| 用户登录 |
电子邮件：0745001@163.COM即时通讯：QQ-164247110联系地址：洪江市芙蓉中学
|
| 考试练习 |
|
| 在线练习 在线考试 |
|
| 手工出卷 收藏试题 |
|
| 综合搜索 |
|
|
章节导航 |
|
|
|
|
| 单选题 多选题 |
|
| 判断题 简答题 |
|
|
| 题型：简答题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | |  | | 【试题】 11 |
基因工程的关键步骤是基因表达载体的构建，人类γ基因启动子及其上游的调控序列中存在着BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。为了确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置，科研人员用PCR技术扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，相关信息如图所示。请回答下列问题：
(1)为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达,需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知,在F1~F7末端添加的序列所对应的限制酶是___________，在R末端添加的序列所对应的限制酶是_________。本实验中,从产物扩增到载体构建
完成的整个过程共需要________种酶。
(2)将构建的载体导人除去BCL11A基因的受体细胞,成功转化后,含F1~F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白,受体细胞有荧光,含
F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是______________________。
(3)向培养液中添加适量的雌激素,含F1~F4与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含F5~F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光
若y基因上游调控序列上与引物序列所对应的位置不含有BCL11A蛋白的结合位点序列，据此结果可推测,BCL11A蛋白结合位点位于____________________,理由是___________________________________________。
 【第 12534 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
【参考答案】(1)Sal EcoRI 6
(2)F7与R扩增产物不含完整的启动子,荧光蛋白基因不表达。
(3)F4与F5之间 F1－F4与R均有，故在F4的下游，而F5之后没有荧光，故在F5上游，所以在二者之间
基因工程的关键步骤是基因表达载体的构建，人类γ基因启动子及其上游的调控序列中存在着BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。为了确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置，科研人员用PCR技术扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，相关信息如图所示。请回答下列问题：
(1)为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达,需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知,在F1~F7末端添加的序列所对应的限制酶是___________，在R末端添加的序列所对应的限制酶是_________。本实验中,从产物扩增到载体构建
完成的整个过程共需要________种酶。
(2)将构建的载体导人除去BCL11A基因的受体细胞,成功转化后,含F1~F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白,受体细胞有荧光,含
F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是______________________。
(3)向培养液中添加适量的雌激素,含F1~F4与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含F5~F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光
若y基因上游调控序列上与引物序列所对应的位置不含有BCL11A蛋白的结合位点序列，据此结果可推测,BCL11A蛋白结合位点位于____________________,理由是___________________________________________。
