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第2节 微生物的培养技术与应用

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  • 【简答题】同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题:

    KH2PO4

    1.4 g

    Na2HPO4

    2.1 g

    MgSO4·7H2O

    0.2 g

    葡萄糖

    1 g

    尿素

    10 g

    琼脂

    15 g

    将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

    (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____指示剂,细菌合成的_____将尿素分解为_____,pH升高,使指示剂变为红色。
    (2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌, 这种培养基属于_____培养基。
    (3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_____和_____,实验中需要振荡培养,原因是________________。
    (4)右图是利用_____法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

    (5)关于右图的操作方法和结果,叙述正确的是_____。

    YAWEN OFFICE

    A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
    B.划线操作须在火焰上进行
    C.在5区域中才可以提到所需菌落
    D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
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  • 【简答题】绿藻A是某种单细胞绿藻,能够合成物质W。某小组为探究氮营养缺乏对绿藻A增殖及物质W累计的影响,将等量的绿藻A分别接种在氮营养缺乏(实验组)和氮营养正常(对照组)的两瓶培养液中,并在适宜温度和一定光强下培养。定时取样并检测细胞浓度和物质W的含量,结果如图。
    YAWEN OFFICE
    (1)从图甲可知,在氮营养正常培养液的瓶中,绿藻A的种群增长曲线呈________型。
    (2)综合图甲和图乙的信息可知,在生产上,若要用少量的绿藻A获得尽可能多的物质W,可以采取的措施是_____。
    (3)若物质W是类胡萝卜素,根据类胡萝卜素不易挥发和易于溶于有机溶剂的特点,应选择的提取方法是______。用纸层析法可以将类胡萝卜素与叶绿素分开,纸层析法分离的原理是____________。
    (4)在以上研究的基础上,某人拟设计实验进一步研究氮营养缺乏程度对物质W积累的影响,则该实验的自变量是__________。
    (5)与在光照条件下相比,若要使绿藻A在黑暗条件下增殖,需要为其提供___________(填“葡萄糖”或“纤维素”)作为营养物质,原因是_____________。
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  • 【简答题】

    金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性,在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题:

    (1)金黄色葡萄球菌的培养基为7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培养基,此培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供碳源、氮源及水和无机盐。培养基中加入7.5%NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选,原因是______________________________。

    (2)上述培养基的灭菌方法是__________。在制作血平板时需等平板冷却后,方可加入血液,以防止________。血平板在使用前,需置于恒温培养箱中一段时间的目的是__________。
    (3)取10mL自来水样,加入_____mL无菌水稀释成10-1稀释自来水样,依次操作,制作10-2、10-3、10-4稀释自来水样。
    (4)将0.1 mL 10-1~10-4的四个稀释样液,分别接种到4组(每组3个)血平板上的方法是_______。在血平板上,金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现________。若在10-3组的3个血平板上,金黄色葡萄球菌菌落数分别为39、38和37,则每升自来水中的活菌数约为_________。
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  • 【简答题】苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:
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    (1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有__________。
    (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐__________。以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步__________,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加__________。
    (3)下图为连续划线法示意图,在图中__________ (填图中序号)区域更易获得单菌落。
    YAWEN OFFICE 
    (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1 ~5号比色管的苯酚浓度应分别为__________。

    管号

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    苯酚浓度(mg/ L

     

     

     

     

     

    1

    如果废水为50 mg/ L 苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释__________ (填序号:①5   ②10   ③20)倍后,再进行比色。
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  • 【简答题】某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:
    (1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生_______________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是_______________,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_______________(打出两点即可)。
    (2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择______________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素 + NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是_______________。
    (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有___________(答出两点即可)。
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