苜蓿夜蛾是番茄的主要害虫之一。某实验室将抗虫基因转入番茄，培育出抗虫番茄。下图是获得转基因番茄的技术流程（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，番茄叶片对卡那霉素高度敏感），回答下列问题：
（1）构建重组质粒的过程中需要用到DNA连接酶，DNA连接酶根据来源分为两类：T4DNA连接酶和E•coli DNA连接酶，但这两种酶作用有所差别：______________________只能连接双链DNA的黏性末端，而______________________ 既可以连接双链DNA的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA的齐平末端。
（2）土壤农杆菌的感染特点是能在自然条件下感染双子叶植物和______________________ 植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力。
（3）将重组质粒导人土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够感染番茄细胞，并将___________转移至受体细胞的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到番茄细胞的______________________上，最终形成转基因植株。
（4）将经过脱分化形成的愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素和 ______________________的培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选出转基因番茄。
（5）用PCR方法检测转基因番茄是否含有目的基因时，需根据 ______________________的核苷酸序列设计特异引物，以 _________________________________为模板进行第一轮扩增。
【第 2849 题】 【题型】：简答题 【章节】：第3节 基因工程的应用
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【参考答案】（1）E•coliDNA连接酶 T4DNA连接酶
（2）裸子（1分） （3）T—DNA 染色体DNA （4）卡那霉素
（5）抗虫基因（目的基因） 转基因番茄的DNA（或“含目的基因的番茄DNA”）
苜蓿夜蛾是番茄的主要害虫之一。某实验室将抗虫基因转入番茄，培育出抗虫番茄。下图是获得转基因番茄的技术流程（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，番茄叶片对卡那霉素高度敏感），回答下列问题：
（1）构建重组质粒的过程中需要用到DNA连接酶，DNA连接酶根据来源分为两类：T4DNA连接酶和E•coli DNA连接酶，但这两种酶作用有所差别：______________________只能连接双链DNA的黏性末端，而______________________ 既可以连接双链DNA的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA的齐平末端。
（2）土壤农杆菌的感染特点是能在自然条件下感染双子叶植物和______________________ 植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力。
（3）将重组质粒导人土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够感染番茄细胞，并将___________转移至受体细胞的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到番茄细胞的______________________上，最终形成转基因植株。
（4）将经过脱分化形成的愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素和 ______________________的培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选出转基因番茄。
（5）用PCR方法检测转基因番茄是否含有目的基因时，需根据 ______________________的核苷酸序列设计特异引物，以 _________________________________为模板进行第一轮扩增。
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