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	题型：简答题难度值：1 [0] 知识点：第2节微生物的培养技术与..
【试题】 11	微生物在培养基中的生长情况可以用多种方法测定，常用的方法是直接或间接地计算培养基中微生物细胞的数目，如稀释涂布平板法就是一种能够相对精确地测定培养基中活细胞密度的常用方法，其具体操作过程如下图所示。请回答下列问题：（1）对图中培养皿进行灭菌时最常用的方法是____________________________________。（2）使用稀释涂布平板法时，需要将原培养物先进行__________________，然后接种到平板上，培养一段时间后，统计平板上的____________________________________数。（3）据图计算，1mL原培养物中的细胞约有____________________________________个。通过此方法统计样品中活菌数目的原理是____________________________________。（4）稀释涂布平板法不宜用于某些食品工业（比如酸奶等）的质量检测（目的菌数是否达标），原因是______________________________________ ，这时可以采用___________________的方法来统计细胞的数目。【第 11100 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）干热灭菌法（2分）（2）一系列的梯度稀释【补充：梯度稀释】（2分）　　　　平均菌落（2分）（3）3．5×106（2分）　　当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌（2分）　　　（4）用稀释涂布平板法对细菌计数时测的是活菌数。但食品久置容易变质。导致其中大量目的菌死亡而无法测得实际目的菌数（3分）显微镜直接计数【补充：“血球计数板”或“血细胞计数板”或“抽样检测”】（2分）微生物在培养基中的生长情况可以用多种方法测定，常用的方法是直接或间接地计算培养基中微生物细胞的数目，如稀释涂布平板法就是一种能够相对精确地测定培养基中活细胞密度的常用方法，其具体操作过程如下图所示。请回答下列问题：（1）对图中培养皿进行灭菌时最常用的方法是____________________________________。（2）使用稀释涂布平板法时，需要将原培养物先进行__________________，然后接种到平板上，培养一段时间后，统计平板上的____________________________________数。（3）据图计算，1mL原培养物中的细胞约有____________________________________个。通过此方法统计样品中活菌数目的原理是____________________________________。（4）稀释涂布平板法不宜用于某些食品工业（比如酸奶等）的质量检测（目的菌数是否达标），原因是______________________________________ ，这时可以采用___________________的方法来统计细胞的数目。

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【试题】 12	螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素，幽门螺杆菌重要毒性物质尿素酶可以分解口腔内的尿素等物质产生难闻的、严重的氨臭味。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：回答下列问题： (1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有___________________________________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现_________________________ 色环带。 (2)步骤X表示_________________________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得_________________________菌落。 (3)若在稀释倍数为10⁶倍下涂布了三个平板(每次取0．1mL)，统计菌落数分别为169、171、170，则稀释前1mL菌液中所含螺杆菌为_________________________个。这种计数方法统计的数据结果往往会比显微镜直接计数的结果小，其原因是__________________________________________________ 。 (4)临床上用¹⁴ C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴ C标记的分解为NH₃和¹⁴CO₂。【第 11091 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】 (1)脲酶红 (2)接种单一 (3)1．7×10⁹ 该方法只是统计活菌数量，并且当多个细菌相互靠近时，会形成一个菌落，造成计数结果偏小(3分) (4)尿素螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素，幽门螺杆菌重要毒性物质尿素酶可以分解口腔内的尿素等物质产生难闻的、严重的氨臭味。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：回答下列问题： (1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有___________________________________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现_________________________ 色环带。 (2)步骤X表示_________________________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得_________________________菌落。 (3)若在稀释倍数为10⁶倍下涂布了三个平板(每次取0．1mL)，统计菌落数分别为169、171、170，则稀释前1mL菌液中所含螺杆菌为_________________________个。这种计数方法统计的数据结果往往会比显微镜直接计数的结果小，其原因是__________________________________________________ 。 (4)临床上用¹⁴ C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴ C标记的分解为NH₃和¹⁴CO₂。

