【简答题】白花蛇草是我国民间常用的中草药，科学工作者用RPMI-1640培养基配制出不同浓度的白花蛇草提取物(HDE)工作液，分别处理人的白血病细胞株(K562)，测得线粒体内膜跨膜电位的变化如下图1，测得凋亡抑制基因Survivin和原癌基因Bcl-2表达的变化情况如图2。
 
(1)K562细胞是由于____基因发生突变，导致正常细胞的生长和分裂失控而变成癌细胞。
(2)图1中HDE处理____h后K562细胞内线粒体内膜跨膜电位下降最显著。跨膜电位下降影响线粒体的功能，导致____合成停止，并释放凋亡诱导因子，最终引起细胞的凋亡或死亡。
(3)收集用HDE处理的K562细胞中Survivin和Bcl-2的mRNA，在______酶的作用下合成cDNA，再通过____技术扩增cDNA，然后测定其含量，结果如图2所示。其中对照组的处理是使用等量__________。β-Actin基因在各组织和细胞中的表达相对恒定，在实验中的作用是____。从图2可知，用HDE处理2周的K562细胞中Survivin和Bcl-2的表达________未经处理的细胞。
(4)综上所述，HDE可能通过_________________________，
抑制抗凋亡基因的表达，从而____K562白血病细胞增殖。
(5)如果白花蛇草没有明显的毒副作用，依据本实验的结果，用它制药的最佳用量是使人体的血药浓度达到______mL/L。

【答案】：(1)原癌(多答抑癌基因或Survivin基因也可)　(2)48　ATP　(3)逆转录　PCR　不含HDE的RPMI-1640培养基　对照　明显低于　(4)降低线粒体内膜跨膜电位　抑制　(5)12.8

【解析】：(1)K562为白血病细胞株，是由于原癌基因发生突变，导致正常细胞的生长和分裂失控而变成癌细胞。(2)根据图1，FL1/FL2比值越大，说明跨膜电位下降越明显，用HDE处理48 h后，FL1/FL2比值最大，线粒体内膜跨膜电位下降最显著；线粒体是细胞的“动力车间”，跨膜电位下降影响线粒体的功能，导致ATP合成停止，并释放凋亡诱导因子，最终引起细胞凋亡或死亡。(3)收集K562细胞的mRNA，在逆转录酶的作用下合成cDNA，通过PCR技术可扩增DNA。本题中实验组加入用RPMI-1640培养基配置的不同浓度的HDE工作液，对照组应加入不含HDE的RPMI-1640培养基，以排除RPMI-1640培养基对实验结果的干扰。β-Actin基因在实验组和对照组细胞中表达相对恒定，可作为对照依据，依次来衡量其他基因在实验组和对照组细胞中表达的差异。从图2可知，用HDE处理2周的K562细胞中Survivin和Bcl-2的表达对应条带明显比对照组对应基因表达条带暗，说明用HDE处理2周的K562细胞中Survivin和Bcl-2的表达低于未经处理的细胞。(4)结合图1与图2，HDE基因可能通过降低线粒体内膜跨膜电位，抑制Survivin基因和Bcl-2基因等抗凋亡基因的表达，从而抑制(K562)白血病细胞增殖。(5)根据图1，若白花蛇草没有明显毒副作用，用它制药的最佳用量是使人体的血药浓度达到12.8 mL/L。