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	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 1	COR基因是植物的冷调节基因，其编码的亲水性多肽能保护细胞免受冻害，具有提高抗寒性的作用。转录因子CBF(由CBF基因控制合成)能够特异性结合下游的靶基因启动子区，激活COR基因的表达。将不同植物的COR基因和CBF基因组合构建抗寒基因超量表达载体，转入植物体内能大幅提高植物的抗寒性。在构建基因表达载体时，需要根据载体和目的基因上的限制酶切割位点选择不同的限制酶。当遇到平末端和黏性末端无法连接时，可利用Klenow酶特有的与DNA聚合酶作用相同的特性，将黏性末端补平后再与平末端连接。 (1)研究小组获取了一段包含CBF基因的长DNA片段，根据已知CBF基因序列设计了适宜长度的引物A和引物B，在PCR过程中，经过四次循环消耗引物A和引物B共________________个，引物的作用是________________________________________________________________。 (2)现有若干种限制酶，它们的识别序列和切割位点如图所示。为将COR基因表达载体和CBF基因组合构建抗寒基因超量表达载体，应选用Hed Ⅰ切割COR基因表达载体、用________________切割CBF基因的某一侧后再连接。为实现CBF基因与COR基因表达载体的另一侧连接，共需用到________________种酶。 (3)在转入超量表达载体的转基因植物中，转录因子CBF特异性识别下游的靶基因启动子区后，与______酶结合形成复合体，从而激活COR基因的表达。检测COR基因及其表达过程，可以采用的方法有____________________________________________________________________(至少写出两种)。 (4)科学家在培育的转基因植物中，筛选到一棵AtNUP160植株(atnup160基因的突变体)，AtNUP160基因表达产物能通过干扰核孔复合体的形成，影响RNA的出核转运，进而影响植物的抗寒性。研究发现，AtNUP160植株中CBF基因表达水平降低，影响了COR基因的表达，导致抗寒性减弱。由此推断AtNUP160植株抗寒性减弱的机理是______________________________。【第 12201 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)30　使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸　(2)Mun Ⅰ　4　(3)RNA聚合　PCR、抗原－抗体杂交、在个体水平检测植株的抗寒性 (4)AtNUP160植株中AtNUP160基因的表达产物影响核孔复合体的形成，使得COR基因转录形成的mRNA无法转运出核，AtNUP160植株中转录因子CBF合成减少，导致COR基因转录减少，最终使COR基因转录出的mRNA在细胞质中处于较低水平，产生的亲水性多肽减少，植物抗寒性减弱 COR基因是植物的冷调节基因，其编码的亲水性多肽能保护细胞免受冻害，具有提高抗寒性的作用。转录因子CBF(由CBF基因控制合成)能够特异性结合下游的靶基因启动子区，激活COR基因的表达。将不同植物的COR基因和CBF基因组合构建抗寒基因超量表达载体，转入植物体内能大幅提高植物的抗寒性。在构建基因表达载体时，需要根据载体和目的基因上的限制酶切割位点选择不同的限制酶。当遇到平末端和黏性末端无法连接时，可利用Klenow酶特有的与DNA聚合酶作用相同的特性，将黏性末端补平后再与平末端连接。 (1)研究小组获取了一段包含CBF基因的长DNA片段，根据已知CBF基因序列设计了适宜长度的引物A和引物B，在PCR过程中，经过四次循环消耗引物A和引物B共________________个，引物的作用是________________________________________________________________。 (2)现有若干种限制酶，它们的识别序列和切割位点如图所示。为将COR基因表达载体和CBF基因组合构建抗寒基因超量表达载体，应选用Hed Ⅰ切割COR基因表达载体、用________________切割CBF基因的某一侧后再连接。为实现CBF基因与COR基因表达载体的另一侧连接，共需用到________________种酶。 (3)在转入超量表达载体的转基因植物中，转录因子CBF特异性识别下游的靶基因启动子区后，与______酶结合形成复合体，从而激活COR基因的表达。检测COR基因及其表达过程，可以采用的方法有____________________________________________________________________(至少写出两种)。 (4)科学家在培育的转基因植物中，筛选到一棵AtNUP160植株(atnup160基因的突变体)，AtNUP160基因表达产物能通过干扰核孔复合体的形成，影响RNA的出核转运，进而影响植物的抗寒性。研究发现，AtNUP160植株中CBF基因表达水平降低，影响了COR基因的表达，导致抗寒性减弱。由此推断AtNUP160植株抗寒性减弱的机理是______________________________。

