| 题型：多选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | |  |
| 【试题】 591 | 水蛭素是一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质。若用赖氨酸（密码子为AAA、AAG）替换水蛭素第47位的天冬酰胺（密码子为AAC、AAU）后可以提高它的抗凝血活性。某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水蛭素基因的第47位点引入特定突变后（原理见图），合成了大量抗凝血活性增强的水蛭素。下列相关叙述正确的是
A．若原基因拟突变位点的碱基对为A-T，则让其突变为T-A后即能达到目的
B．除图示物质外，过程②、③和⑤还需提供含Mg2+的缓冲液、热稳定性DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸
C．过程②和③可在同一反应容器内同时进行，过程⑤的引物可使用引物1和引物4
D．突变后的水蛭素基因需要与载体结合，并将其导入受体细胞内进行表达，才能获得相应的蛋白质产品  【第 12032 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
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水蛭素是一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质。若用赖氨酸（密码子为AAA、AAG）替换水蛭素第47位的天冬酰胺（密码子为AAC、AAU）后可以提高它的抗凝血活性。某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水蛭素基因的第47位点引入特定突变后（原理见图），合成了大量抗凝血活性增强的水蛭素。下列相关叙述正确的是
A．若原基因拟突变位点的碱基对为A-T，则让其突变为T-A后即能达到目的
B．除图示物质外，过程②、③和⑤还需提供含Mg2+的缓冲液、热稳定性DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸
C．过程②和③可在同一反应容器内同时进行，过程⑤的引物可使用引物1和引物4
D．突变后的水蛭素基因需要与载体结合，并将其导入受体细胞内进行表达，才能获得相应的蛋白质产品
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| 题型：多选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | |
| 【试题】 592 | 亚洲棉的突变型光籽和野生型毛籽是-对相对性状，研究发现，亚洲棉某突变体的光籽表型与8号染色体的~880kb至~903kb区间相关，研究人员根据野生型毛籽棉的该区间设计连续的重叠引物进行PCR，产物扩增结果如图所示，下列说法正确的是
A．应提取该突变体和野生型亚洲棉的全部染色体DNA进行PCR
B．上图中PCR产物的鉴定是通过琼脂糖凝胶电泳来进行的
C．据图分析可知，分子量较大的扩增产物与点样处的距离较小
D．该突变体出现的根本原因是第6对引物对应区间发生了基因突变 【第 12031 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
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亚洲棉的突变型光籽和野生型毛籽是-对相对性状，研究发现，亚洲棉某突变体的光籽表型与8号染色体的~880kb至~903kb区间相关，研究人员根据野生型毛籽棉的该区间设计连续的重叠引物进行PCR，产物扩增结果如图所示，下列说法正确的是
A．应提取该突变体和野生型亚洲棉的全部染色体DNA进行PCR
B．上图中PCR产物的鉴定是通过琼脂糖凝胶电泳来进行的
C．据图分析可知，分子量较大的扩增产物与点样处的距离较小
D．该突变体出现的根本原因是第6对引物对应区间发生了基因突变
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| 题型：多选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | |
| 【试题】 593 | 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DM片段结构示意图，其中14表示A上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述错误的是
A．若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏2个磷酸二酯键
B．若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置
C．若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化
D．在PCR扩增仪中根据选定的引物至少需经过7次循环才可获得32个两条链等长的目的基因片段 【第 12030 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
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蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DM片段结构示意图，其中14表示A上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述错误的是
A．若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏2个磷酸二酯键
B．若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置
C．若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化
D．在PCR扩增仪中根据选定的引物至少需经过7次循环才可获得32个两条链等长的目的基因片段
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| 题型：多选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | |
| 【试题】 594 | IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷（SCID）患儿的IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C．为研究该患儿发病机制，研究人员应用大引物PCR定点诱变技术获得突变基因，如图所示。下列说法正确的是
A．PCR1中使用的引物有引物A、引物C
B．PCR2中使用的引物有引物B、大引物a
C．PCR1过程需要扩增3轮才能获得目标产物
D．PCR2过程中，为减少错误DNA片段的产生可适当升高复性温度 【第 12029 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
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IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷（SCID）患儿的IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C．为研究该患儿发病机制，研究人员应用大引物PCR定点诱变技术获得突变基因，如图所示。下列说法正确的是
A．PCR1中使用的引物有引物A、引物C
B．PCR2中使用的引物有引物B、大引物a
C．PCR1过程需要扩增3轮才能获得目标产物
D．PCR2过程中，为减少错误DNA片段的产生可适当升高复性温度
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| 题型：多选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | |
| 【试题】 595 | 重叠延伸PCR技术是设计含突变点的互补核苷酸片段作为引物，在PCR过程中，互补的核苷酸片段形成重叠，重叠的部分互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得突变基因的方法。科研人员将枯草芽孢杆菌的甘油激酶的第270位氨基酸M突变为1，构建出了对甘油高效利用的枯草芽孢杆菌。下列说法正确的是
A．通过PCR1获得产物AB需要进行2轮PCR扩增
B．无法通过AB下链和CD上链获得突变产物AD
C．在同一反应体系中加入四种引物可以同时获得大量产物AB和CD
D．获取目的基因后，构建质粒载体，形成基因表达载体。基因表达载体上保证其能在宿主细胞中扩增的结构是复制原点，保证目的基因能正常转录的结构是启动子和终止子 【第 12028 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
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重叠延伸PCR技术是设计含突变点的互补核苷酸片段作为引物，在PCR过程中，互补的核苷酸片段形成重叠，重叠的部分互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得突变基因的方法。科研人员将枯草芽孢杆菌的甘油激酶的第270位氨基酸M突变为1，构建出了对甘油高效利用的枯草芽孢杆菌。下列说法正确的是
A．通过PCR1获得产物AB需要进行2轮PCR扩增
B．无法通过AB下链和CD上链获得突变产物AD
C．在同一反应体系中加入四种引物可以同时获得大量产物AB和CD
D．获取目的基因后，构建质粒载体，形成基因表达载体。基因表达载体上保证其能在宿主细胞中扩增的结构是复制原点，保证目的基因能正常转录的结构是启动子和终止子
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| 题型：单选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 微生物的培养技术与.. | | | |
| 【试题】 596 | 下图表示细菌细胞中氨基酸在酶的作用下产生另一种氨基酸的代谢过程，1～6代表不同的氨基酸，V～Z代表不同的酶，所有氨基酸对生命活动都是必需的。某种细菌的原始种只要培养基中有氨基酸1就能正常生长，而该细菌的变异种只有在培养基中有氨基酸1、2、5时才能正常生长，则该变异种中不存在的酶是
A. V、W B. W、Y
C. Y、Z D. V、Z
【第 12027 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 微生物的培养技术与应用
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
下图表示细菌细胞中氨基酸在酶的作用下产生另一种氨基酸的代谢过程，1～6代表不同的氨基酸，V～Z代表不同的酶，所有氨基酸对生命活动都是必需的。某种细菌的原始种只要培养基中有氨基酸1就能正常生长，而该细菌的变异种只有在培养基中有氨基酸1、2、5时才能正常生长，则该变异种中不存在的酶是
A. V、W B. W、Y
C. Y、Z D. V、Z
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| 题型：单选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 微生物的培养技术与.. | | | |
| 【试题】 597 | 在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出
A. 大肠杆菌、固氮细菌、放线菌
B. 霉菌、固氮细菌、放线菌
C. 酵母菌、硝化细菌、醋酸菌
D. 固氮细菌、酵母菌、放线菌
【第 12026 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 微生物的培养技术与应用
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出
A. 大肠杆菌、固氮细菌、放线菌
B. 霉菌、固氮细菌、放线菌
C. 酵母菌、硝化细菌、醋酸菌
D. 固氮细菌、酵母菌、放线菌
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| 题型：单选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 微生物的培养技术与.. | | | |
| 【试题】 598 |
不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是