|
| | | 题型：简答题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 12 |
基因工程的关键步骤是基因表达载体的构建，人类γ基因启动子及其上游的调控序列中存在着BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。为了确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置，科研人员用PCR技术扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，相关信息如图所示。请回答下列问题：
(1)基因表达载体包括复制原点、目的基因、 （答出3点）。据图可知，扩增的γ基因上游不同长度的片段中，扩增出最长的片段需要选用的引物组合为 。
(2)由于荧光蛋白基因缺少启动子，为了使荧光蛋白基因正常表达，需要在其 （填“Nhe I”或“Mun I”）侧接入启动子；启动子的作用是 。
(3)构建基因表达载体的过程中，除了注意酶切后目的基因和载体露出相同的黏性末端，还需要注意连接方向以便表达。据图分析，为了使荧光蛋白基因正常表达，γ基因启动子及其上游的 （填“R”或“F1”）调控序列应接在荧光蛋白基因的Mun I端， （填“R”或“F1”）调控序列应接在荧光蛋白基因的Xho I端。
(4)引物的合成是PCR成功的关键，PCR扩增时，要有 ，以便合成引物。制作引物过程中需要注意 之间不能有互补的序列，同一引物内部也不能有互补的序列。
【第 12533 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
【参考答案】(1) 标记基因、启动子、终止子 F1-R
(2) Mun I RNA聚合酶识别和结合的部位，可驱动基因转录
(3) R F1
(4) 一段已知目的基因的核苷酸序列 两种引物
基因工程的关键步骤是基因表达载体的构建，人类γ基因启动子及其上游的调控序列中存在着BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。为了确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置，科研人员用PCR技术扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，相关信息如图所示。请回答下列问题：
(1)基因表达载体包括复制原点、目的基因、 （答出3点）。据图可知，扩增的γ基因上游不同长度的片段中，扩增出最长的片段需要选用的引物组合为 。
(2)由于荧光蛋白基因缺少启动子，为了使荧光蛋白基因正常表达，需要在其 （填“Nhe I”或“Mun I”）侧接入启动子；启动子的作用是 。
(3)构建基因表达载体的过程中，除了注意酶切后目的基因和载体露出相同的黏性末端，还需要注意连接方向以便表达。据图分析，为了使荧光蛋白基因正常表达，γ基因启动子及其上游的 （填“R”或“F1”）调控序列应接在荧光蛋白基因的Mun I端， （填“R”或“F1”）调控序列应接在荧光蛋白基因的Xho I端。
(4)引物的合成是PCR成功的关键，PCR扩增时，要有 ，以便合成引物。制作引物过程中需要注意 之间不能有互补的序列，同一引物内部也不能有互补的序列。
|
| | | 题型：简答题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 13 | 镰状细胞贫血是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病，是由位于人类6号染色体上的血红蛋白基因发生隐性突变导致的，纯合子患者多数在幼年时期因红细胞严重溶血而亡。某夫妻双方都为该致病基因的携带者，为了生下健康孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为这对夫妇及腹中孩子核酸分子杂交诊断的结果示意图。
请回答下列问题：
（1）由图中可知，正常基因B有三个酶切位点，由于发生了_____________________导致突变基因b 上只有两个酶切位点。凝胶电泳分离酶切片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱。与图中正常基因模板链杂交的碱基对应序列为__________________。
（2）根据凝胶电泳带谱分析，腹中胎儿的基因型为___________。
（3）若通过基因治疗将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞将有望彻底治愈镰状细胞贫血。某科研团队设想运用重叠延伸PCR 技术来实现对致病基因的定点诱变，原理如右图所示：
①PCR过程中需要的物质有DNA 模板、引物、____________________________________
