【简答题】苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如图所示：①为土壤样品。请回答下列问题：
(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入_____作为碳源。②中不同浓度碳源的培养基_____(A.影响；B.不影响)细菌的数量。如果要测定②中活细菌数量，常采用__________法。
(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于
_____________________________________________；
使用_____法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？
(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？
(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？

【简答题】

完成下列关于微生物培养的相关问题：

(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外,还要考虑_______、_____和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_____、_____等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。

(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_______(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和_____；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________________________。
(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_____。
(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的
_____________________________________________。
(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是__________________________________________。

【简答题】炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。
(1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。
(2)细菌鉴定：实验流程如图所示
①对配制的液体培养基等需采取_____方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为_____(填“无机碳”或“有机碳”)。
②挑选可疑菌落制片后，用_____观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。
③接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是_____________________________________________。
对照组试管中应加入_____，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_____(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体，与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_____。

【简答题】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)
(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_____，培养基灭菌采用的最适方法是_____法。
(3)测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测_____，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用_____技术使脂肪酶能够重复使用。
(4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。

【单选题】下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数