【简答题】

基因工程的关键步骤是基因表达载体的构建，人类γ基因启动子及其上游的调控序列中存在着BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。为了确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置，科研人员用PCR技术扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，相关信息如图所示。请回答下列问题：

(1)基因表达载体包括复制原点、目的基因、             （答出3点）。据图可知，扩增的γ基因上游不同长度的片段中，扩增出最长的片段需要选用的引物组合为             。

(2)由于荧光蛋白基因缺少启动子，为了使荧光蛋白基因正常表达，需要在其             （填“Nhe I”或“Mun I”）侧接入启动子；启动子的作用是                                       。

(3)构建基因表达载体的过程中，除了注意酶切后目的基因和载体露出相同的黏性末端，还需要注意连接方向以便表达。据图分析，为了使荧光蛋白基因正常表达，γ基因启动子及其上游的             （填“R”或“F₁”）调控序列应接在荧光蛋白基因的Mun I端，             （填“R”或“F₁”）调控序列应接在荧光蛋白基因的Xho I端。

(4)引物的合成是PCR成功的关键，PCR扩增时，要有                                       ，以便合成引物。制作引物过程中需要注意             之间不能有互补的序列，同一引物内部也不能有互补的序列。

【单选题】小鼠A^vy基因控制黄色体毛，该基因上游不同程度的甲基化修饰会导致其表达受不同程度抑制，使小鼠毛色发生可遗传的改变。有关叙述正确的是
A.A^vy 基因的碱基序列保持不变
B.甲基化促进A^vy基因的转录
C.甲基化导致A^vy基因编码的蛋白质结构改变
D.甲基化修饰不可遗传

【多选题】视网膜病变是糖尿病常见并发症之一。高血糖环境中，在DNA甲基转移酶催化下，部分胞嘧啶加上活化的甲基被修饰为5′− 甲基胞嘧啶，使视网膜细胞线粒体DNA 碱基甲基化水平升高，可引起视网膜细胞线粒体损伤和功能异常。下列叙述正确的是 
A.线粒体DNA 甲基化水平升高，可抑制相关基因的表达
B.高血糖环境中，线粒体DNA 在复制时也遵循碱基互补配对原则
C.高血糖环境引起的甲基化修饰改变了患者线粒体DNA 碱基序列
D.糖尿病患者线粒体DNA 高甲基化水平可遗传

【单选题】某植物的叶形与R 基因的表达直接相关。现有该植物的植株甲和乙，二者R基因的序列相同。植株甲R基因未甲基化，能正常表达；植株乙R 基因高度甲基化，不能表达。下列有关叙述正确的是 
A.植株甲和乙的R 基因的碱基种类不同
B.植株甲和乙的R 基因的序列相同，故叶形相同
C.植株乙自交，子一代的R 基因不会出现高度甲基化
D.植株甲和乙杂交，子一代与植株乙的叶形不同

【多选题】 在人类胚胎发育的不同时期，红细胞中的𝜀− 珠蛋白基因（基因1）和𝛾− 珠蛋白基因（基因2）的表达情况不同，具体如下图所示。下列相关叙述正确的是 
A.两种珠蛋白基因在不同时空进行了选择性表达
B.启动子甲基化可能影响RNA 聚合酶对它的识别
C.a 链为这两种珠蛋白基因转录的模板链
D.甲基化修饰是一种表观遗传调控方式