_________________________________________（至少写出两个）。
②该过程共用到4种引物，引物B的突起处的碱基应设计为__________（假设引物为单链DNA ，且上方这条链为模板链）。
③在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA 的过程中，两个反应系统中均进行一次复制，共产生__________种DNA 分子。请分析该阶段两个反应系统必须分开进行的原因是___________________________。
④第二阶段PCR4 反应系统选择的引物为______________________。 【第 12517 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
【参考答案】
(1)碱基对的替换(1分) 5'一AACTCGT-3(1分)
(2)bb(1分)
(3)①耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、含镁离子的缓冲液(2分,答对两个才给分)
②T(2分)
③3(2分) 引物B和C中存在互补配对片段,置于同一反应系统时它们会发生结合而失去作用(2分)
引物A、引物 D(2分)
镰状细胞贫血是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病，是由位于人类6号染色体上的血红蛋白基因发生隐性突变导致的，纯合子患者多数在幼年时期因红细胞严重溶血而亡。某夫妻双方都为该致病基因的携带者，为了生下健康孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为这对夫妇及腹中孩子核酸分子杂交诊断的结果示意图。
请回答下列问题：
（1）由图中可知，正常基因B有三个酶切位点，由于发生了_____________________导致突变基因b 上只有两个酶切位点。凝胶电泳分离酶切片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱。与图中正常基因模板链杂交的碱基对应序列为__________________。
（2）根据凝胶电泳带谱分析，腹中胎儿的基因型为___________。
（3）若通过基因治疗将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞将有望彻底治愈镰状细胞贫血。某科研团队设想运用重叠延伸PCR 技术来实现对致病基因的定点诱变，原理如右图所示：
①PCR过程中需要的物质有DNA 模板、引物、____________________________________
_________________________________________（至少写出两个）。
②该过程共用到4种引物，引物B的突起处的碱基应设计为__________（假设引物为单链DNA ，且上方这条链为模板链）。
③在第一阶段获得两种具有重叠片段DNA 的过程中，两个反应系统中均进行一次复制，共产生__________种DNA 分子。请分析该阶段两个反应系统必须分开进行的原因是___________________________。
④第二阶段PCR4 反应系统选择的引物为______________________。 |
| | | 题型：单选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 14 | CRISPR/Cas9 是一种高效的基因编辑技术，𝐶𝑎𝑠9基因表达的Cas9 蛋白像一把“分子剪刀”，在单链向导RNA(SgRNA) 引导下，切割DNA 双链以敲除目标基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9 基因编辑技术的工作原理如右图所示。据图分析，下列叙述正确的是
A.构建CRISPR/Cas9重组质粒，需要用到的工具酶有限制酶、DNA 连接酶和质粒
B.将重组质粒导入大肠杆菌细胞的方法是农杆菌转化法
C.SgRNA与Cas9蛋白形成复合体，该复合体的Cas9蛋白可识别并与目标DNA 序列特异性结合
D.利用基因编辑技术进行特定基因敲除，可以通过DNA 分子杂交技术进行检测 【第 12508 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
CRISPR/Cas9 是一种高效的基因编辑技术，𝐶𝑎𝑠9基因表达的Cas9 蛋白像一把“分子剪刀”，在单链向导RNA(SgRNA) 引导下，切割DNA 双链以敲除目标基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9 基因编辑技术的工作原理如右图所示。据图分析，下列叙述正确的是
A.构建CRISPR/Cas9重组质粒，需要用到的工具酶有限制酶、DNA 连接酶和质粒
B.将重组质粒导入大肠杆菌细胞的方法是农杆菌转化法
C.SgRNA与Cas9蛋白形成复合体，该复合体的Cas9蛋白可识别并与目标DNA 序列特异性结合
