镰状细胞贫血是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病，是由位于人类6号染色体上的血红蛋白基因发生隐性突变导致的，纯合子患者多数在幼年时期因红细胞严重溶血而亡。某夫妻双方都为该致病基因的携带者，为了生下健康孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为这对夫妇及腹中孩子核酸分子杂交诊断的结果示意图。
请回答下列问题：
（1）由图中可知，正常基因B有三个酶切位点，由于发生了_____________________导致突变基因b 上只有两个酶切位点。凝胶电泳分离酶切片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱。与图中正常基因模板链杂交的碱基对应序列为__________________。
（2）根据凝胶电泳带谱分析，腹中胎儿的基因型为___________。
（3）若通过基因治疗将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞将有望彻底治愈镰状细胞贫血。某科研团队设想运用重叠延伸PCR 技术来实现对致病基因的定点诱变，原理如右图所示：
①PCR过程中需要的物质有DNA 模板、引物、____________________________________
_________________________________________（至少写出两个）。
②该过程共用到4种引物，引物B的突起处的碱基应设计为__________（假设引物为单链DNA ，且上方这条链为模板链）。
③在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA 的过程中，两个反应系统中均进行一次复制，共产生__________种DNA 分子。请分析该阶段两个反应系统必须分开进行的原因是___________________________。
④第二阶段PCR4 反应系统选择的引物为______________________。
【第 12517 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
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【参考答案】
(1)碱基对的替换(1分) 5'一AACTCGT-3(1分)
(2)bb(1分)
(3)①耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、含镁离子的缓冲液(2分,答对两个才给分)
②T(2分)
③3(2分) 引物B和C中存在互补配对片段,置于同一反应系统时它们会发生结合而失去作用(2分)
引物A、引物 D(2分)
镰状细胞贫血是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病，是由位于人类6号染色体上的血红蛋白基因发生隐性突变导致的，纯合子患者多数在幼年时期因红细胞严重溶血而亡。某夫妻双方都为该致病基因的携带者，为了生下健康孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为这对夫妇及腹中孩子核酸分子杂交诊断的结果示意图。
请回答下列问题：
（1）由图中可知，正常基因B有三个酶切位点，由于发生了_____________________导致突变基因b 上只有两个酶切位点。凝胶电泳分离酶切片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱。与图中正常基因模板链杂交的碱基对应序列为__________________。
（2）根据凝胶电泳带谱分析，腹中胎儿的基因型为___________。
（3）若通过基因治疗将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞将有望彻底治愈镰状细胞贫血。某科研团队设想运用重叠延伸PCR 技术来实现对致病基因的定点诱变，原理如右图所示：
①PCR过程中需要的物质有DNA 模板、引物、____________________________________
_________________________________________（至少写出两个）。
②该过程共用到4种引物，引物B的突起处的碱基应设计为__________（假设引物为单链DNA ，且上方这条链为模板链）。
③在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA 的过程中，两个反应系统中均进行一次复制，共产生__________种DNA 分子。请分析该阶段两个反应系统必须分开进行的原因是___________________________。
④第二阶段PCR4 反应系统选择的引物为______________________。
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