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  • 所属章节:第3节 胚胎工程

  • 【简答题】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:
    YAWEN OFFICE 
    (1)htPA基因与载体用________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用________技术。
    (2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其__________。采集的精子需要经过____,才具备受精能力。
    (3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________,为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行____。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的____。
    (4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到______,说明目的基因成功表达。

    【答案】:(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶) DNA分子杂交(或核酸探针) (2)超数排卵 获能(处理) (3)显微注射法 性别鉴定 全能性 (4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)

    【解析】:(1)用同种限制性核酸内切酶对目的基因和载体进行切割,以形成相同的黏性末端。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,常用DNA分子杂交技术。(2)对供体母羊注射促性腺激素可以使其超数排卵,采集的精子需要经过获能处理后才具备受精能力。(3)将重组表达载体导入受精卵(动物细胞)常用的方法是显微注射法。为了获得母羊,需要对胚胎进行性别鉴定。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,依据的原理是早期胚胎细胞的全能性。(4)目的基因成功表达的标志是在转基因母羊的羊乳中检测到htPA,即人组织纤溶酶原激活物。