D.利用基因编辑技术进行特定基因敲除，可以通过DNA 分子杂交技术进行检测 |
| | | 题型：简答题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 15 | 动物器官移植到人体内（异种移植）或是解决全球器官紧缺的办法之一。研究团队对猪肾内皮细胞进行基因编辑、改造后，得到了3种工程细胞和可提供异种移植肾源的供体猪。具体流程及部分测量数据如图示。
(1)研究证实供体猪的3个聚糖抗原基因（3KO）会引致人类、猴等受体的组织不相容。若以未经改造的猪肾作为异体肾源进行器官移植，受体动物的 ______________________ 细胞和抗体都有可能对供体器官产生特异性攻击效应，导致出现 ______________________现象。利用CRISPR-Cas9编辑技术敲除肾内皮细胞的3KO,该技术需人工设计一种“向导”RNA，其部分序列与3KO遵循 __________原则结合，并引导Cas9蛋白断裂DNA双链，从而敲除3KO。
(2)研究表明7个人类基因（7TG）可增加不同物种之间的兼容性。获取7TG的方法有 ______________________（答出一种即可）。
(3)为验证敲除3KO、插入7TG对异体细胞的保护作用，研究者将三组细胞与受体猴血清共孵育，置于CO 2培养箱中培养，CO 2的主要作用是 ___________。测量裂解细胞数如图示。据此得出结论:
(4)供体猪器官常携带多种病毒,其中部分病毒潜在人畜传播风险。例如已有实验证明PERV（猪内源性逆转录病毒）可以整合到体外培养的人类细胞基因组中。试分析若给人进行异种移植，PERV的基因可能通过供体猪器官整合到人类基因组的途径 _________________________________ 。因此，为确保安全，对已构建好的3KO.7TG.细胞需要进行灭活PERV处理，且在临床试行前须在动物模型中测试。
(5)从3KO.7TG.RI.细胞通过④过程构建供体猪所利用的现代生物学技术有________________（至少答出一种） 【第 12462 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
【参考答案】(1) 细胞毒性T 免疫排斥 （碱基）互补配对
(2)从基因文库中获取、PCR技术扩增目的基因、化学方法直接人工合成
(3) 维持培养液的pH 敲除3KO 并插入7IG会对异体细胞有更强的保护作用
(4)供体猪器官携带猪内源性逆转录病毒(PERV)，PERV接触并侵染人类细胞，在人体细胞内逆转录形成DNA，整合到人类基因组中。
(5)动物体细胞核移植、动物细胞培养(或早期胚胎培养、胚胎移植) 动物器官移植到人体内（异种移植）或是解决全球器官紧缺的办法之一。研究团队对猪肾内皮细胞进行基因编辑、改造后，得到了3种工程细胞和可提供异种移植肾源的供体猪。具体流程及部分测量数据如图示。
(1)研究证实供体猪的3个聚糖抗原基因（3KO）会引致人类、猴等受体的组织不相容。若以未经改造的猪肾作为异体肾源进行器官移植，受体动物的______________________ 细胞和抗体都有可能对供体器官产生特异性攻击效应，导致出现______________________现象。利用CRISPR-Cas9编辑技术敲除肾内皮细胞的3KO,该技术需人工设计一种“向导”RNA，其部分序列与3KO遵循__________原则结合，并引导Cas9蛋白断裂DNA双链，从而敲除3KO。
(2)研究表明7个人类基因（7TG）可增加不同物种之间的兼容性。获取7TG的方法有______________________（答出一种即可）。
(3)为验证敲除3KO、插入7TG对异体细胞的保护作用，研究者将三组细胞与受体猴血清共孵育，置于CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是___________。测量裂解细胞数如图示。据此得出结论:
(4)供体猪器官常携带多种病毒,其中部分病毒潜在人畜传播风险。例如已有实验证明PERV（猪内源性逆转录病毒）可以整合到体外培养的人类细胞基因组中。试分析若给人进行异种移植，PERV的基因可能通过供体猪器官整合到人类基因组的途径_________________________________ 。因此，为确保安全，对已构建好的3KO.7TG.细胞需要进行灭活PERV处理，且在临床试行前须在动物模型中测试。
(5)从3KO.7TG.RI.细胞通过④过程构建供体猪所利用的现代生物学技术有________________（至少答出一种） |
| | | 题型：简答题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 16 | 驹形杆菌可合成细菌纤维素（BC）并将其分泌到胞外组装成膜。作为一种性能优异的生物材料，BC膜应用广泛。研究者设计了酪氨酸酶（可催化酪氨酸形成黑色素）的光控表达载体，将其转入驹形杆菌后构建出一株能合成BC膜并可实现光控染色的工程菌株，为新型纺织原料的绿色制造及印染工艺升级提供了新思路（图一）。
