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	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 11	例3口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防，疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因细菌来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示。请据图回答。 (1)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，①过程用____________的方法合成DNA，再用限制酶将VP1基因片段切下。 (2)②过程一般使用同一种限制酶切割目的基因和质粒，再用____________将两者连接成重组质粒，若只考虑两个DNA相连，②过程会得到________种连接产物。故③过程之后需要进一步筛选。 (3)③过程之后，应先将细菌分别培养在含______________的培养基中，未形成菌落的即为______________的细菌，然后从长出菌落的培养基中分别挑取少量菌种接种到多个含____________的培养基中，培养基________(填“有”或“无”)菌落产生即为导入了重组质粒的目的菌。 (4)导入重组质粒的目的菌是否成功表达，还需用____________法进行检测。【第 10377 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)反转录　(2)DNA连接酶　3　(3)四环素　未导入质粒　氨苄青霉素　无　(4)抗原抗体杂交例3口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防，疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因细菌来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示。请据图回答。 (1)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，①过程用____________的方法合成DNA，再用限制酶将VP1基因片段切下。 (2)②过程一般使用同一种限制酶切割目的基因和质粒，再用____________将两者连接成重组质粒，若只考虑两个DNA相连，②过程会得到________种连接产物。故③过程之后需要进一步筛选。 (3)③过程之后，应先将细菌分别培养在含______________的培养基中，未形成菌落的即为______________的细菌，然后从长出菌落的培养基中分别挑取少量菌种接种到多个含____________的培养基中，培养基________(填“有”或“无”)菌落产生即为导入了重组质粒的目的菌。 (4)导入重组质粒的目的菌是否成功表达，还需用____________法进行检测。

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【试题】 12	番茄果实中含丰富的番茄红素，对人体防治肿瘤、心血管疾病以及延缓衰老具有一定作用。 (1)科学家为构建高产番茄红素的酵母细胞应用了转基因技术，其核心步骤是______________________________。如下图所示其部分模式图，位点1、2、3、4对应的限制酶分别是PacⅠ、SexAⅠ、AscⅠ、 PmeⅠ，则获取目的基因使用的限制酶是____________________；PacⅠ能否切割位点2？__________________；原因是_________________。 (2)为确定目的基因已导入番茄细胞中，常用__________________技术进行检测，最后再进行个体水平的鉴定。 (3)科学家运用__________________技术培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株，但并没有获得预期的性状，主要原因是__________________。 (4)转基因技术和植物体细胞杂交技术在育种上具有的共同意义是__________________________。【第 10376 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)构建基因表达载体(目的基因与运载体结合)　 SexA Ⅰ和Asc Ⅰ　不能　因为限制酶具有特异性(合理即可) (2)DNA分子杂交 (3)植物体细胞杂交　基因的表达不是孤立的，是相互调控、相互影响的(合理即可) (4)能克服物种间远缘杂交不亲和的障碍(合理即可) 番茄果实中含丰富的番茄红素，对人体防治肿瘤、心血管疾病以及延缓衰老具有一定作用。 (1)科学家为构建高产番茄红素的酵母细胞应用了转基因技术，其核心步骤是______________________________。如下图所示其部分模式图，位点1、2、3、4对应的限制酶分别是PacⅠ、SexAⅠ、AscⅠ、 PmeⅠ，则获取目的基因使用的限制酶是____________________；PacⅠ能否切割位点2？__________________；原因是_________________。 (2)为确定目的基因已导入番茄细胞中，常用__________________技术进行检测，最后再进行个体水平的鉴定。 (3)科学家运用__________________技术培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株，但并没有获得预期的性状，主要原因是__________________。 (4)转基因技术和植物体细胞杂交技术在育种上具有的共同意义是__________________________。