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【试题】 2	钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用。科学家通过将CDPK基因导入拟南芥(双子叶植物)中，来获得具有抗性的新品种。如图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图，图中标记了限制酶的切割位点。据此回答下列问题： (1)通过基因工程，将CDPK基因导入拟南芥中，获得具有抗性的新品种的育种原理是____________________。为了使CDPK基因插入质粒中，应选取____________________(两种限制性内切核酸酶)分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。 (2)利用PCR可获得大量的CDPK基因，PCR扩增的第一步：用微量移液器在微量离心管中加入缓冲液、4种脱氧核苷酸的等量混合液、水、还需要加入________________________。PCR的产物一般通过琼脂凝胶电泳来鉴定，在凝胶中的DNA分子的迁移速率与_______________有关。 (3)将CDPK基因导入拟南芥细胞通常采用的方法是_________________________________。 (4)检测CDPK基因是否成功表达的方法是______________________，若有杂交带出现，表明已产生了CDPK。【第 12200 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)基因重组　Smal Ⅰ和Xba Ⅰ　(2)TaqDNA聚合酶，两种引物和模板DNA　凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象　(3)农杆菌转化法　(4)抗原—抗体杂交钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用。科学家通过将CDPK基因导入拟南芥(双子叶植物)中，来获得具有抗性的新品种。如图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图，图中标记了限制酶的切割位点。据此回答下列问题： (1)通过基因工程，将CDPK基因导入拟南芥中，获得具有抗性的新品种的育种原理是____________________。为了使CDPK基因插入质粒中，应选取____________________(两种限制性内切核酸酶)分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。 (2)利用PCR可获得大量的CDPK基因，PCR扩增的第一步：用微量移液器在微量离心管中加入缓冲液、4种脱氧核苷酸的等量混合液、水、还需要加入________________________。PCR的产物一般通过琼脂凝胶电泳来鉴定，在凝胶中的DNA分子的迁移速率与_______________有关。 (3)将CDPK基因导入拟南芥细胞通常采用的方法是_________________________________。 (4)检测CDPK基因是否成功表达的方法是______________________，若有杂交带出现，表明已产生了CDPK。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 3	抗除草剂转基因作物的推广可有效减轻除草劳动强度、提高农业生产效率。图1为抗除草剂转基因玉米的技术流程。 (1)构建含除草剂抗性基因的表达载体，传统的方法是目的基因通过限制酶和____________酶与载体进行重组。载体上目的基因插入位点的限制酶识别序列________(填“能”或“不能”)出现在目的基因内部，可通过________技术在目的基因两侧添加相应限制酶识别序列，以便构建表达载体。 (2)为了减少限制酶识别序列的影响，科研人员研发了新的DNA重组方法：无缝克隆技术(图2)，其中InFusion酶可以将任何具有相同15 bp末端序列的线性DNA分子进行连接，类似同源重组。 ①科研人员希望应用以上方法构建含有A和GUS基因的重组DNA分子，首先获得了3种DNA分子如图3，然后混合进行InFusion反应。如果引物2上额外添加的片段对应GUS基因中加粗的e片段，那么引物1和引物4上额外增加的片段分别对应载体中的片段________。完成重组反应后，将重组表达载体加入经过________处理的农杆菌中。 ②为筛选成功转入重组DNA分子的菌落，可以选取引物________扩增目的基因并电泳检测。请在图4中画出阳性菌落的电泳结果。 (3)农杆菌转化愈伤组织时，用含________的选择培养基筛选转化的愈伤组织。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织(假阳性)也可能在选择培养基上生长。已知报告基因GUS表达产物能催化无色物质K呈现蓝色，则排除假阳性的原理是：报告基因GUS在________细胞中表达，而在农杆菌中不表达，因此用无色物质K处理上述能正常生长的愈伤组织，假阳性的农杆菌________(填“出现”或“不出现”)蓝色。【第 12023 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)DNA连接　不能　PCR　(2)①a、d　Ca²⁺　②1和4 (3)除草剂　真核　不出现抗除草剂转基因作物的推广可有效减轻除草劳动强度、提高农业生产效率。图1为抗除草剂转基因玉米的技术流程。 (1)构建含除草剂抗性基因的表达载体，传统的方法是目的基因通过限制酶和____________酶与载体进行重组。载体上目的基因插入位点的限制酶识别序列________(填“能”或“不能”)出现在目的基因内部，可通过________技术在目的基因两侧添加相应限制酶识别序列，以便构建表达载体。 (2)为了减少限制酶识别序列的影响，科研人员研发了新的DNA重组方法：无缝克隆技术(图2)，其中InFusion酶可以将任何具有相同15 bp末端序列的线性DNA分子进行连接，类似同源重组。 ①科研人员希望应用以上方法构建含有A和GUS基因的重组DNA分子，首先获得了3种DNA分子如图3，然后混合进行InFusion反应。如果引物2上额外添加的片段对应GUS基因中加粗的e片段，那么引物1和引物4上额外增加的片段分别对应载体中的片段________。完成重组反应后，将重组表达载体加入经过________处理的农杆菌中。 ②为筛选成功转入重组DNA分子的菌落，可以选取引物________扩增目的基因并电泳检测。请在图4中画出阳性菌落的电泳结果。 (3)农杆菌转化愈伤组织时，用含________的选择培养基筛选转化的愈伤组织。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织(假阳性)也可能在选择培养基上生长。