回答下列问题：
(1)研究者优化了培养基的_______（答两点）等营养条件，并控制环境条件，大规模培养工程菌株后可在气液界面处获得BC菌膜（菌体和 BC膜的复合物）。
(2)研究者利用T7 噬菌体来源的RNA聚合酶（T7RNAP）及蓝光光敏蛋白标签，构建了一种可被蓝光调控的基因表达载体（光控原理见图二a，载体的部分结构见图二b）。构建载体时，选用了通用型启动子 PBAD（被工程菌 RNA 聚合酶识别）和特异型启动子PT7（仅被T7RNAP识别）。为实现蓝光控制染色，启动子①②及③依次为________，理由是___________。
(3)光控表达载体携带大观霉素（抗生素）抗性基因。长时间培养时在培养液中加入大观霉素，其作用为________________________（答两点）。
(4)根据预设的图案用蓝光照射已长出的BC菌膜并继续培养一段时间，随后将其转至染色池处理，发现只有经蓝光照射的区域被染成黑色，其原因是_____。
(5)有企业希望生产其他颜色图案的BC膜。按照上述菌株的构建模式提出一个简单思路______。 【第 12461 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
【参考答案】(1)碳源、氮源
(2)PT7、PBAD和PBAD 基因2和3正常表达无活性产物，被蓝光激活后再启动基因1表达
(3)抑制杂菌;去除丢失质粒的菌株
(4)该处细胞中T7RNAP激活，酪氨酸酶表达并合成黑色素
(5)将酪氨酸酶替换成催化其他色素合成的酶(或将酪氨酸酶替换成不同颜色蛋白)
驹形杆菌可合成细菌纤维素（BC）并将其分泌到胞外组装成膜。作为一种性能优异的生物材料，BC膜应用广泛。研究者设计了酪氨酸酶（可催化酪氨酸形成黑色素）的光控表达载体，将其转入驹形杆菌后构建出一株能合成BC膜并可实现光控染色的工程菌株，为新型纺织原料的绿色制造及印染工艺升级提供了新思路（图一）。
回答下列问题：
(1)研究者优化了培养基的_______（答两点）等营养条件，并控制环境条件，大规模培养工程菌株后可在气液界面处获得BC菌膜（菌体和 BC膜的复合物）。
(2)研究者利用T7 噬菌体来源的RNA聚合酶（T7RNAP）及蓝光光敏蛋白标签，构建了一种可被蓝光调控的基因表达载体（光控原理见图二a，载体的部分结构见图二b）。构建载体时，选用了通用型启动子 PBAD（被工程菌 RNA 聚合酶识别）和特异型启动子PT7（仅被T7RNAP识别）。为实现蓝光控制染色，启动子①②及③依次为________，理由是___________。
(3)光控表达载体携带大观霉素（抗生素）抗性基因。长时间培养时在培养液中加入大观霉素，其作用为________________________（答两点）。
(4)根据预设的图案用蓝光照射已长出的BC菌膜并继续培养一段时间，随后将其转至染色池处理，发现只有经蓝光照射的区域被染成黑色，其原因是_____。
(5)有企业希望生产其他颜色图案的BC膜。按照上述菌株的构建模式提出一个简单思路______。
|
| | | 题型：简答题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 17 | 斑点叶突变体是水稻在正常生长条件下在叶片或叶鞘上自发形成斑点的一类突变体，研究斑点叶突变体对揭示水稻的抗病反应机理具有重要意义。对野生型水稻进行诱变处理，获得一个水稻斑点叶突变体S。
【实验一】将突变体S与野生型水稻杂交，F1植株均为野生表型。F 1自交产生的F 2植株中，野生表型与斑点叶表型的比例接近3：1。
【实验二】检测发现，突变体S出现斑点叶表型是水稻中E基因突变所致（记为ES）。再对野生型与突变体S进行PCR扩增测序，测得相关基因和转录剪切后的mRNA的部分序列如图所示。
【实验三】进一步检测野生型和突变体S中E基因的相对表达量，发现突变体S中的表达量相较野生型显著下降。
回答下列问题：
(1)实验一F 2植株出现野生表型与斑点叶表型比例为3：1的原因是_ ________。
(2)实验二中，与野生型E基因序列相比，突变体S的ES基因中碱基对发生的变化为__ ___________。
(3)转录过程中通过__ _____酶的作用合成mRNA。真核生物中转录合成的mRNA在特定位点被识别后，部分序列在此会被剪切掉，其余序列加工形成成熟的mRNA。据此推测，突变体S成熟mRNA序列中只多出“AUAG”4个碱基的原因是_ ____________________。
(4)E基因表达水平的变化可通过分析水稻叶肉细胞中_ ______（填“DNA”或“mRNA”）含量得出。科学家发现突变体S表现出对白叶枯病很高的抗性，而白叶枯病是影响水稻产量的主要病害之一。根据实验三，提出一种预防水稻感染白叶枯病的方法为__ ___________________。 【第 12459 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
