【第 12597 题】 【题型】:简答题 【章节】:
第2节 基因工程的基本操作程序
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【参考答案】(1)纤维素;能分解纤维素的细菌和真菌;形状、大小和颜色
(2)鉴别出纤维素分解菌;该菌株形成的菌落的透明圈直径与菌落直径的比值最大
(3)ABC
(4)两种酶切割DNA形成的不能都是平末端,也不能是相同的黏性末端
(5)繁殖能力强、生理结构和遗传物质简单、对环境因素敏感、容易进行遗传操作等
纤维素酶主要由内切葡聚糖酶(EG)、外切葡聚糖酶(EH)和β-葡萄糖苷酶(β-G)组成,纤维素酶广泛存在于自然界的细菌和真菌中,用于生产纤维素酶的生物一般是真菌,如木霉属真菌。如图表示从土壤中分离出高产纤维素酶的菌株并克隆表达降解纤维素的EG、EH和β-G的大致流程。回答下列问题:

(1)过程①所用的培养基需添加的唯一碳源是________,在该培养基上可以生长的微生物有________________,从这些微生物中挑选出木霉属真菌,常利用菌落的________________等特征。
(2)从分离出的木霉属真菌中筛选出高产纤维素酶的菌株时,需在培养基中添加刚果红,其主要作用是________。确定某菌株为高产纤维素酶菌株的依据是________________。
(3)过程④大量扩增目的基因,如EG基因、EH基因、β-G基因时,除了需要知道基因两端的部分碱基序列来设计引物之外,还应在引物的5′端添加相关限制酶的识别序列,原因有________(填字母)。
A.目的基因两端没有限制酶的识别序列
B.DNA聚合酶是从引物的3′端连接游离的脱氧核苷酸
C.3′端需要与模板链互补
(4)为了防止目的基因与质粒载体反向拼接,过程⑤常选用2种限制酶切割目的基因和质粒载体,对此两种酶的选择还有其他限制条件,如________________________________。
(5)过程⑥常用的受体细胞是大肠杆菌,其优点有________________(答出2点即可)。