已知报告基因GUS表达产物能催化无色物质K呈现蓝色，则排除假阳性的原理是：报告基因GUS在________细胞中表达，而在农杆菌中不表达，因此用无色物质K处理上述能正常生长的愈伤组织，假阳性的农杆菌________(填“出现”或“不出现”)蓝色。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 4	铝在土壤中常以铝酸盐的形式存在，可造成土壤酸化而影响植物生长。铝能抑制植物根尖细胞的分裂，抑制根生长，破坏根组织。部分植物能通过根部细胞膜上的苹果酸通道蛋白（ALMT）将苹果酸转运到细胞外来缓解铝毒。可将 ALMT 基因导入植物细胞，来培育转基因耐铝植物，请回答下列问题：（1）可以从基因文库中获得 ALMT 基因，在合成 cDNA 的过程中，反应体系内加入的物质除 mRNA 和 ATP 外，还包括__________________、____________________________________。（2）可将 ALMT 基因插入农杆菌 Ti 质粒的__________________片段中，以便目的基因进入植物细胞。利用该方法导入的目的基因的遗传一般遵循孟德尔遗传定律，原因是____________________________________。（3）启动子是__________________特异性识别并结合的位点，能调控目的基因的表达。ALMT基因的启动子有两种类型，其中 α 启动子能使 ALMT 基因在酸性土壤的诱导下表达，β 启动子能使 ALMT 基因高效表达而无需酸性诱导。则在获得转 ALMT 基因耐铝植物时应使用___________启动子，不使用另外一种启动子的原因是______________________。【第 11367 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）四种脱氧核苷酸逆转录酶（2）T-DNA T-DNA 可携带目的基因，整合并转移到宿主细胞染色体的 DNA 上（3）RNA 聚合酶 α β 启动子可使植物根细胞持续转运苹果酸，导致正常土壤酸化，并影响植物自身的生长（3 分）铝在土壤中常以铝酸盐的形式存在，可造成土壤酸化而影响植物生长。铝能抑制植物根尖细胞的分裂，抑制根生长，破坏根组织。部分植物能通过根部细胞膜上的苹果酸通道蛋白（ALMT）将苹果酸转运到细胞外来缓解铝毒。可将 ALMT 基因导入植物细胞，来培育转基因耐铝植物，请回答下列问题：（1）可以从基因文库中获得 ALMT 基因，在合成 cDNA 的过程中，反应体系内加入的物质除 mRNA 和 ATP 外，还包括__________________、____________________________________。（2）可将 ALMT 基因插入农杆菌 Ti 质粒的__________________片段中，以便目的基因进入植物细胞。利用该方法导入的目的基因的遗传一般遵循孟德尔遗传定律，原因是____________________________________。（3）启动子是__________________特异性识别并结合的位点，能调控目的基因的表达。ALMT基因的启动子有两种类型，其中 α 启动子能使 ALMT 基因在酸性土壤的诱导下表达，β 启动子能使 ALMT 基因高效表达而无需酸性诱导。则在获得转 ALMT 基因耐铝植物时应使用___________启动子，不使用另外一种启动子的原因是______________________。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 5	转基因抗病香蕉的培育过程如图甲所示，图乙表示PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：（1）质粒的化学本质是______________________________ 。（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即______________________________；将目的基因导入受体细胞的方法是_____________________________________________ （3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是_______________，图中一令质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为_______________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：_____________________________________________。（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异? _______________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有______________________________基因作为标记基因。【第 11320 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)DNA（1分) (2)基因表达载体的构建农杆菌转化法 (3) PstⅠ和EcoRⅠ 3个和4 如图： (4)否抗卡那霉素转基因抗病香蕉的培育过程如图甲所示，图乙表示PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：（1）质粒的化学本质是______________________________ 。（2）利用基因工程培育转基因抗病香蕉的核心步骤是形成重组质粒，即______________________________；将目的基因导入受体细胞的方法是_____________________________________________ （3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是_______________，图中一令质粒被限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EeoRⅠ同时切割后得到的DNA片段和黏性末端分别为_______________个。