A. 氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B. 碳源物质也为该微生物提供能量
C. 无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D. 水是该微生物的营养要素之一
【第 12025 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 微生物的培养技术与应用
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是
A. 氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B. 碳源物质也为该微生物提供能量
C. 无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D. 水是该微生物的营养要素之一
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| 题型：单选题 难度值：1 [0] 知识点：第3节 发酵工程及其应用 | | | |
| 【试题】 599 | 微生物发酵已经广泛应用于人类生活的各个领域。下列叙述错误的是
A. 根据发酵条件要求，微生物发酵过程分为有氧发酵和厌氧发酵
B. 谷氨酸棒状杆菌是好氧细菌，可用于发酵生产谷氨酸制取味精
C. 当缺少糖源和氧气时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
D. 乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸，可用于制作酸奶和泡菜
【第 12024 题】 【题型】：单选题 【章节】：第3节 发酵工程及其应用
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
微生物发酵已经广泛应用于人类生活的各个领域。下列叙述错误的是
A. 根据发酵条件要求，微生物发酵过程分为有氧发酵和厌氧发酵
B. 谷氨酸棒状杆菌是好氧细菌，可用于发酵生产谷氨酸制取味精
C. 当缺少糖源和氧气时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
D. 乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸，可用于制作酸奶和泡菜
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| 题型：简答题 难度值：1 [0] 知识点：第3节 基因工程的应用 | | | |
| 【试题】 600 | 抗除草剂转基因作物的推广可有效减轻除草劳动强度、提高农业生产效率。图1为抗除草剂转基因玉米的技术流程。
(1)构建含除草剂抗性基因的表达载体，传统的方法是目的基因通过限制酶和____________酶与载体进行重组。载体上目的基因插入位点的限制酶识别序列________(填“能”或“不能”)出现在目的基因内部，可通过________技术在目的基因两侧添加相应限制酶识别序列，以便构建表达载体。
(2)为了减少限制酶识别序列的影响，科研人员研发了新的DNA重组方法：无缝克隆技术(图2)，其中InFusion酶可以将任何具有相同15 bp末端序列的线性DNA分子进行连接，类似同源重组。
①科研人员希望应用以上方法构建含有A和GUS基因的重组DNA分子，首先获得了3种DNA分子如图3，然后混合进行InFusion反应。
如果引物2上额外添加的片段对应GUS基因中加粗的e片段，那么引物1和引物4上额外增加的片段分别对应载体中的片段________。完成重组反应后，将重组表达载体加入经过________处理的农杆菌中。
②为筛选成功转入重组DNA分子的菌落，可以选取引物________扩增目的基因并电泳检测。请在图4中画出阳性菌落的电泳结果。
(3)农杆菌转化愈伤组织时，用含________的选择培养基筛选转化的愈伤组织。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织(假阳性)也可能在选择培养基上生长。已知报告基因GUS表达产物能催化无色物质K呈现蓝色，则排除假阳性的原理是：报告基因GUS在________细胞中表达，而在农杆菌中不表达，因此用无色物质K处理上述能正常生长的愈伤组织，假阳性的农杆菌________(填“出现”或“不出现”)蓝色。 【第 12023 题】 【题型】：简答题 【章节】：第3节 基因工程的应用
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
【参考答案】(1)DNA连接 不能 PCR (2)①a、d Ca2+ ②1和4
(3)除草剂 真核 不出现 抗除草剂转基因作物的推广可有效减轻除草劳动强度、提高农业生产效率。图1为抗除草剂转基因玉米的技术流程。
(1)构建含除草剂抗性基因的表达载体，传统的方法是目的基因通过限制酶和____________酶与载体进行重组。载体上目的基因插入位点的限制酶识别序列________(填“能”或“不能”)出现在目的基因内部，可通过________技术在目的基因两侧添加相应限制酶识别序列，以便构建表达载体。
(2)为了减少限制酶识别序列的影响，科研人员研发了新的DNA重组方法：无缝克隆技术(图2)，其中InFusion酶可以将任何具有相同15 bp末端序列的线性DNA分子进行连接，类似同源重组。
①科研人员希望应用以上方法构建含有A和GUS基因的重组DNA分子，首先获得了3种DNA分子如图3，然后混合进行InFusion反应。
如果引物2上额外添加的片段对应GUS基因中加粗的e片段，那么引物1和引物4上额外增加的片段分别对应载体中的片段________。完成重组反应后，将重组表达载体加入经过________处理的农杆菌中。
②为筛选成功转入重组DNA分子的菌落，可以选取引物________扩增目的基因并电泳检测。请在图4中画出阳性菌落的电泳结果。
(3)农杆菌转化愈伤组织时，用含________的选择培养基筛选转化的愈伤组织。转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织(假阳性)也可能在选择培养基上生长。已知报告基因GUS表达产物能催化无色物质K呈现蓝色，则排除假阳性的原理是：报告基因GUS在________细胞中表达，而在农杆菌中不表达，因此用无色物质K处理上述能正常生长的愈伤组织，假阳性的农杆菌________(填“出现”或“不出现”)蓝色。 |
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