【参考答案】(1)在形成配子的过程中等位基因随同源染色体的分开而分离，造成性状分离
(2)GC被替换成AT
(3)RNA聚合 GU位置被识别并在之前进行切割
(4)mRNA 抑制E基因的表达
斑点叶突变体是水稻在正常生长条件下在叶片或叶鞘上自发形成斑点的一类突变体，研究斑点叶突变体对揭示水稻的抗病反应机理具有重要意义。对野生型水稻进行诱变处理，获得一个水稻斑点叶突变体S。
【实验一】将突变体S与野生型水稻杂交，F1植株均为野生表型。F1自交产生的F2植株中，野生表型与斑点叶表型的比例接近3：1。
【实验二】检测发现，突变体S出现斑点叶表型是水稻中E基因突变所致（记为ES）。再对野生型与突变体S进行PCR扩增测序，测得相关基因和转录剪切后的mRNA的部分序列如图所示。
【实验三】进一步检测野生型和突变体S中E基因的相对表达量，发现突变体S中的表达量相较野生型显著下降。
回答下列问题：
(1)实验一F2植株出现野生表型与斑点叶表型比例为3：1的原因是_________。
(2)实验二中，与野生型E基因序列相比，突变体S的ES基因中碱基对发生的变化为_____________。
(3)转录过程中通过_______酶的作用合成mRNA。真核生物中转录合成的mRNA在特定位点被识别后，部分序列在此会被剪切掉，其余序列加工形成成熟的mRNA。据此推测，突变体S成熟mRNA序列中只多出“AUAG”4个碱基的原因是_____________________。
(4)E基因表达水平的变化可通过分析水稻叶肉细胞中_______（填“DNA”或“mRNA”）含量得出。科学家发现突变体S表现出对白叶枯病很高的抗性，而白叶枯病是影响水稻产量的主要病害之一。根据实验三，提出一种预防水稻感染白叶枯病的方法为_____________________。
|
| | | 题型：简答题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 18 |
CD3D严重联合免疫缺陷（SCID）是由CD3D基因突变引起的，该突变阻止了T细胞生长发育所需的CD3D蛋白的合成。科研人员对第3代CRISPR/Cas9基因编辑系统进行改造，获得一种超精确的腺嘌呤碱基编辑系统（ABE），该系统主要由向导sgRNA、Cas9切口酶和腺嘌呤脱氨酶组成，作用机制如图1。利用该系统在CD3D-SCID患者的造血干细胞中可以更正约71.2%的致病突变。
(1)研究发现，Cas9切口酶催化双链DNA 键水解，腺嘌呤脱氨酶催化腺嘌呤核苷酸转变成次黄嘌呤核苷酸，次黄嘌呤核苷酸可以和胞嘧啶核苷酸碱基互补配对，据此推测，至少通过 次DNA复制可以完成修复。
(2)sgRNA是人工合成的一段能与靶基因互补配对的特殊序列，由23个连续碱基组成。sgRNA设计是否合理，对于CRISPR/Cas9基因编辑系统的切割有重要影响，否则会导致sgRNA脱靶，试分析其原因是 。
(3)为了对改造后的CD3D基因进行研究，把CD3D基因和His标签基因（His标签由6个组氨酸组成）连接起来构建融合基因，并构建重组基因表达载体，图2为载体、CD3D基因的结构、不同限制酶的识别序列及切割位点，欲将标签基因连接在CD3D基因编码区的末端，已知组氨酸的密码子为CAU，终止密码子为UAG。
①PCR的一般过程为 ，在变性之前通常有预变性，其目的是 。判断是否扩增出DNA片段，判断的依据是在紫外灯下直接观察DNA条带的分布及 来评价扩增的结果。如果电泳鉴定的结果不止一条条带分析可能的原因有 （至少答两点）。
②写出His的基因编码链的碱基序列5′ 3′。
③为构建融合基因并将其插入载体，科研人员设计了一对与CD3D基因编码区两端序列互补配对的引物，设计时需在引物 （填“A”或“B”）的5′端增加限制酶 的识别序列和His基因的编码序列，请写出该引物开头的12个碱基序列：5′ 3′。 【第 12456 题】 【题型】：简答题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
【参考答案】(1) 磷酸二酯 2/两/二
(2)当其他DNA序列也含有与sgRNA互补配对的序列，造成sgRNA错误结合而脱靶
(3) 变性→复性→延伸 增加模板DNA彻底变性的概率 宽度 引物设计不合理，它们与非目的序列有同源性或容易形成二聚体；退火温度过低；DNA聚合酶的质量不好 CATCATCATCATCATCATTAG B XhoⅠ CTCGAGCTAATG
CD3D严重联合免疫缺陷（SCID）是由CD3D基因突变引起的，该突变阻止了T细胞生长发育所需的CD3D蛋白的合成。科研人员对第3代CRISPR/Cas9基因编辑系统进行改造，获得一种超精确的腺嘌呤碱基编辑系统（ABE），该系统主要由向导sgRNA、Cas9切口酶和腺嘌呤脱氨酶组成，作用机制如图1。利用该系统在CD3D-SCID患者的造血干细胞中可以更正约71.2%的致病突变。
(1)研究发现，Cas9切口酶催化双链DNA 键水解，腺嘌呤脱氨酶催化腺嘌呤核苷酸转变成次黄嘌呤核苷酸，次黄嘌呤核苷酸可以和胞嘧啶核苷酸碱基互补配对，据此推测，至少通过 次DNA复制可以完成修复。