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【试题】 13	测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样一水样中的细菌留在滤膜上一将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB培养基）上培养一统计菌落数目。据图回答问题：（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是________________________。与过滤有关的操作都要在________________________旁进行。（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的____________________操作。从物理状态的角度分析，EMB培养基属于________________________培养基。（3）某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将l0 ml 待测水样加入到90 ml无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测l升待测水样中的大肠杆菌数目为________________________个。（4）该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是________________。另一份要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径________（填“更小” “不变”或“更大”）的滤膜，而培养基配方中则必需添加________________（从“水、无机盐、碳源、氮源”中选择）。【第 11054 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)滤杯、滤膜和滤瓶酒精灯火焰(1分) (2)接种固体 (3)3100 (4)有无(成形的)细胞核更大水、无机盐、氮源测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样一水样中的细菌留在滤膜上一将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB培养基）上培养一统计菌落数目。据图回答问题：（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是________________________。与过滤有关的操作都要在________________________旁进行。（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的____________________操作。从物理状态的角度分析，EMB培养基属于________________________培养基。（3）某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将l0 ml 待测水样加入到90 ml无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测l升待测水样中的大肠杆菌数目为________________________个。（4）该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是________________。另一份要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径________（填“更小” “不变”或“更大”）的滤膜，而培养基配方中则必需添加________________（从“水、无机盐、碳源、氮源”中选择）。

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【试题】 14	日前微博传言手机细菌比马桶多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题： (1) 该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、氮源、____________________________，培养基一般放人______________中进行灭菌。 (2) 据图。两电视台均采用______________法接种，该方法需要____________________________。(多选) A．接种环 B．酒精灯 C．移液管 D．涂布器 E，无菌水 (3) 通过观察菌落的____________________________。可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是： ____________________________________________________________________________________ (4) 按图操作取样面积。实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将l0 ml，菌悬液进行梯度稀释。分别取0．1 ml。稀释倍数为l02的样品液接种到三个培养基上。培养一段时间后。统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为_________个/平方厘米。该实验对照组该如何设置____________________________________。【第 10989 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)无机盐(1分，“琼脂”不作为扣分或给分的标准) 高压蒸汽灭菌锅 (2)稀释涂布平板(法) BCDE (3)形态、大小(答出一点即给2分，也可填“颜色”或其他合理答案) 手机的取样和马桶的取样都不相同 (答出“取样不同”即得2分) (4)2×10⁴取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养日前微博传言手机细菌比马桶多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题： (1) 该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、氮源、____________________________，培养基一般放人______________中进行灭菌。 (2) 据图。两电视台均采用______________法接种，该方法需要____________________________。(多选) A．接种环 B．酒精灯 C．移液管 D．涂布器 E，无菌水 (3) 通过观察菌落的____________________________。可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是： ____________________________________________________________________________________ (4) 按图操作取样面积。实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将l0 ml，菌悬液进行梯度稀释。分别取0．1 ml。稀释倍数为l02的样品液接种到三个培养基上。培养一段时间后。统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为_________个/平方厘米。该实验对照组该如何设置____________________________________。

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【试题】 15	一科技小组欲从土壤中筛选纤维素分解菌。请回答下列问题：（1）配制能筛选纤维素分解菌的培养基时，要选用以纤维素为唯一_______的选择培养基，理由是_______________。对培养基灭菌时常采用的方法是____________________________。（2）将1 g土壤样品稀释104倍，然后在三个平板上用涂布法分别接种0.1 mL稀释液，经适当培养后3个平板上的菌落数分别为42、40和44。由此推测原土壤中1 g样品中的活菌数为_________；涂布平板时滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是_____________。（3）为鉴定不同菌株分解纤维素的能力，在配制含有刚果红的鉴别培养基上接种第（2）步中的不同菌株，原因是刚果红可与纤维素形成________色复合物。应选择透明圈直径与菌落直径比值_____（填“大”或“小”）的菌落用于生产。【第 10778 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】（1）碳源只有纤维素分解菌能利用纤维素作为碳源，而其他杂菌因不能利用纤维素而不能存活高压蒸汽灭菌法（2）4.2×10⁶（3 分）培养基表面菌液过多会导致菌体堆积，影响分离效果（3）红大一科技小组欲从土壤中筛选纤维素分解菌。请回答下列问题：（1）配制能筛选纤维素分解菌的培养基时，要选用以纤维素为唯一_______的选择培养基，理由是_______________。对培养基灭菌时常采用的方法是____________________________。（2）将1 g土壤样品稀释104倍，然后在三个平板上用涂布法分别接种0.1 mL稀释液，经适当培养后3个平板上的菌落数分别为42、40和44。由此推测原土壤中1 g样品中的活菌数为_________；涂布平板时滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是_____________。（3）为鉴定不同菌株分解纤维素的能力，在配制含有刚果红的鉴别培养基上接种第（2）步中的不同菌株，原因是刚果红可与纤维素形成________色复合物。应选择透明圈直径与菌落直径比值_____（填“大”或“小”）的菌落用于生产。

