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所属章节:第2节 基因工程的基本操作程序
【简答题】雌激素(E2)与雌激素受体(ERa)结合成复合物,引发靶细胞生命活动发生一系列变化。推测ERa作为转录因子调节pS2基因转录,进而调节靶细胞的生命活动。为证明该推测,进行了相关研究。分析并回答:
(1)尽管E2分布于全身的体液中,但人体肾上皮细胞对E2不敏感,分析其原因是该细胞中缺少________。
(2)利用________酶将pS2基因启动子与细菌荧光素酶基因连接,构建融合基因。
(3)为验证该推测,实验流程及结果如图:
①通过______技术将外源DNA导入肾上皮细胞。
②乙组肾上皮细胞导入的X基因是______基因。
③丙组导入________,目的是排除其携带的基因对实验结果的干扰。
④推测丙组或丁组荧光素酶活性______。
⑤该实验结果是否支持“ERa作为转录因子调节pS2基因转录”?______。请陈述理由。_____________________
【答案】:(1)受体蛋白(ERa) (2)DNA连接
(3)①显微注射 ②融合 ③空白质粒(或不带目的基因的质粒或空运载体) ④低 ⑤支持加入E2后,导入融合基因和ERa基因表达载体组的受体细胞荧光酶的活性高于只导入融合基因组,其他组酶的活性均低(合理即可)
【解析】:本题主要考查基因工程的操作步骤,能根据图中信息答题,属于考纲识记和理解层次的考查。
【解答】
(1)雌激素(E2)于受体结合才能发挥作用,尽管E2分布于全身的体液中,但人体肾上皮细胞对E2不敏感,分析其原因是该细胞中缺少受体蛋白(ERa) 。
(2)利用DNA连接酶将pS2基因启动子与细菌荧光素酶基因连接,构建融合基因。
(3)为验证该推测,实验流程及结果如下图:
①通过显微注射技术将外源DNA导入肾上皮细胞。
②乙组肾上皮细胞导入的X基因是融合基因。
③丙组导入空质粒(或不带目的基因的质粒或空运载体),目的是排除其携带的基因对实验结果的干扰。
④推测丙组或丁组荧光素酶活性低。
⑤该实验结果支持“ERa作为转录因子调节pS2基因转录”,原因是加入E2后,导入融合基因和ERa基因表达载体组的受体细胞荧光酶的活性高于只导入融合基因组,其他组酶的活性均低。