊烯基焦磷酸(IPP)和1 mol二甲基烯丙基二磷酸(DMAPP) ，而MEP途径所产生的IPP与DMAPP摩尔比为5:1，过表达基因idi 会使IPP和DMAPP的消耗和形成达到平衡转换，从而直接影响FPP 的合成。另外，为避免IPP与DMAPP的积累对细胞生长产生毒性，需要加强FPP 合酶的表达，在此，采用了2种不同来源FPP合酶，即大肠杆菌ispA和酿酒酵母来源的erg20 进行加强，根据图乙结果推测ispA表达效果要优于erg20 ，判断依据是_______________________________。在采用ispA 的基础上，通过____________________，还可以使长叶烯产量得到显著提高。

（4）为验证代谢途径中各关键酶基因的转录水平能够影响长叶烯的产量，请写出关键实验步骤：①___________________；②_______________；③荧光定量PCR 。

小麦是我国重要的粮食作物之一，开展小麦高产研究是保证国家粮食安全的重要举措。下列是磷肥施用量对小麦叶片光合性能和产量的影响的相关研究。将试验田中的小麦分成3组，分别进行低磷(P₂O₅ 75 kg/hm2,LP) 、中磷(P₂O₅ 225 kg/hm2,MP)和高磷(P₂O₅ 375 kg/hm2,HP)3 种处理。三组小麦从旗叶（麦穗下面的第一个叶片）全展时开始，每隔10 d 测定一次叶片的希尔反应活力和净光合速率(Pn) ，直至叶片黄枯。实验结果如下图所示，回答下列问题：

（1）小麦从磷肥中吸收的磷元素可用于合成叶绿体中的_____________（2种小分子有机物），作为反应物参与光合作用的光反应阶段。

（2）希尔反应活力测定通常是在有光照、_______的条件下，在离体的叶绿体悬浮液中加入Fe³⁺后测定O₂的释放速率。该过程中Fe³⁺ 的作用是：____________________________________________________。

（3）10 d后HP和LP组小麦希尔反应活力均低于MP组，经检测是由于HP和LP 都会导致旗叶中叶绿素b含量减少，若用纸层析法验证该结论，预期结果是：相比于MP组，HP 和LP 组的滤纸条__________________（答2点）。

（4）图2结果表明HP组小麦的净光合速率最高，但研究人员发现产量却低于MP 组，推测原因是旗叶将光合产物输出到秸秆用于营养生长的比例：HP组___（填“> ”“<  ”或“=”）MP 组，这提示人们在实际农业生产中应注意__________。