【多选题】如图为DNaseI (一种消化DNA的内切核酸酶)足迹法示意图，该方法可鉴别RNA聚合酶等蛋白质在DNA上的结合位点，下列有关叙述正确的是
 
A．DNaseI作用于DNA的氢键和磷酸二酯键
B．加入的蛋白质可保护相应DNA序列不受DNaseI攻击
C．图中①处的空白区域是蛋白质与DNA结合后留下的“足迹”
D．该方法可找到与特异性DNA结合的目标蛋白且能确定目标蛋白结合的碱基

【多选题】下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是
 
A．在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌
B．在含氨苄青霉素的培养基上，能生长的是导入了重组质粒的细菌
C．在含氨苄青霉素的培养基上能生长，但在含四环素的培育基不能生长的细菌是导入了重组质粒的细菌
D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长

【单选题】限制酶BamHI和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHI切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒，下列相关叙述错误的是
A.酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素

B.目的基因经限制酶BamHI切割后形成的黏性末端是-CTAG-

C.分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒

D.经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别

【多选题】检测发现，转入大肠杆菌的蛋白M基因表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白 M 基因结合的两对引物（引物B和引物C中都替换了一个碱基），并按图示方式依次进行了4次PCR，以得到定点突变的新的蛋白M基因。这4次PCR应该选择的引物，正确的是
 

A.PCR1--引物A和引物B

B.PCR2--引物C和引物 D

C.PCR3--引物B和引物C  

D.PCR4--引物A和引物 D

【简答题】二苯乙烯苷是我国传统药材何首乌特有的药效成分，具有抗氧化、清除自由基等功效。合成二苯乙烯苷的关键酶是芪合酶（STS），为获得大量的STS，研究人员利用质粒（如图2）将STS基因（如图1）转化到大肠杆菌细胞内进行表达。回答下列问题：
(1)采用______技术可以快速、大量获得目的基因，据图1分析，利用该技术扩增STS基因时，应选择的引物是_____。
(2)为使STS基因与质粒正确连接，需在所选引物的_______（填“3”或“5’”）端分别增加相应限制酶的酶切位点，同时选用_______两种限制酶切割质粒。
(3)启动子是_______识别和结合的部位。很多启动子具有物种特异性，在图2质粒中插入STS基因，其上游启动子应选择_______（填写字母）。
A．何首乌启动子             B．大肠杆菌启动子             C．农杆菌启动子
(4)可将转化后的大肠杆菌接种到含_____的培养基上进行筛选。能在该培养基上生长的大肠杆菌是否一定含有STS基因?请判断并说明理由：_____。
(5)科研人员利用相关技术替换了STS某个位点的氨基酸，提高了STS的抗氧化能力，该技术属于______。