(2)sgRNA是人工合成的一段能与靶基因互补配对的特殊序列，由23个连续碱基组成。sgRNA设计是否合理，对于CRISPR/Cas9基因编辑系统的切割有重要影响，否则会导致sgRNA脱靶，试分析其原因是 。
(3)为了对改造后的CD3D基因进行研究，把CD3D基因和His标签基因（His标签由6个组氨酸组成）连接起来构建融合基因，并构建重组基因表达载体，图2为载体、CD3D基因的结构、不同限制酶的识别序列及切割位点，欲将标签基因连接在CD3D基因编码区的末端，已知组氨酸的密码子为CAU，终止密码子为UAG。
①PCR的一般过程为 ，在变性之前通常有预变性，其目的是 。判断是否扩增出DNA片段，判断的依据是在紫外灯下直接观察DNA条带的分布及 来评价扩增的结果。如果电泳鉴定的结果不止一条条带分析可能的原因有 （至少答两点）。
②写出His的基因编码链的碱基序列5′ 3′。
③为构建融合基因并将其插入载体，科研人员设计了一对与CD3D基因编码区两端序列互补配对的引物，设计时需在引物 （填“A”或“B”）的5′端增加限制酶 的识别序列和His基因的编码序列，请写出该引物开头的12个碱基序列：5′ 3′。
|
| | | 题型：多选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 19 |
荧光 PCR 法根据化学发光原理可以分为染料法和探针法。染料法中特殊染料本身不发光,但是当PCR 扩增的时候,染料能够与DNA双链结合从而发光,如图1所示。探针法中除了引物外另外设置了一个探针,在探针的两端分别带上发光基团和淬灭基团,此时发光基团并不发光,但是当DNA通过引物合成的时候,探针被酶切降解释放出发光基团和淬灭基团,两种基团分开后产生荧光,如图2所示。下列说法正确的是
A.两种方法均可用于目标 DNA 的定量分析
B.与染料法相比,探针法的特异性更强
C.通过适当延长引物长度和降低复性温度可提高荧光PCR的特异性
D.用荧光 PCR 法检测人体是否感染新冠病毒前需要先进行逆转录
【第 12452 题】 【题型】：多选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
荧光 PCR 法根据化学发光原理可以分为染料法和探针法。染料法中特殊染料本身不发光,但是当PCR 扩增的时候,染料能够与DNA双链结合从而发光,如图1所示。探针法中除了引物外另外设置了一个探针,在探针的两端分别带上发光基团和淬灭基团,此时发光基团并不发光,但是当DNA通过引物合成的时候,探针被酶切降解释放出发光基团和淬灭基团,两种基团分开后产生荧光,如图2所示。下列说法正确的是
A.两种方法均可用于目标 DNA 的定量分析
B.与染料法相比,探针法的特异性更强
C.通过适当延长引物长度和降低复性温度可提高荧光PCR的特异性
D.用荧光 PCR 法检测人体是否感染新冠病毒前需要先进行逆转录
|
| | | 题型：单选题 难度值：1 [0] 知识点：第2节 基因工程的基本操作.. | | | | | 【试题】 20 | 临床上可采用PCR和DNA反向点杂交相结合的检测技术对HPV基因进行分型,过程如下:设计出针对已知有致癌风险的23种HPV基因的特异性引物并标记上会发生显色反应的生物素,通过 PCR对待测样本 DNA进行扩增,再将扩增产物直接与固定在膜上的分型基因探针(包括17种高危型和6种低危型)进行杂交。经显色处理后,与固定化探针结合的HPV基因就会在相应位置产生显色反应,从而判断待测样本是否被含有这些HPV基因的病毒感染。有关说法错误的是
A.生物素应标记在引物的5'端
B.该检测技术需要对扩增的DNA样本进行琼脂糖凝胶电泳
C.该检测技术具有高度的特异性,能够准确地区分不同类型的HPV病毒
D.反向点杂交是通过分型基因探针与扩增的目的片段碱基互补配对结合在起的
【第 12442 题】 【题型】：单选题 【章节】：第2节 基因工程的基本操作程序
【特大】 【较大】 【适中】 【较小】 【特小】 【显示答案】 【关闭答案】 ﹤﹤上题 下题﹥﹥ CLOSE
临床上可采用PCR和DNA反向点杂交相结合的检测技术对HPV基因进行分型,过程如下:设计出针对已知有致癌风险的23种HPV基因的特异性引物并标记上会发生显色反应的生物素,通过 PCR对待测样本 DNA进行扩增,再将扩增产物直接与固定在膜上的分型基因探针(包括17种高危型和6种低危型)进行杂交。经显色处理后,与固定化探针结合的HPV基因就会在相应位置产生显色反应,从而判断待测样本是否被含有这些HPV基因的病毒感染。有关说法错误的是
A.生物素应标记在引物的5'端
B.该检测技术需要对扩增的DNA样本进行琼脂糖凝胶电泳
C.该检测技术具有高度的特异性,能够准确地区分不同类型的HPV病毒
D.反向点杂交是通过分型基因探针与扩增的目的片段碱基互补配对结合在起的
|
| |
|
共计：119 条记录 页次：2/12 每页：10 条
9 [1] 2 [3][4] 8 : |
|
| 加入收藏
| 学校官网
| 田径运动会
| 站点二维码 【我要留言】 
