【单选题】凝胶阻滞试验（EMSA）的基本原理是：荧光标记的DNA与蛋白质结合后分子量增大，电泳后通过荧光检测可在相应位置显示出阻滞条带。已知O2蛋白通过与ZmGRAS11基因启动子区的motif序列结合来调控ZmGRAS11基因的表达，科学家为证实motif序列是与O2蛋白结合的关键序列，利用荧光标记的motif序列作为指示探针，无荧光标记的motif序列（WT）和无荧光标记的突变motif序列（M1～M6）作为7种竞争探针，进行EMSA试验，实验结束后进行荧光检测，结果如下图所示，下列说法错误的是

A．图中“？”是指荧光标记的指示探针
B．泳道3无阻滞条带的原因是O2蛋白全部与WT探针结合
C．在竞争探针中引入突变可评估突变对竞争探针与O2蛋白结合的影响
D．突变对探针M4～M6与O2蛋白结合能力影响相对较小的是M4、M5

 

 

【答案】：D

【解析】：

A、泳道1，没有加O2蛋白和竞争探针以及“?”，且只有一条指示探针条带，说明图中“?”是指荧光标记的指示探针，A正确；

B、泳道3，加入了O2蛋白和无荧光标记的竞争探针WT探针以及荧光标记的指示探针，只有一条指示探针条带，且于泳道1的指示探针条带宽度相同，说明O2蛋白没有与荧光标记的指示探针结合，都与无荧光标记的竞争探针WT探针结合了，所以观察不到阻滞条带，B正确；

C、O2蛋白与荧光标记的指示探针结合越多阻滞条带就会越宽，指示探针条带就会越窄，而对于加入无荧光标记的突变竞争探针会竞争性的与O2蛋白结合，从而使指示探针的条带会变宽，阻滞条带就会变窄，且突变的竞争探针与O2蛋白结合能力越强，阻滞条带就会越窄，因此在竞争探针中引入突变可评估突变对竞争探针与O2蛋白结合的影响，C正确；

D、加入突变竞争探针M4、M5、M6的泳道，M6的阻滞条带最窄，说明突变的竞争探针中M6与O2蛋白结合能力最强，即M6发生的突变，对其与O2蛋白结合影响相对较小，D错误。

故选D。