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【试题】 13	为增加油菜种子的含油量，科研人员将转运肽基因与酶D基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。 (1)研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因，该技术是利用________的原理，使相应基因呈指数增加。所含三种限制酶(XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ)的切点如图所示，则用________和________酶处理两个基因后，可得到两基因相连的融合基因。 (2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的________中，构建基因表达载体并导入农杆菌中。为了获得含融合基因的单菌落，应进行的操作是__________________________，然后再利用液体培养基将该单菌落振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。 (3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是________________________________；进一步筛选后获得转基因油菜细胞，依据________________原理，可将其培育成转基因油菜植株。 (4)用________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。【第 10375 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)DNA双链复制　ClaⅠ　 DNA连接 (2)T－DNA　将获得的农杆菌接种在含四环素的固体培养基上培养 (3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞植物细胞具有全能性 (4)抗原—抗体杂交为增加油菜种子的含油量，科研人员将转运肽基因与酶D基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。 (1)研究人员采用PCR技术获取酶D基因和转运肽基因，该技术是利用________的原理，使相应基因呈指数增加。所含三种限制酶(XbaⅠ、ClaⅠ、SacⅠ)的切点如图所示，则用________和________酶处理两个基因后，可得到两基因相连的融合基因。 (2)将上述融合基因插入上图所示Ti质粒的________中，构建基因表达载体并导入农杆菌中。为了获得含融合基因的单菌落，应进行的操作是__________________________，然后再利用液体培养基将该单菌落振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。 (3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是________________________________；进一步筛选后获得转基因油菜细胞，依据________________原理，可将其培育成转基因油菜植株。 (4)用________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。

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【试题】 14	下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答： (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。 (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。 A．启动子 B．tet^R C．复制原点 D．amp^R (3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。 A．农杆菌转化 B．大肠杆菌转化 C．显微注射 D．细胞融合 (4)过程②采用的生物技术是________________。 (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。 (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。 A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．抗原—抗体杂交 D．PCR 【第 9355 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)HindⅢ和BamHⅠ　氨苄青霉素　(2)A　(3)C　(4)胚胎移植技术　(5)全能　(6)C 下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答： (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。 (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。 A．启动子 B．tet^R C．复制原点 D．amp^R (3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。 A．农杆菌转化 B．大肠杆菌转化 C．显微注射 D．细胞融合 (4)过程②采用的生物技术是________________。 (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。 (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。 A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．抗原—抗体杂交 D．PCR

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【试题】 15	下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答： (1)在基因工程中，A表示________，如果直接从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点是________________________，B表示________。 (2)B→D的过程中，若使用的棉花受体细胞为体细胞，⑤表示的生物技术是________。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：______________________________________________。【第 9252 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】 (1)目的基因　能够识别特定的脱氧核苷酸序列　重组DNA　 (2)植物组织培养　让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定转基因棉花是否具有抗虫性状下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答： (1)在基因工程中，A表示________，如果直接从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点是________________________，B表示________。 (2)B→D的过程中，若使用的棉花受体细胞为体细胞，⑤表示的生物技术是________。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：______________________________________________。

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【试题】 16	赖氨酸是人体八大必需氨基酸之一，能促进人体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用。某农科所科技人员欲通过将玉米某种蛋白酶改造成“M酶”，从而大大提高玉米种子中赖氨酸的含量，以期待培育出高赖氨酸玉米新品种。请回答下列问题： (1)科技人员先从“提升玉米种子中赖氨酸含量”这一功能出发，预期构建___________________________的结构，再推测出相对应目的基因的__________________序列，最终合成出“M酶”基因。 (2)科技人员获得“M酶”基因后，常利用__________________技术在体外将其大量扩增，此过程需要一种特殊的酶是___________________________。 (3)“M酶”基因只有插入___________________________，才能确保“M酶”基因在玉米细胞中得以稳定遗传。科技人员将“M酶”基因导人玉米细胞中需要借助__________________的运输。 (4)依据___________________________原理，可将含有“M酶”基因的玉米细胞培育成转“M酶”基因的玉米植株。为了确保育种成功，科技人员需要通过___________________________，从个体水平加以鉴定。【第 8922 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)“M酶”(1分) 脱氧核苷酸 (2)PCR Toq酶(或“热稳定DNA聚合酶”) (3)玉米细胞的染色体DNA中 (基因表达)载体 (4)植物细胞具有全能性测定玉米种子中赖氨酸含量赖氨酸是人体八大必需氨基酸之一，能促进人体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用。某农科所科技人员欲通过将玉米某种蛋白酶改造成“M酶”，从而大大提高玉米种子中赖氨酸的含量，以期待培育出高赖氨酸玉米新品种。请回答下列问题： (1)科技人员先从“提升玉米种子中赖氨酸含量”这一功能出发，预期构建___________________________的结构，再推测出相对应目的基因的__________________序列，最终合成出“M酶”基因。 (2)科技人员获得“M酶”基因后，常利用__________________技术在体外将其大量扩增，此过程需要一种特殊的酶是___________________________。 (3)“M酶”基因只有插入___________________________，才能确保“M酶”基因在玉米细胞中得以稳定遗传。科技人员将“M酶”基因导人玉米细胞中需要借助__________________的运输。 (4)依据___________________________原理，可将含有“M酶”基因的玉米细胞培育成转“M酶”基因的玉米植株。为了确保育种成功，科技人员需要通过___________________________，从个体水平加以鉴定。