请写出单独用ApaⅠ切割质粒后的片段：_____________________________________________。（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了染色体（数目）的变异? _______________。卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含卡那霉素的培养基筛选已导入重组质粒的香蕉细胞。由此推断，重组质粒中应含有______________________________基因作为标记基因。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 6	在HIV侵染免疫细胞的过程中，细胞表面的CCR5蛋白是病毒的一个识别位点，协助介导了H进入细胞的过程。自然情况下，CCR5基因可缺失32个碱基对，成为它的等位基因(称为CCR5△32基因)，如果一个人是CCR5△32基因的纯合子，那么他的免疫细胞表面没有完整的CCR5蛋白可用，就不易被HIV感染。2018年底，贺建奎团队声称通过 CRISPR/Cas9技术对数个胚胎进行了基因编辑，被编辑的婴儿的所有细胞不能合成完整的CCR5蛋白，从而天生免疫艾滋病。请回答：（1）CCR5基因的表达需要___________等不可缺少的调控组件，CCR5△32基因指导合成的肽链氨基酸数目减少，原因可能是mRNA______________________。（2）如图所示，CRISPR/Cas9是一种新型的基因组定点编辑系统，根据CCR5基因的序列设计sgRNA（向导RNA)，该sgRNA的序列与CCR5基因部分序列互补配对诱导Cas9n蛋白结合于基因的特异性位点并切割，使CCR5基因发生碱基对的___________，导致基因突变。该过程中，sgRNA和Cas9n对DNA的共同作用类似___________酶的作用。（3）为验证胚胎的CCR5基因是否成功被编辑，需要在胚胎发育早期，将细胞的微量全基因组DNA用___________技术进行扩增，然后采用___________技术检测目的基因以及转录出的mRNA是否存在，还需要对___________蛋白进行检测。（4）贺建奎团队的行为遭到了科学界的强烈谴责，因为_____________________________(写出两点)。【第 11307 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）启动子、终止子变短（终止密码提前出现）（2）缺失（1分）限制（1分）（3） PCR 分子杂交 CCR5 （4）无法证实被编辑个体是否能免疫H1V；可能被编辑个体受其他疾病感染的风险提高；可能被编辑个体的其他基因被破坏在HIV侵染免疫细胞的过程中，细胞表面的CCR5蛋白是病毒的一个识别位点，协助介导了H进入细胞的过程。自然情况下，CCR5基因可缺失32个碱基对，成为它的等位基因(称为CCR5△32基因)，如果一个人是CCR5△32基因的纯合子，那么他的免疫细胞表面没有完整的CCR5蛋白可用，就不易被HIV感染。2018年底，贺建奎团队声称通过 CRISPR/Cas9技术对数个胚胎进行了基因编辑，被编辑的婴儿的所有细胞不能合成完整的CCR5蛋白，从而天生免疫艾滋病。请回答：（1）CCR5基因的表达需要___________等不可缺少的调控组件，CCR5△32基因指导合成的肽链氨基酸数目减少，原因可能是mRNA______________________。（2）如图所示，CRISPR/Cas9是一种新型的基因组定点编辑系统，根据CCR5基因的序列设计sgRNA（向导RNA)，该sgRNA的序列与CCR5基因部分序列互补配对诱导Cas9n蛋白结合于基因的特异性位点并切割，使CCR5基因发生碱基对的___________，导致基因突变。该过程中，sgRNA和Cas9n对DNA的共同作用类似___________酶的作用。（3）为验证胚胎的CCR5基因是否成功被编辑，需要在胚胎发育早期，将细胞的微量全基因组DNA用___________技术进行扩增，然后采用___________技术检测目的基因以及转录出的mRNA是否存在，还需要对___________蛋白进行检测。（4）贺建奎团队的行为遭到了科学界的强烈谴责，因为_____________________________(写出两点)。

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【试题】 7	科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因，利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中，进而培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题：（1）据图分析可知，在构建的耐盐基因表达载体中，图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子、____________________，其中启动子的功能是________________________________________。（2）据图分析可知，在构建耐盐基因表达载体时，需要用____________________对质粒进行切割，从而保证____________________________________________________________。（3）常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞，根据农杆菌的感染特点，将耐盐基因插入Ti质粒的_________________________上，经过转化作用进入水稻细胞，并将其插入_______________________上，从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。