【第 12595 题】 【题型】:简答题 【章节】:
第2节 基因工程的基本操作程序
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【参考答案】(1)M23可促进细胞膜上OAPs聚集
(2)①逆转录;PCR
②限制酶和DNA连接酶;抗原抗体杂交
③a:导入M23基因的CHO细胞;
b:导入空质粒的CHO细胞;
c:OAPs
(3)M1与OAPs的形成无关,M23与OAPs的形成有关
某些膜内蛋白以紧密排列的方阵形式存在称为OAPs,OAPs的分布异常与某些神经性和神经肌肉性疾病相关。研究AQP4(一种水通道蛋白)与OAPs结构形成的关系,有助于揭示上述疾病的机制。请回答问题:
(1)AQP4有M1和M23。两种分子量相近的亚型,二者均可独立构成四聚体发挥作用。科研人员发现导入并稳定表达M23基因的细胞,其细胞膜上有OAPs形成,而敲除该基因的细胞中未见OAPs的形成,该结果表明__________________________________________。
(2)科研人员继续对M1与OAPs形成的关系进行了研究。
①提取大鼠脑组织的总RNA,通过__________获得cDNA,并通过__________技术获得M1基因。
②将M1基因与质粒用__________________酶构建基因表达载体,导入中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中,用________________技术检测到受体细胞已成功表达M1蛋白。
③科研人员继续实验,方案及结果如下。
实验分组
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1对照组
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2对照组
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3实验组
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实验处理
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a
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b
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导入M1基因的CHO细胞
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培养一段时间后裂解细胞并离心,取上清液中蛋白
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检测指标
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用电泳技术检测 c 的形成情况
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请将表格中的实验方案补充完整。
a:__________________________
b:__________________________
c:__________________________
(3)综合上述实验结果,AQP4与OAPs形成的关系为______________________________________________。