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【试题】 17	如图是“万能细胞”的诞生过程(图中来自胚胎干细胞的OCT4、SOX2、NANOG和LIN28等基因决定细胞“全能性”)。请据图回答下列问题： (1)该研究过程用到了______________、______________等现代生物技术手段。 (2)图中由皮肤细胞到“万能细胞”的“改造”类似于植物组织培养技术中的__________过程。 (3)图中病毒的作用是_____________________________________________________。为方便筛选，在重组病毒中除了插入的目的基因外，还应有__________基因。【第 6992 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)基因工程(DNA重组技术)　动物细胞培养 (2)脱分化　(3)作为载体　标记如图是“万能细胞”的诞生过程(图中来自胚胎干细胞的OCT4、SOX2、NANOG和LIN28等基因决定细胞“全能性”)。请据图回答下列问题： (1)该研究过程用到了______________、______________等现代生物技术手段。 (2)图中由皮肤细胞到“万能细胞”的“改造”类似于植物组织培养技术中的__________过程。 (3)图中病毒的作用是_____________________________________________________。为方便筛选，在重组病毒中除了插入的目的基因外，还应有__________基因。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 18	GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答： (1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是____________________。 (2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的________限制酶进行酶切。 (3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。 (4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行________培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。【第 6991 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)使细胞分散开　(2)XhoⅠ　(3)②　(4)抗体　传代 GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答： (1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是____________________。 (2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的________限制酶进行酶切。 (3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。 (4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行________培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 19	将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示(注：农杆菌中Ti质粒上只有TDNA片段能转移到植物细胞中)。 (1)过程①需用同种__________________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用________培养基。 (2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让________进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是_____________________ ________________________________________________________________________。 (3)若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加__________________以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是_____________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是__________________。种植转基因抗虫棉能减少________的使用，以减轻环境污染。【第 6990 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)限制性核酸内切(限制)　选择 (2)T-DNA　筛选出获得T-DNA片段的植物细胞 (3)细胞分裂素浓度　芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化 (4)投放棉铃虫　农药将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示(注：农杆菌中Ti质粒上只有TDNA片段能转移到植物细胞中)。 (1)过程①需用同种__________________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用________培养基。 (2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让________进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是_____________________ ________________________________________________________________________。 (3)若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加__________________以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是_____________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是__________________。种植转基因抗虫棉能减少________的使用，以减轻环境污染。

	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第3节基因工程的应用
【试题】 20	为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图：(Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达) 请回答问题： (1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，________(填“需要”或“不需要”)启动子。 (2)步骤②中，用Ca^2＋处理大肠杆菌，使之成为___________________________________ 细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有__________基因。 (3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断________(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。 (4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与______________________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。【第 6986 题】【题型】：简答题【章节】：第3节基因工程的应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)需要　(2)感受态　Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性)　(3)白色　(4)SHH基因转录的mRNA 为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图：(Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达) 请回答问题： (1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，________(填“需要”或“不需要”)启动子。 (2)步骤②中，用Ca^2＋处理大肠杆菌，使之成为___________________________________ 细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有__________基因。 (3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断________(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。 (4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与______________________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。

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