（4）检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是____________________。【第 11249 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】 (1)标记基因和终止子(2分)【说明：答全给2分】作为RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动目的基因转录(2分)【说明：答对l点给1分】 (2)HindⅢ、XbaⅠ(2分)【说明：答全给2分】耐盐基因与质粒正确连接(2分) (3)T-DNA【补充：可转移DNA】(2分) 水稻细胞染色体的DNA(2分) (4)将其种植在盐碱地上【补充：用一定浓度的盐水浇灌】(3分) 科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因，利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中，进而培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题：（1）据图分析可知，在构建的耐盐基因表达载体中，图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子、____________________，其中启动子的功能是________________________________________。（2）据图分析可知，在构建耐盐基因表达载体时，需要用____________________对质粒进行切割，从而保证____________________________________________________________。（3）常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞，根据农杆菌的感染特点，将耐盐基因插入Ti质粒的_________________________上，经过转化作用进入水稻细胞，并将其插入_______________________上，从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。（4）检测转基因水稻是否培育成功可使用的最简便的方法是____________________。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 8	乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的影响奶牛养殖业的两种疾病。科学家利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)的双转基因奶牛新品种。下图为基因表达载体，回答下列问题： (1)乳铁蛋白肽基因和质粒连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是______________________________ 。乳铁蛋白肽基因只在转基因奶牛的乳腺细胞表达，人干扰素基因除了可在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，还可在转基因奶牛的其他组织细胞中表达，这与构建表达载体时______________________________ 的选择有关。 (2)牛胎儿成纤维细胞可作为受体细胞，将乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因导人牛胎儿成纤维细胞后，将该细胞注入______________________________细胞，通过电刺激使______________________________，构建重组胚胎。 (3)重组胚胎经过胚胎的早期培养后，移人代孕母牛体内，生出转基因犊牛。重组胚胎早期培养过程中，培养液的成分除一些有机盐和无机盐外，还需要添加_________________________________________ (答出四点)，以及血清等物质。当胚胎发育到_______________，可移植到代孕母牛体内。 (4)若获得的转基因奶牛(人干扰素基因已经整合到奶牛的基因组中)仍感染口蹄疫，根据中心法则分析，可能的原因是_____________________________________________ 。【第 11175 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】 (1)磷酸二酯键启动子 (2)去核卵母供体细胞核和去核卵母细胞融合 (3)维生素、激索、氨基酸、核苷酸等桑椹胚或囊胚 (4)人干扰素基因的转录或翻译异常(3分) 乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的影响奶牛养殖业的两种疾病。科学家利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)的双转基因奶牛新品种。下图为基因表达载体，回答下列问题： (1)乳铁蛋白肽基因和质粒连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是______________________________ 。乳铁蛋白肽基因只在转基因奶牛的乳腺细胞表达，人干扰素基因除了可在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，还可在转基因奶牛的其他组织细胞中表达，这与构建表达载体时______________________________ 的选择有关。 (2)牛胎儿成纤维细胞可作为受体细胞，将乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因导人牛胎儿成纤维细胞后，将该细胞注入______________________________细胞，通过电刺激使______________________________，构建重组胚胎。 (3)重组胚胎经过胚胎的早期培养后，移人代孕母牛体内，生出转基因犊牛。