【简答题】

某些膜内蛋白以紧密排列的方阵形式存在称为OAPs，OAPs的分布异常与某些神经性和神经肌肉性疾病相关。研究AQP4（一种水通道蛋白）与OAPs结构形成的关系，有助于揭示上述疾病的机制。请回答问题：

（1）AQP4有M1和M₂₃。两种分子量相近的亚型，二者均可独立构成四聚体发挥作用。科研人员发现导入并稳定表达M23基因的细胞，其细胞膜上有OAPs形成，而敲除该基因的细胞中未见OAPs的形成，该结果表明______________________。

（2）科研人员继续对M1与OAPs形成的关系进行了研究。

①提取大鼠脑组织的总RNA，通过______获得cDNA，并通过______技术获得M1基因。

②将M1基因与质粒用__________酶构建基因表达载体，导入中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中，用________技术检测到受体细胞已成功表达M1蛋白。

③科研人员继续实验，方案及结果如下。

请将表格中的实验方案补充完整。

a：______________

b：______________

c：______________

（3）综合上述实验结果，AQP4与OAPs形成的关系为__________________________。

【答案】：（1）M₂₃可促进细胞膜上OAPs聚集
（2）①逆转录；PCR
②限制酶和DNA连接酶；抗原抗体杂交
③a：导入M₂₃基因的CHO细胞；

   b：导入空质粒的CHO细胞；

    c：OAPs

【解析】：本题依托研究AQP4与OAPs结构形成与某些神经性和神经肌肉性疾病的关系，意在考查考生的信息提炼能力和实验设计分析能力。
【解答】
（1）AQP4有M1和M23两种分子量相近的亚型，二者均可独立构成四聚体发挥作用。科研人员发现导入并稳定表达M23基因的细胞，其细胞膜上有OAPs形成，而敲除该基因的细胞中未见OAPs的形成，该结果表明M23基因表达的M23可促进细胞膜上OAPs聚集。
（2）科研人员继续对M1与OAPs形成的关系进行了研究。
①提取大鼠脑组织的总RNA，通过逆转录法获得cDNA，并通过PCR技术获得M1基因。
②将M1基因与质粒用限制酶和DNA连接酶构建基因表达载体，导入中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中，用抗原抗体杂交技术检测到受体细胞已成功表达M1蛋白。
③据表格分析可知，以下实验的自变量是M23基因和M1基因，因变量是OAPs的形成，无关变量是导入基因的运载体等，据此补充实验步骤如下：

所以：a：导入M23基因的CHO细胞；b：导入空质粒的CHO细胞；c：OAPs
（3）距电泳结果得出实验结论为：AQP4与OAPs形成的关系为M1与OAPs的形成无关，M23与OAPs的形成有关。