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【试题】 16	苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如图所示：①为土壤样品。请回答下列问题： (1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源。②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响；B.不影响)细菌的数量。如果要测定②中活细菌数量，常采用________________法。 (2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于 ________________________________________________________________________；使用________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？ (3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？ (4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？【第 10083 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)苯酚　A　平板菌落计数(活菌计数或菌落计数) (2)④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源　平板分离(稀释涂布平板或平板划线分离)　避免培养过程产生的水分影响微生物的生长。　 (3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量。 (4)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作。苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如图所示：①为土壤样品。请回答下列问题： (1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源。②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响；B.不影响)细菌的数量。如果要测定②中活细菌数量，常采用________________法。 (2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于 ________________________________________________________________________；使用________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？ (3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？ (4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？

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【试题】 17	完成下列关于微生物培养的相关问题： (1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外,还要考虑_______、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_______(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能____________________________________。 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。 (4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的 ________________________________________________________________________。 (5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是__________________________________________________________________。【第 10082 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)温度　酸碱度　易培养　生活周期短　(2)灭菌　消毒　损伤DNA的结构　(3)比例合适　(4)鉴定(或分类) (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生　(6)灭菌完成下列关于微生物培养的相关问题： (1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外,还要考虑_______、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_______(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能____________________________________。 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。 (4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的 ________________________________________________________________________。 (5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是__________________________________________________________________。

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【试题】 18	炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。 (1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。 (2)细菌鉴定：实验流程如图所示 ①对配制的液体培养基等需采取________方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为________(填“无机碳”或“有机碳”)。 ②挑选可疑菌落制片后，用________观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。 ③接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是________________________________________________________________________。对照组试管中应加入________，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组________(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。 ④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体，与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有________。【第 10081 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(2)①高压蒸汽(98 kPa蒸汽)　有机碳　②显微镜　③细菌大量繁殖　等量生理盐水　低　④吞噬细胞、效应B细胞炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。 (1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。 (2)细菌鉴定：实验流程如图所示 ①对配制的液体培养基等需采取________方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为________(填“无机碳”或“有机碳”)。 ②挑选可疑菌落制片后，用________观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。 ③接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是________________________________________________________________________。对照组试管中应加入________，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组________(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。 ④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体，与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有________。

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【试题】 19	生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图) (1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用________、________方法从油料作物中提取。 (2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供________，培养基灭菌采用的最适方法是________法。 (3)测定培养液中微生物数量，可选用________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用________技术使脂肪酶能够重复使用。 (4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的________技术。【第 10080 题】【题型】：简答题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】(1)压榨　萃取(注：两空顺序无先后) (2)碳源　高压蒸汽灭菌 (3)显微镜直接计数　酶活性(或酶活力)　固定化酶(或固定化细胞) (4)PCR(或：多聚酶链式反应，聚合酶链式反应) 生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图) (1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用________、________方法从油料作物中提取。 (2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供________，培养基灭菌采用的最适方法是________法。 (3)测定培养液中微生物数量，可选用________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用________技术使脂肪酶能够重复使用。 (4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的________技术。

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【试题】 20	下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时 D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数【第 10079 题】【题型】：单选题【章节】：第2节微生物的培养技术与应用【特大】【较大】【适中】【较小】【特小】【显示答案】【关闭答案】 ﹤﹤上题下题﹥﹥ CLOSE 【参考答案】D 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时 D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

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