重组胚胎早期培养过程中，培养液的成分除一些有机盐和无机盐外，还需要添加_________________________________________ (答出四点)，以及血清等物质。当胚胎发育到_______________，可移植到代孕母牛体内。 (4)若获得的转基因奶牛(人干扰素基因已经整合到奶牛的基因组中)仍感染口蹄疫，根据中心法则分析，可能的原因是_____________________________________________ 。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 9	为使玉米获得抗除草剂性状，需进行如图所示操作。报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。（1）从基因文库中获得的除草剂抗性基因G可用__________技术进行扩增；构建含有除草剂抗性基因G（目的基因）的基因表达载体时，需要的工具酶有_______________。为使除草剂抗性基因G在农杆菌中高效表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的____________之间（2）图中筛选1时需要在培养基中加入________以筛选成功导入表达载体的农杆菌；图中筛选2时需要___________________以筛选出呈现蓝色的组织。（3）将幼胚诱导培育成愈伤组织的过程中，需要在培养基中加入________以调控发育方向。为从个体水平上检测图中A玉米植株是否具有抗除草剂性状，可采用的方法是________________。【第 10779 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）PCR 限制酶和 DNA 连接酶启动子和终止子（2）氨苄青霉素用无色物质 K 处理愈伤组织（3 分）（3）植物激素用相应除草剂喷洒待测玉米植株为使玉米获得抗除草剂性状，需进行如图所示操作。报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。（1）从基因文库中获得的除草剂抗性基因G可用__________技术进行扩增；构建含有除草剂抗性基因G（目的基因）的基因表达载体时，需要的工具酶有_______________。为使除草剂抗性基因G在农杆菌中高效表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的____________之间（2）图中筛选1时需要在培养基中加入________以筛选成功导入表达载体的农杆菌；图中筛选2时需要___________________以筛选出呈现蓝色的组织。（3）将幼胚诱导培育成愈伤组织的过程中，需要在培养基中加入________以调控发育方向。为从个体水平上检测图中A玉米植株是否具有抗除草剂性状，可采用的方法是________________。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 10	通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术可使羊奶中含有人体蛋白质，下图表示这一技术的基本过程，在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G↓GATCC—，请回答下面的问题。 (1)从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是________________，人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中需要的酶是________。 (2)请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图。－G↓GATC C—―→ (3)人体蛋白质基因之所以能连接到羊的染色体DNA中，原因是_____________，人体蛋白质基因导入羊细胞时常用的工具是________。 (4)此过程中目的基因的检测与表达中的表达是指________________。 (5)你认为此类羊产的奶安全可靠吗？理由是什么？ _______________________________。【第 10621 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)限制性核酸内切酶　DNA连接酶 (2) (3)具有相同的物质基础和结构基础(有互补的碱基序列)　细菌质粒或动物病毒　(4)人体蛋白质基因在羊体细胞内控制合成人体蛋白质　(5)安全。因目的基因导入受体细胞后，控制合成的人奶蛋白质成分没有改变(或不安全，因目的基因导入受体细胞后，可能由于羊细胞中某些成分的影响，合成的蛋白质成分可能发生一定的改变) 通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术可使羊奶中含有人体蛋白质，下图表示这一技术的基本过程，在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G↓GATCC—，请回答下面的问题。 (1)从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是________________，人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中需要的酶是________。 (2)请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图。－G↓GATC C—―→ (3)人体蛋白质基因之所以能连接到羊的染色体DNA中，原因是_____________，人体蛋白质基因导入羊细胞时常用的工具是________。 (4)此过程中目的基因的检测与表达中的表达是指________________。 (5)你认为此类羊产的奶安全可靠吗？理由是什么？ _______________________________。

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